Escherichia coli gastro-enteritis
Invoering
Inleiding tot Escherichia coli gastro-enteritis Enterobacteriaceae omvat een grote groep gramnegatieve bacillen met vergelijkbare biologische eigenschappen, waarvan de meeste worden aangetroffen in de darmen van mensen en dieren. Sommige daarvan hebben duidelijke pathogene effecten op mensen. Wanneer de toestand van de gastheer verandert of bacteriën de darmen binnendringen. Buiten het kanaal kan de normale darmflora ook verschillende ziekten veroorzaken als een voorwaardelijke ziekteverwekker. Basiskennis Het aandeel van ziekte: 30% Gevoelige mensen: geen specifieke mensen Wijze van infectie: verspreiding van het spijsverteringskanaal Complicaties: diarree, uitdroging
Pathogeen
Oorzaken van Escherichia coli gastro-enteritis
(1) Oorzaken van de ziekte
Deze stam is een gramnegatieve bacil, de grootte is (1,1 ~ 1,5) m × (2,0 ~ 6,0) m (levende bacteriën) of (0,4 ~ 0,7) m × (1,0 ~ 3,0) m (kleurende bacteriën), de meeste stammen hebben een heel lichaam Flagella, kan bewegen, er zijn pili op het hele lichaam, geen sporen, sommige stammen hebben enveloppen, pili bevinden zich op het oppervlak van de bacteriën, vezelachtige bijlagen, zijn hydrofobe eiwitcomponenten, hebben goede antigeniciteit, kunnen het lichaam stimuleren om overeenkomstige te produceren Het antilichaam is een facultatieve anaërobe bacterie, die zich kan ontwikkelen bij 15 tot 45 ° C. De optimale groeitemperatuur is 37 ° C en de optimale pH is 7,4 tot 7,6 Op het darmbacteriënselectiemedium kan het lactose fermenteren om suiker te produceren. De indicator verkleurt om gekleurde kolonies te vormen, terwijl de meeste pathogene bacteriën in de Enterobacteriaceae lactose niet afbreken en de kolonies kleurloos zijn. Dit punt heeft een selectief effect op de isolatie van pathogene bacteriën van Enterobacteriaceae, glucose, lactose, maltose, mannitol. Een verscheidenheid aan suikeralcoholen produceert zuur om gas te produceren; voor sucrose, dulcitol, raffinose, rhamnose, enz. Variëren afhankelijk van de stam, IMVC-test is -, urease, fenylalanine, malonaat en ander negatief, antigeen De structuur is gecompliceerder en bestaat hoofdzakelijk uit drie soorten antigenen: O, H en K. Het O-antigeen is een hittebestendig polysacharidefosfolipidencomplex. Er zijn eerder 171 soorten, wat de basis is voor serotypering; H-antigeen is een hitte-labiel eiwit, en tot nu toe zijn 56 antigenen vastgesteld; K-antigeen is een envelop-antigeen en tot nu toe zijn 100 soorten bekend. Overleven voor weken tot maanden, overleving in de ontlasting bij lagere temperatuur, gevoelig voor resistentie tegen geneesmiddelen, het ontstaan van resistentie tegen medicijnen, voornamelijk verkregen door de afgifte van plasmiden met resistentiefactor (R-factor).
(twee) pathogenese
1. Invasiviteit: Escherichia coli heeft K-antigeen en pili, K-antigeen heeft anti-fagocytose en heeft het effect van het weerstaan van complement en antilichaam; pili kan helpen bacteriële hechting te produceren, cilia van giftige Escherichia coli produceren De bacterie wordt kolonisatiefactor of kolonisatiefactor genoemd, inclusief CFAI, CFAII. Ze worden bestuurd door bacteriële plasmiden en kunnen via plasmiden worden overgedragen op andere stammen. Ze zijn sterk antigeen en kunnen de gastheer stimuleren om specifieke antilichamen te produceren en invasief te zijn. De stam kan het oppervlak van het darmslijmvlies binnendringen en ontstekingen veroorzaken.
2. Enterotoxine: Etoxine die vrijkomt tijdens het groei- en voortplantingsproces wordt Escherichia coli enterotoxine genoemd, in overeenstemming met zijn warmtestabiliteit: hittebestendig enterotoxine (ST), hittebestendige worst Toxine (hitte-labiel enterotoxir, LT), zowel ST als LT worden gecodeerd door extrachromosomale genetische materiaalplasmiden, die de synthese regelen, en bepaalde stammen van EFEC produceren cytotoxische stoffen.
(1) Warmtelabiele enterotoxine (LT): enterotoxine vergelijkbaar met Vibrio cholerae, kan adenosinecyclase in intestinale epitheelcellen stimuleren, ATP omzetten in cAMP, overmatige secretie van darmvloeistof bevorderen en intestinale resorptiecapaciteit overschrijden. Als gevolg van diarree zorgt hittebestendig enterotoxine (ST) ervoor dat de hoeveelheid intracellulair cGMP toeneemt door guanylaatcyclase op de cellen te activeren, wat resulteert in een disfunctie van de vochtbalans en diarree.
(2) Endotoxine: Escherichia coli-celwand heeft endotoxineactiviteit en de toxische plaats ervan is lipide A; O-specifiek polysaccharide draagt bij aan de afweerfunctie van bacteriën tegen gastheer.
3. Adhesin: Adhesin (BFP), voorheen bekend als de pathogene Escherichia coli adhesiefactor (EAF), is een pili gecodeerd door een groot plasmide van de bacterie, die nauw verwant is met adhesie. BFP-gemedieerde hechting is lokale hechting. De bacteriën zijn niet gelijkmatig verdeeld over het celoppervlak, maar clusters of micro-kolonies zijn aanwezig op de cellen. Tegelijkertijd is de hechting langdurige hechting en zijn de bacteriecellen niet direct gerelateerd aan de cellen. Contact, de twee zijn verbonden door pili.
4. Ginseng: Ginseng, voorheen bekend als EAE-eiwit, is een klein buitenmembraaneiwit van enteropathogene Escherichia coli met een molecuulgewicht van 94 kD en een hoogte van het N-terminale gebied van de invasine van Yersinia. De homologie is dat het coderende gen eae A zich op het chromosoom van de cel bevindt en onlangs een vergelijkbare structuur van eae A is gevonden in hemorragische Escherichia coli.
Compactin is de belangrijkste materiaalbasis voor de nauwe hechting en invasie van Escherichia coli aan gastheercellen en veroorzaakt, wanneer het bindt aan de overeenkomstige receptoren op het gastheercelmembraan, de toename van de intracellulaire Ca2-concentratie en fosforylering van eiwitten. De steiger wordt herschikt om een dicht fibrillair actinepad te vormen bij de bacteriële hechting, waardoor de bacteriën de cellen kunnen binnendringen. Op dit moment verschijnen de geïnfecteerde cellen als borstelachtige randen en verliezen ze microvilli.
5.eae A-genenfamilie: Tnpho A werd ingevoegd in plasmide-bevattende EPEC-geïnduceerde mutaties Als resultaat bleken 22 stammen niet-invasief te zijn in 329 stammen en 5 stammen van Tnpho A werden ingevoegd in het eae A-gen van het chromosoom, hetgeen invasiviteit en dichtheid aantoont. Bijgevoegd, nauw verwant aan de productie van verdichting, verloren nog eens 2 stammen van Tnpho A ingebracht onder de eaeA, het vermogen om zich aan de epitheelcellen te hechten, maar produceerden nog steeds verdichting, wat aangeeft dat er een eae-gencluster in EPEC is, Het gen onder eae A heet eae B.
Door genetische studies, in combinatie met de bovengenoemde pathogene factoren, stelde Donnenberg voor dat de pathogenese van EPEC in drie fasen wordt verdeeld.De eerste fase wordt gemedieerd door BFP gecodeerd door bfp A op het EAF-plasmide, waardoor bacteriën aan elkaar kunnen hechten en zich aan de microvilli kunnen hechten. Plasmiden en chromosomale loci leiden tot initiële lokale adhesie, fase 2 chromosomale geninitiatiesignaalconversie, resulterend in eiwittyrosinefosforylering, verhoogde intracellulaire calciumconcentratie, vroege celsteigervernietiging, microvilli-veranderingen en vloeistofsecretie, derde Met het voortschrijden van de infectie wordt het eae-gencluster geactiveerd en zorgt het geproduceerde strakke hormoon ervoor dat de bacteriën zich hechten aan het epitheelcelmembraan, waardoor de celsteiger wordt vernietigd en de bacteriële hechting aan het lagere actine, myosine, enz., En een deel van de bacteriën het epitheel binnendringt. cellen.
Het voorkomen
Preventie van Escherichia coli gastro-enteritis
1. Beheer de bron van infectie
(1) Vroege detectie: door zelfrapportage, wederzijdse rapportage, ambulante patiënten, 24 uur per dag, enz., Vroege detectie van patiënten, plaatsen waar de epidemie heeft plaatsgevonden, speciale nadruk op medische observatie voor het managementpersoneel, watervoorzieningspersoneel, voedselverwerkend verkooppersoneel en conserveringspersoneel Begrijp regelmatig de situatie van de ontlasting, doe zo nodig onderzoek naar de ontlasting, tijdige ontdekking van patiënten en pathogene dragers, regelmatige follow-up van ontslagen patiënten uit het ziekenhuis, begrijp de ontlasting, met of zonder symptomen en tekenen, tijdige detectie van terugkerende en chronische patiënten.
(2) Isolatie en behandeling: diarree veroorzaakt door de patiënt of drager als de bron van infectie, de patiënt moet onmiddellijk naar het ziekenhuis worden gestuurd voor darmisolatie, behandeling, behandeling moet tijdig, grondig zijn en moet worden genezen vóór ontslag, tijdens de isolatieperiode Patiënten moeten gezondheidseducatie en -management versterken.Patiënten moeten zich houden aan verschillende voorschriften, bewust aandacht besteden aan niet-contact met gezonde mensen, en niet uitwerpselen dumpen om milieuvervuiling te voorkomen.
2. Snijd de verzendroute af
(1) Doe goed werk op het gebied van watertoevoer: de gezondheidsafdeling moet regelmatig de waterkwaliteit en het desinfectie-effect controleren en de gedecentraliseerde watertoevoer moet de waterbron selecteren. Drinkwater (inclusief water voor het huis, water om te wassen) moet worden gedesinfecteerd. Bij gebruik van chloordesinfectiemiddel, Let op het effectieve chloorgehalte en het resterende chloor moet op 0,2 ~ 0,3 mg / l worden gehouden.
(2) Beheer goede voedselhygiëne:
1 Frequente onderzoeken en lichamelijk onderzoek van de daders, vonden dat verdachte patiënten onmiddellijk naar het ziekenhuis werden gestuurd voor onderzoek en behandeling, het management van het personeel vóór en vóór de maaltijd (inclusief voor het koken) erop moest staan handen te wassen, werkkleding te dragen op het werk, schoon te houden, fistel Personeel, cateringpersoneel en kinderverzorgers moeten hun baan onmiddellijk verlaten nadat ze ziek zijn geworden en wachten tot ze volledig zijn hersteld voordat ze weer aan het werk gaan.
2 Implementeer het systeem voor het delen van maaltijden, was de afwas in water, bewaar de afwas in eetstokjes en steriliseer het gewone serviesgoed. Het voedsel dat overblijft moet voor het eten volledig worden verwarmd. Eet geen koude groenten en rauw voedsel of halfwaardetijdproducten. Niet kopen, niet doen, niet doen Eet beschimmeld voedsel, rauwe messen, borden en containers moeten worden gescheiden.
(3) Grijp het mestbeheer: mest, afval, rioolwater moeten op een onschadelijke manier worden behandeld, toiletten, veehokken, vuilstortplaatsen, enz., Moeten worden beheerd door een speciale persoon, elke dag worden gereinigd en gewassen, schoon blijven, geen vliegen.
(4) Doe goed werk op het gebied van milieuhygiëne: reinig en verwijder altijd afval. Deuren en ramen (inclusief toiletdeuren en ramen) moeten goede anti-vlieguitrusting hebben. Tijdens de vliegen moet u regelmatig medicijnen spuiten om vliegen te elimineren.
(5) Besteed aandacht aan persoonlijke hygiëne: ontwikkel door middel van gezondheidsvoorlichting goede hygiënische gewoonten, drink geen rauw water, eet geen onrein fruit en koud voedsel en sta erop de handen te wassen met water voor en na de maaltijd.
(6) Doe goed werk in de medische bescherming: draag handschoenen bij het hanteren van uitwerpselen en braaksel van de patiënt, breng zeep aan na contact met de patiënt en voor de maaltijd, was de handen grondig met stromend water en neem onmiddellijk preventieve maatregelen voor nauwe contacten.
3. Bescherm gevoelige populaties
Versterk lichaamsbeweging, let op werk en rust, let op voeding, drinkwaterhygiëne en persoonlijke hygiëne.Kies volgens de toenmalige epidemie de juiste vaccins, vaccinpreventie voor belangrijke populaties, oorlogstijd, redding en rampenbestrijding, en overweeg passende medicamenteuze preventie voor noodsituaties. .
4. Doe een goed epidemiologisch onderzoek naar de gezondheid
(1) Epidemiologisch onderzoek van epidemische gebieden: doe een goed gevalonderzoek, ontdek de bron van infectie en mogelijke overdrachtsvoorwaarden, neem preventieve maatregelen om de verspreiding van de ziekte te voorkomen en organiseer personeel om epidemiologisch onderzoek uit te voeren wanneer diarree heerst. Populaire oorzaken en epidemische factoren, nemen effectieve maatregelen om de epidemie te beheersen.
(2) Contactbeheer: degenen die in nauw contact staan met het leven moeten in quarantaine worden geplaatst om de gezondheidssituatie te begrijpen, vooral om vervuiling van waterbronnen te voorkomen.
(3) Expeditie en preventieve medicatie: al het personeel op het epidemische punt zal eenmaal per dag worden onderzocht vanaf de startdatum van de behandeling. Voor de tweede opeenvolgende dag moet de eerste oogst worden genomen voordat het geneesmiddel wordt ingenomen. De volgende medicijnen kunnen worden genomen voor preventie:
A. Samengestelde sulfamethoxazol: 2 keer / d per persoon, 2 tabletten elke keer, en zelfs 3 dagen geserveerd.
B. Doxycycline: de eerste dosis voor volwassenen is 0,2 g, en elke keer 0,1 g, eenmaal / d, en zelfs gedurende 3 dagen geserveerd.
C. Tetracycline: 0,5 g volwassen, eenmaal per 6 uur, en zelfs 3 dagen geserveerd.
D. Furazolidon: 2 maal / d, eenmaal 0,2 g, en zelfs 3 dagen geserveerd.
De dagelijkse hoeveelheid kinderen wordt berekend op basis van gewicht: verbinding sulfamethoxazol 25 mg, furazolidon 10 mg en doxycycline 6 mg.
Complicatie
Escherichia coli gastro-enteritis complicaties Complicaties, diarree, uitdroging
Misselijkheid en braken, frequentie van diarree komt vaker voor, meer waterige ontlasting, vanwege een groot aantal braken en diarree die duidelijke symptomen van uitdroging en acidose vertonen, kan acuut nierfalen optreden, als de behandeling niet op tijd is, kunnen zuigelingen en jonge kinderen binnen een paar dagen sterven.
Symptoom
Escherichia coli gastro-intestinale symptomen vaak voorkomende symptomen diarree is waterig met plakkerig ... opgeblazen hypokaliëmie convulsies hypothermie coma misselijkheid onregelmatige koorts hypokaliëmie
Vanwege de virulentie tussen de verschillende soorten Escherichia coli, de verschillende invasieve aandoeningen en het verschil in lichaamsweerstand, zijn de klinische manifestaties ook inconsistent.
Eén type is dat bacteriën zich alleen hechten aan het darmslijmvlies om te groeien en enterotoxine te produceren.Door de adenylylcyclase van darmwandcellen te activeren, wanneer het niveau van intracellulair cyclisch adenosinemonofosfaat (cAMP) is verhoogd, kan het de darmafscheiding bevorderen. (LT), en de secretie van darmvloeistof veroorzaakt door ST-toxine wordt gemedieerd door gecycliseerd guanosine (cGMP) en enterotoxine kan ook het epitheel van perifere bloedvaten beschadigen, diarree veroorzaken en een grote hoeveelheid waterige ontlasting ontladen (klinisch vergelijkbaar met cholera-achtige ziekte). Een ander type is dat bacteriën darmslijmvliesepitheelcellen kunnen binnendringen, zich kunnen vermenigvuldigen en toxische stoffen kunnen produceren, waardoor een netwerk van vloeistof in het darmlumen overstroomt en uiteindelijk de epitheelcellen scheuren, wat leidt tot darmslijmvliesnecrose en ulceratie en ontlasting met pus (Klinisch vergelijkbaar met dysenterie-achtige ziekte), de belangrijkste laesies zijn voornamelijk ileum.
Onderzoeken
Onderzoek van Escherichia coli gastro-enteritis
1. Verzamel specimens
Gebruik een steriel wattenstaafje om de ontlasting van patiënten met diarree te nemen.Als er geen ontlasting is, plaatst u een rectaal wattenstaafje gedrenkt in fosfaatbuffer in de anus 4-6 cm (zuigelingen 2 tot 3 cm) en roteert u het rectumoppervlak in het rectum. Nadat het slijm is verwijderd, bevindt het zich in de transport- of bewaaroplossing.Als het niet op tijd kan worden verzonden, moet het monster worden bewaard bij 4 ° C, maar niet langer dan 8 uur.
2. Verrijkings- en isolatiecultuur
Voor de isolatie van Escherichia coli moet zwak selectief medium worden gebruikt bij de initiële scheiding, zoals eosine methyleenblauw, Chinese blauwe roos sorbitol maikankai plaat, streepscheiding, gekweekt bij 35-37 ° C gedurende 18-24 uur. Bekijk de morfologische kenmerken van de kolonie, selecteer paars of donkerrood, de grootte is 1 ~ 3 mm, de randen zijn netjes en glanzend en de enkele kolonie van de centrale bobbel is geïdentificeerd.
3. Identificatie
(1) Voorlopige identificatie: volgens de kenmerken van kolonie, de met vlekken gekleurde bacteriële vorm en kleuringsreactie, werden de zuivere kweekbacteriën genomen voor biochemische reactie en de overeenkomstige resultaten werden aanvankelijk geïdentificeerd als Escherichia coli.
(2) Definitieve identificatie: de algemene routinetest kan worden gebruikt om de bovenstaande voorlopige identificatie te maken. Indien nodig kan de definitieve identificatie worden uitgevoerd volgens de biochemische reactie die wordt vermeld in het Berger System Bacteriology Handbook.
(3) Identificatietest: bepaalde Escherichia coli, met name niet-aangedreven niet-gefermenteerde melkextracten, moeten worden onderscheiden van Shigella.De belangrijkste identificatietests van de twee kunnen worden getest met natriumacetaat en ammoniumgluconaat en het gebruik van slijmzuur. In de drie testen van zoutzuurproductie was Escherichia coli positief, terwijl Shigella negatief was.
1 pathogene Escherichia coli:
A. Hypothetische test: kies de cultuur op de identificatieplaat waar de kolonie dicht groeit, en gebruik de drie soorten polyvalent O-serum van EPEC voor de dia-agglutinatietest, zoals agglutinatie met een bepaald multivalent O-serum en vervolgens met het multivalent serum. Het bevatte O monovalent serum wordt bijvoorbeeld getest, geagglutineerd met een bepaald O monovalent serum, en vervolgens worden 3 tot 5 individuele kolonies geplukt en wordt het serum onderworpen aan een agglutinatietest.
B. Biochemische test: selecteer de kolonie met sterke agglutinatie van O monovalent serum om trisaccharide-ijzer-agar te inoculeren, het sputummatrix-testpapier op te schorten en cultuur bij 36 ° C gedurende 18-20 uur, alle lactose, sucrosezuur, glucosezuurproductie en de meeste gasproductie, H2S negatief De sputum-positieve stam kan worden bevestigd als Escherichia coli. Als de sputummatrix negatief is, moet de VP-test negatief zijn en kan deze niet op de citraat-agar groeien om Escherichia coli te bevestigen.
C. Serologische bevestigingstest: schraap de kweek op de trisaccharide-ijzeragar, maak een bacteriesuspensie met fysiologische zoutoplossing en verdun tot een concentratie gelijk aan de MacFarland nr. 3 troebelheidsbuis. Als de oorspronkelijke titer 1 is: (160 ~ 320), kan 1:40 worden verdund (met 0,5% zoutoplossing), in een reageerbuis van 10 mm x 75 mm, het verdunde antiserum en de bacteriesuspensie worden gemengd in gelijke hoeveelheden, na observatie bij 50,6 ° C watertemperatuur gedurende 16 uur, als Aggregatie treedt op en kan worden bevestigd als de O-factor.
2 Hemorragische Escherichia coli: bekend als de ontlasting van patiënten met hemorragische enteritis, kan worden gestreept met sorbitol in plaats van lactose op de MacConkey-agarplaat, selecteer na kweek 3 tot 5 niet-gefermenteerde sorbitol kolonies, O157-serum (bij voorkeur tegelijkertijd met H7-serum) werd gebruikt voor de dia-agglutinatietest en de enkelvoudige buisagglutinatietest om de diagnose te bepalen.
De geïsoleerde stam moet worden ingeënt met trisaccharide-ijzeragar, gesuspendeerd sputummatrix-testpapier, gekweekt bij 36 ° C gedurende 18-20 uur, de typische biochemische kenmerken zijn lactose, sucrosezuurproductie, glucosezuurproductiegas, H2S-negatief, sputummatrixpositief en inoculatie De sorbitol-gistingsbuis is een langzame gisting.
3 giftige Escherichia coli:
A. Biochemische test: kies 5 coaguleerbare kolonies op het identificatieplaatje, kies in het algemeen de typische kolonies van lactosefermentatie, ent de trisaccharide-ijzer-agar in, suspendeer het sputummatrix-testpapier en kweken bij 36 ° C gedurende 18-20 uur, alle lactose, Sucrose produceert zuur, glucose produceert zuur en produceert meer gas H2S-negatieve, sputum-positieve stammen kunnen worden bevestigd als Escherichia coli. Als de sputummatrix negatief is, moet de VP-test negatief zijn en mag deze niet in het citraat zitten. Groei op agar kan worden bevestigd als Escherichia coli.
B. Enterotoxinetest: Toxigenische Escherichia coli wordt voornamelijk bevestigd door enterotoxinetest. Er zijn veel methoden voor enterotoxinetest. Op dit moment wordt LT gemeten met tweefasige agar-diffusietest en ST wordt gemeten door zuigtest in zuigmuizen. Konijnen werden geligeerd aan de ileumsectie om LT en ST te bepalen.
De twee enterotoxines zijn bepaald door genetische diagnose.
a. Tweeweg-agar-diffusietest: de teststammen werden op Elek-medium in een cirkelvormige lus op 5 punten geïnoculeerd en twee delen werden op dezelfde wijze bereid en 48 uur bij 36 ° C gekweekt en een polymyxa werd op het gazon van elke stam geplaatst. B-papier, bij 6 ° C gedurende 5 ~ 6 uur, darmtoxine in de agar, in het midden van 5 mm van het gazon, graaf een gat met een diameter van 4 mm en gebruik een druppel agarbodem, voeg LT antitoxine toe in het gat 30 ul, en de bekende LT en niet-toxigene stammen werden gebruikt als controles De cultuur werd waargenomen bij 36 ° C gedurende 15-20 uur Het witte neerslag was positief tussen de plaque en de antitoxine goed, anders was het negatief.
B. Inoculatietest van zuigende muizen: De geteste stammen werden geïnoculeerd in Honda toxigenic bouillon, 24 uur gekweekt bij 36 ° C, 30 minuten gecentrifugeerd met 3000 r / min en het supernatant werd gefilterd door een membraanfilter, 30 minuten verwarmd op 60 ° C en filtraat per ml. Voeg 0,02 ml 2% Evans blauwe oplossing toe, injecteer 0,1 ml van de 1e tot 4e dag zogende rattenmaag met plastic slang, ent tegelijkertijd 3 ~ 4, bevestig gedurende 3 ~ 4 uur, verdoof vervolgens met chloroform, verwijder alles Darmbuis, die het gewicht van de darm (inclusief effusie) en het resterende lichaamsgewicht weegt, de verhouding van darmgewicht tot restgewicht is groter dan 0,09 is positief, 0,07 ~ 0,09 is verdacht.
c. Konijnligatie en ileumtest: de geteste stam werd geïnoculeerd in Honda toxigenic bouillon, 24 uur gekweekt bij 36 ° C, 30 minuten gecentrifugeerd met 3000 r / min en het supernatant werd gefilterd door een membraanfilter. Het filtraat werd verdeeld in twee porties, één niet Verwarmen, voor het testen van LT; nog eens 60 ° C verwarmen gedurende 30 minuten, voor ST-test, neem 2 kg konijnen, vast gedurende 1 dag, laparotomie na anesthesie, verwijder het ileum-segment, volgens 10 ~ 15 cm voor een segment, segmentale ligatie, Neem 2 ml van een injectiebouillon als een negatieve controle en nog eens 2 ml van het filtraat van de bekende toxine-producerende bouilloncultuur als een positieve controle, en injecteer de andere 2 ml van het filtraat van de bouilloncultuur van de teststam in de andere secties en hecht de buikwand. Bij ST werd laparotomie 6 tot 8 uur na injectie uitgevoerd; toen LT werd gemeten, werd laparotomie 18 uur na injectie uitgevoerd en werd het filtraat in elk darmsegment genomen, het volume gemeten en de lengte van het darmsegment, de hoeveelheid vloeistof (ml) en de darm werden gemeten. De verhouding van de lengte van het segment (cm) is groter dan 1 om positief te zijn.
d) Serologische test: de enterotoxinetest-positieve stam kan worden gebruikt om het O-antigeen te bepalen door ETEC-gerelateerd multivalent O-serum en monovalent serum voor dia-agglutinatietest.
4 invasieve Escherichia coli:
A. Biochemische test: 3 tot 5 kolonies moeten worden geplukt op het identificatieplaatje.In het algemeen moeten meer kolonies van niet-gefermenteerde lactose vergelijkbaar met Shigella worden geplukt, maar de dominante kolonies van gefermenteerde lactose kunnen ook correct worden geplukt en zullen worden geplukt. De kolonies worden geïnoculeerd met halfvaste buizen en gedurende 18-24 uur gekweekt bij 36 ° C. De motiliteitsspanningen kunnen in het algemeen worden weggegooid tenzij de serologische identificatie 0124 is, waardoor de niet-aangedreven stam, geïnoculeerd met trisaccharide-ijzer-agar, hangend sputummatrix-testpapier, 36 achterblijft. Gekweekt bij ° C gedurende 18-20 uur en getest op lysine decarboxylase De typische biochemische kenmerken van EIEC zijn: lactose, sucrose produceert geen zuur of zuur, glucose produceert zuur, produceert gas of produceert geen gas, H2S is negatief en sputummatrix is positief. De lysine-decarboxylase is negatief en er is geen motiliteit behalve O124. De lysine-decarboxylatietest kan ook worden uitgevoerd na de serologische test.
B. Serologische test: een trisaccharide-ijzer-agar-cultuur werd opgepikt en twee multivalente O-serums van EIEC werden gebruikt voor een dia-agglutinatietest om de samenstelling van het O-antigeen te bepalen.
C. Cavia-hoornvliestest: de bacteriën werden 2 tot 5 dagen in de ogen van cavia's gebracht om te zien of er roodheid, tranen en congestie waren.
D. ELISA-test: konijnen werden geïmmuniseerd met toxische stammen van bekende EIEC of Shigella, en de verkregen immuunsera werden geabsorbeerd door een homologe avirulente stam, en bepaald door ELISA, EIEC toxische stammen en Shigella Het type toxische stammen is allemaal positief.Deze methode wordt gebruikt om het invasieve polypeptide van de geteste bacteriën te detecteren en kan ook worden gedetecteerd met de methode van de genprobe.
5 Geconcentreerde Escherichia coli: Een belangrijk kenmerk van de geconcentreerde Escherichia coli (EAEC) is de vorming van karakteristieke aggregaathechting rond Hap-2-cellen, en Yamamoto vond deze aggregatiehechting van EAEC bij 37 ° C. Het kan voorkomen op het groeioppervlak van sommige vloeibare media om een dikke hechtende geagglomereerde massa te vormen.Dit fenomeen treedt niet op bij 25 ° C of 42 ° C. Het vloeibare medium is het beste in L- of MH-medium, dat kan worden gebruikt als EAEC. Voorlopige identificatiemethode, de vorming van bacteriën in de test met vloeibaar medium: Escherichia coli geënt in MH vloeibaar medium (Difco), geïncubeerd bij 35 ~ 37 ° C gedurende 18 ~ 24 uur, waarbij het oppervlak (bodem van de gedeeltelijk zinkende buis) een massa vormde Het was positief en het was negatief voor een gelijkmatig troebel steriel blok.In 1996 voerden Wang Mei et al. Een eenvoudige screeningstest uit op intestinale cohesieve kleefstof Escherichia coli en testten de vorming van bacteriën op MH-medium met Hep-2. Vergelijking van de celhechtingstest toonde aan dat de mate van overeenstemming van de twee 77% was en 88,5% inclusief diffuus en gelokaliseerd, hetgeen aangeeft dat de stolselvormingstest een betrouwbare methode is voor voorlopige screening van EAggEC.
Er is momenteel geen relevante informatie.
Diagnose
Diagnose en identificatie van Escherichia coli gastroenteritis
Diagnostische criteria
Incubatie periode
Op korte termijn slechts een paar uur, Escherichia coli voedselvergiftiging, braken, diarree binnen 2 uur, de algemene incubatietijd is 1 tot 3 dagen.
2. Klinische manifestaties
(1) Lichttype: over het algemeen geen koorts, verlies van eetlust, diarree als de belangrijkste prestatie, dagelijkse ontlasting 3 tot 6 keer, vaak gele of groene indigestie-achtige losse ontlasting, meestal gemengd met een kleine hoeveelheid schuimsoep, En vergezeld van opgezette buik, buikpijn en misselijkheid.
(2) middelgroot: kan lage koorts hebben, naast milde symptomen en misselijkheid en braken, frequente diarree, meer waterige ontlasting, kunnen milde uitdroging en acidose symptomen hebben.
(3) Zwaar: de lichaamstemperatuur is onregelmatig heet, 38 ~ 40 ° C duurt enkele dagen, diarree is 10 ~ 20 keer per dag, vaak geelgroene waterige ontlasting, gemengd met een kleine hoeveelheid slijm, kan geur hebben, zie ook melkkleur Of rijstsoepachtige, vergelijkbaar met cholera, meestal misselijkheid en braken, baby's hebben vaak convulsies, vanwege een groot aantal braken en diarree die duidelijke symptomen van uitdroging en acidose vertonen, acuut nierfalen kan optreden, ongeveer 30% van ETEG diarree in Bangladesh Matige of ernstige uitdroging, ernstige uitdroging in volwassen gevallen, kan vaak niet worden onderscheiden van cholera, als de behandeling niet op tijd is, zuigelingen en jonge kinderen kunnen binnen enkele dagen sterven, EIEC diarree is vergelijkbaar met acute dysenterie, de belangrijkste symptomen van EHEC-infectie zijn Bloederige ontlasting en ernstige buikpijn, EAEC veroorzaakt door aanhoudende diarree (> 14 dagen), bloederige ontlasting, koorts (38 ° C) en braken.
3. Uitdroging en elektrolytenbalans
(1) Uitdroging: Afhankelijk van de mate van waterverlies in het lichaam, kan het worden onderverdeeld in licht, gemiddeld en zwaar 3 graden. De milde uitdroging van de oogkas is enigszins depressief en de pols is nog steeds normaal; matige uitdroging behalve de oogkas, de voorste depressie gaat gepaard met een gebrek aan elasticiteit van de huid. Gemakkelijk vast te pakken, huidhersteltijd is 2 ~ 5 sec., Vingerafdrukrimpels, polsslag; ernstige uitdroging, cyanose, huidgrijpen is niet gemakkelijk te herstellen, bloeddrukdalingen, vaak microcirculatiestoornissen, spierspasmen, zwakke pols, minder urine of Urine gesloten.
(2) Acidose: de ademhaling is duidelijk dieper, de CO2-bindende kracht is lager dan 18 mmol / L, de lippen zijn kersenrood en het keton wordt vaak in de adem gezien. De ernstige gevallen hebben prikkelbaarheid, lethargie, coma, convulsies en zelfs shock. Het CO2-bindende vermogen is 11,25 mmol. / L hieronder.
(3) hypokaliëmie: na rehydratatiebehandeling wordt het bloedconcentratieverschijnsel gecorrigeerd, wordt het urinevolume verhoogd en wordt de uitscheiding van bloedkalium versneld. Tegelijkertijd wordt, wanneer de glucose wordt gesynthetiseerd, het kalium in de cellen overgebracht en het serumkalium verlaagd. De symptomen van kaliumgebrek, duidelijke symptomen van hypokaliëmie verschijnen meer dan 1 week na diarree, ernstige gevallen van zacht gehemelte en zelfs ademhalingsspierverlamming, aritmie, coma, kunnen levensbedreigend zijn.
(4) Hypocalciëmie: treedt vaak op na bloedtransfusie of correctie van acidose, het kind huilt en rusteloos, spieren van de ledematen zijn gespannen, convulsies van de handen en voeten, convulsies en hyperreflexie.
Tijdens de epidemische periode moeten zuigelingen en jonge kinderen met diarree eerst rekening houden met Escherichia coli gastro-enteritis, eerste isolatiebehandeling, wachten op onderzoek naar pathogenen om de diagnose te bevestigen.In niet-epidemische periode, met name sporadische gevallen, is het vaak moeilijk om alleen klinisch te diagnosticeren. Moet worden gecombineerd met ziekteverwekkers, serologisch onderzoek bevestigd.
Differentiële diagnose
De oorzaken van diarree zijn gecompliceerder, zoals bacteriën, virussen, parasieten, enz. Sommige chemicaliën kunnen ook diarree veroorzaken.Escherichia coli enteritis moet worden onderscheiden van de volgende ziekten.
Bacteriële dysenterie
Veroorzaakt door Shigella, diarree met pus of slijm komt vaker voor, minder en vaak urgentie en zwaar, meer verkoudheid en warmte, microscopisch onderzoek van de ontlasting kan een groot aantal puscellen, rode bloedcellen en fagocytosecellen, babyvergiftigingsbacteriën vinden Of atypische bacillaire dysenterie moet worden geïdentificeerd door pathogene diagnose.
2. Vibrio cholerae
Na het veroorzaken van infectie treedt eerst ernstige diarree op en daarna braken, zelden misselijkheid, braken en diarree zijn ontlasting rijstachtig waterig, de hoeveelheid is groot, geen urgentie en zwaar, een klein aantal patiënten heeft een kleine hoeveelheid bloederige ontlasting, uitdroging veroorzaakt vaak spierpijn, huidrimpels, de temperatuur van het lichaamsoppervlak is lager dan normaal, microscopisch onderzoek kan extreem actieve Vibrio vinden, moet verder worden geïdentificeerd door bacteriecultuur.
3. Vibrio parahaemolytische voedselvergiftiging
Veroorzaakt door Vibrio parahaemolyticus, voornamelijk als gevolg van het eten van voedsel dat besmet is door de bacteriën (meer gerelateerd aan zeevruchten), het begin van snelle, eerst met koude rillingen, paroxysmale buikpijn (buikkrampen), braken diarree, De meeste zijn waterige ontlasting of bloederige waterige ontlasting, meestal voor dezelfde maaltijd, en moeten worden geïdentificeerd door een bacteriecultuur.
4. Salmonella voedselvergiftiging
Eten door Salmonella typhimurium besmet voedsel, acuut begin, vaak gepaard met koude, buikpijn, opgeblazen gevoel, misselijkheid, braken, diarree, waterige ontlasting en stank, vroege bacteriëmie, meer gewone mensen Begin, afhankelijk van ziekteverwekkers, serologische diagnose en identificatie.
5. Virale diarree
Diarree veroorzaakt door enterovirusinfectie, gekenmerkt door zeer besmettelijke, rotavirus, kleine ronde virussen en andere infecties braken in het vroege stadium, opeenvolgende diarree, meer waterige ontlasting en slijm, meestal in de herfst en winter, andere virale Diarree komt vaker voor in de zomer en herfst, misselijkheid en braken, naast gastro-intestinale symptomen, hebben vaak ademhalingssymptomen, faryngitis en convulsies, vaak met de nekspieren, rugspieren, kinderen in de leeftijd van meer gebruikelijk groen waterig of ei-achtig water Behandeling met antibiotica is in het algemeen niet effectief en het verloop van de ziekte is zelfherstellend binnen 5 tot 7 dagen en wordt verder geïdentificeerd door serologie en virusisolatie.
6. Campylobacter enteritis
Campylobacter jejuni veroorzaakt milde en virale enteritis en is vergelijkbaar met colitis ulcerosa of de ziekte van Crohn.Het heeft koorts, diarree of slijmachtige ontlasting, stank, galkleur, ernstige pus en bloederige ontlasting. Meer dan een week herstel, kinderen hebben vaak buikkrampen, convulsies kunnen optreden wanneer hoge koorts, de incidentie is meer gerelateerd aan contact met pluimvee, vee of het drinken van niet-gesteriliseerde melk, ruw water, donker veld microscopisch onderzoek kan de buiging van de boogschieten-achtige actieve kracht vinden Bacteriën, bacteriecultuur voor verdere diagnose.
7. Yersinia enteritis
Vaker bij kinderen, gerelateerd aan voedsel, watervervuiling, buikpijn, diarree, onderkoeling, waterige ontlasting, kan sepsis hebben, kan worden gecompliceerd door nodulair erytheem, pseudo-blindedarmontsteking, artritis, bacteriecultuur kan verder worden geïdentificeerd.
8. andere
Aandacht moet worden besteed aan de identificatie van diarree veroorzaakt door Giardia, Amoebische dysenterie en amoebe of Giardia kunnen worden gevonden in ontlastingsmicroscopie.
Het materiaal op deze site is bedoeld voor algemeen informatief gebruik en is niet bedoeld als medisch advies, waarschijnlijke diagnose of aanbevolen behandelingen.