D型肝炎抗原
D型肝炎ウイルス抗原は、感染細胞および末梢に存在します。 D型肝炎ウイルスの急性感染の初期段階では、B型肝炎ウイルス表面抗原の陽性期間中に1〜2週間、D型肝炎ウイルス抗原が血液中に検出されます。慢性感染は低力価で維持されます。 基本情報 専門家分類:感染症検査と分類:病原微生物検査 該当する性別:男性と女性が断食を適用するかどうか:断食 分析結果: 通常以下: 通常値: いや 通常以上: マイナス: 否定的な提案は、D型肝炎ウイルスに感染していませんでした。 ポジティブ: 陽性の兆候はD型肝炎ウイルスに感染しています。 ヒント:採血する前に空腹が必要です。 正常値 (1)視覚的な方法である茶色または黄色はHDAg陽性、無色は陰性です。 (2)492 nmの波長で光吸収値(A)を測定し、サンプルのA値とネガティブコントロールAの平均値に基づいてS / N値またはしきい値を計算するマイクロプレートリーダーを使用した比色法。サンプルS / N値が2.1以上の場合しきい値は正であり、その逆も同様です。 閾値=ネガティブコントロールA492平均x 2.1。 臨床的意義 D型肝炎ウイルス抗原は、感染した肝組織細胞と末梢血の無傷のウイルスに存在します。患者の末梢血でHDAG陽性が示された場合、体内にD型肝炎ウイルスが、血液にD型肝炎ウイルスが複製されています。 注意事項 (1)D型肝炎とB型肝炎の感染が同時に存在するため、末梢血を界面活性剤で処理した後、HBAgとHBcAgが同時に存在する可能性があるため、HBcAgの干渉を防ぐために注意を払う必要があります。したがって、非標識物質を酵素ラベルに追加する必要があります。 HBcAgを特異的に中和するモノクローナル抗体は除外されます。 (2)末梢血中の抗原量が少ないため、血清を少なくとも30〜50μlに希釈しないでください。 (3)比色法を使用して、偽陽性または偽陰性を回避するのが最善です。 (4)疑いのある検体についてテストを繰り返します。 検査プロセス 1、D型肝炎抗原の決定の原則 D型肝炎ウイルス抗原は、B型肝炎抗原(HBsAg)でカプセル化され、界面活性剤(Tween20またはNP40)で溶解した後に放出されます。抗原抗体特異的結合の免疫学的原理は、二重抗体サンドイッチ酵素に適用されます。免疫吸着アッセイによる検出。 2、試薬 (1)コーティングには抗HDV IgG精製抗体を使用しました。 (2)HRP抗HDV抗体。 (3)中和活性を有する抗HBcモノクローナル抗体:ELISA力価1:100、HRP-抗HDの希釈用。 (4)10%Tween20。 (5)その他の機器およびソリューションは上記と同じです。 3、操作方法 (1)抗HDV IgGコーティングポリスチレンプレートをコーティング溶液で希釈し、ウェルあたり100μlを37°Cで1時間、4°Cで一晩静置しました。 (2)3回洗浄した後、50μlの血清と陰性対照血清(陰性対照血清ウェル、陽性対照血清2ウェル)および10%Tween 2050μlを各ウェルに加え、完全に混合し、室温で一晩放置して溶解します。 B型肝炎ウイルス表面カプセル化HBsAgは、D型肝炎抗原を放出します。 (3)3回洗浄した後、50μlのHRP抗HDV抗体を各ウェルに加え(10%子牛血清に加えて10 ELISAユニットの抗HBcモノクローナル抗体)、45°Cで1時間(または37°C)置きます2h)。 (4)3回洗浄した後、新たに調製した基質溶液50μlを各ウェルに加え、室温で15〜30分間暗所で反応させ、ウェルあたり2 mol / L H 2 SO 4 25μlを加えて反応を停止します。 群衆に適していない 検査の適応がない場合は、このチェックを行うべきではありません。 副作用とリスク 通常、合併症や害はありません。
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