補体固定アッセイ
補体の決定には、総補体、溶血活性、個々の補体成分と補体フラグメントサイズの決定、およびアッセイへの補体の参加が含まれます。 抗原抗体複合体は補体と組み合わされており、既知の濃度を含む補体反応液の濃度が消費されて抗原または抗体を検出するための濃度が低下する現象は、特に本方法に従って高感度を検出する方法の1つです。この方法は、抗原抗体反応が沈殿反応または凝集反応によって観察できない場合にも使用できます。 基本情報 専門家分類:感染症検査と分類:病原微生物検査 該当する性別:男性と女性が断食を適用するかどうか:断食 分析結果: 通常以下: 通常値: いや 通常以上: マイナス: 通常の値、負、つまり0〜1:10。 感染性ウイルスに感染していないというプロンプト。 ポジティブ: 陽性の兆候は感染性ウイルスに感染しています。 ヒント:操作手順は複雑で、要件は非常に厳しいものであり、わずかな過失があると、誤った結果が得られます。 正常値 通常値:0から1:10。 臨床的意義 異常な結果:> 1:10は陽性で、ブルセラ症の診断の一致率は97.96%でした。 補体結合アッセイは、次の方法で適用できます。 1感染症の診断。 病原性抗原および対応する抗体の検出。 2他の抗原の検出。 例えば、腫瘍関連抗原、血液中のタンパク質同定、HLAタイピングなど。 3自己抗体検出。 注意事項 操作は慎重かつ正確でなければなりません;ガラス装置は非常にきれいでなければなりません;テストに関与する既知の成分は、信頼できる結果を確保するために事前に滴定し、指定された濃度に使用する必要があります 検査プロセス (1)血液の滴定: 1補体1mlを取り、BBS 9mlを加え、1:20、1:30、1:40、1:50、1:60、1:80、1:100、1:200、1:400に希釈し、50を取ります溶血素0.2 ml、溶血素1:100のBBS 9.8 mlを追加し、1:800、1:1600、1:3200、1:6400に希釈し続けます。 2正方形の試験管を取り、0.1mlの異なる濃度の補体を縦に追加し、各列に0.1mlの溶血素を追加し(すべて最高希釈から追加する必要があります)、次にBBS0.2ml、補数、溶血素コントロールチューブにそれぞれ0.3mlのBBSを加え、最後に2%のヒツジ赤血球を各チューブに加えた。 各チューブの総量は0.5 mlで、振って、37°Cの水槽に30分間入れ、結果を観察しました。 完全溶血補体と溶血素の最高希釈は、それぞれの単位です。 実際の用途では、溶血素は2U(3200÷2 = 1600)で使用され、補体は2.5U(80÷2.5 = 32)で使用されます。 (2)正式なテスト: 1 Vタイプのマイクロプレートで操作し、各検体のテストウェルを作成します。 血清コントロールも。 BBS0.025mlを各ウェルに加えました。 2希釈スティック付きの血清(0.025 ml)を最初のウェルに浸し、回転させて合計8つのウェルで2番目のウェルに移し、1:2から1:256の希釈液を得ます。 抗体を少量測定するための補体結合アッセイの例が記載されています。 さまざまな試薬を徐々に追加し、インキュベーション後にさまざまなコントロールチューブを観察し、予想される結果と一致する必要があります。 ネガティブおよびポジティブコントロールチューブは明確に溶血および非溶血する必要があります。抗体または抗原コントロールチューブ、テスト対象の血清コントロールチューブ、およびポジティブコントロールとネガティブコントロールのコントロールチューブは完全に溶血する必要があります。 ヒツジ赤血球コントロールチューブでは、自然溶血は起こらないはずです。 補体コントロールチューブは、完全溶解で2U、少量の赤血球を含む完全溶解で1Uを示し、0.5Uは不溶性である必要があります。 たとえば、0.5U補体コントロールの完全な溶解は、補体の量が過剰であることを示します.2Uコントロールチューブが溶血を示さない場合、補体の量が不十分であることを示しているため、結果に影響があり、テストを繰り返す必要があります。 補体固定試験の結果は、試験血清が溶血せず、溶血が陰性であることを示した。 群衆に適していない 検査の適応がない場合は、このチェックを行うべきではありません。 副作用とリスク 通常、合併症や害はありません。
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