antígeno de la hepatitis D
Los antígenos del virus de la hepatitis D están presentes en las células infectadas y en la periferia. En la etapa temprana de la infección aguda del virus de la hepatitis D, el antígeno del virus de la hepatitis D se puede detectar en la sangre durante el período positivo del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B durante 1 a 2 semanas; la infección crónica se puede mantener a un nivel bajo de título. Información básica Clasificación de especialistas: inspección y clasificación de enfermedades infecciosas: inspección de microorganismos patógenos Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican el ayuno: ayuno Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Valor normal: No Por encima de lo normal: Negativo: La sugerencia negativa no estaba infectada con el virus de la hepatitis D. Positivo: Las indicaciones positivas están infectadas con el virus de la hepatitis D. Consejos: necesita un estómago vacío antes de extraer sangre. Valor normal (1) El método visual marrón o amarillo es HDAg positivo e incoloro es negativo. (2) Método colorimétrico utilizando un lector de microplacas para medir el valor de absorción de luz (A) a una longitud de onda de 492 nm, y calcular el valor S / N o el valor umbral basado en el valor A de la muestra y el valor promedio del control negativo A. Donde el valor S / N de la muestra es ≥ 2.1 o mayor El umbral es positivo y viceversa. Umbral = control negativo A492 media x 2.1. Importancia clínica El antígeno del virus de la hepatitis D está presente en las células del tejido hepático infectado y en el virus intacto de la sangre periférica.El HDAG positivo en la sangre periférica del paciente indica que existe una replicación del virus de la hepatitis D en el cuerpo y del virus de la hepatitis D en la sangre. Precauciones (1) Debido a que las infecciones de hepatitis D y hepatitis B existen al mismo tiempo, después de que la sangre periférica se trata con detergente, pueden existir HBAg y HBcAg al mismo tiempo, por lo tanto, se debe prestar atención para evitar la interferencia de HBcAg. Por lo tanto, se deben agregar sustancias no etiquetadas a la etiqueta de la enzima. Se excluyen los anticuerpos monoclonales que neutralizan específicamente HBcAg. (2) Debido a que la cantidad de antígeno en la sangre periférica es pequeña, el suero no debe diluirse al menos 30 ~ 50 μl. (3) Es mejor utilizar el método colorimétrico para evitar falsos positivos o falsos negativos. (4) Repita la prueba para muestras sospechosas. Proceso de inspección 1, el principio de determinación del antígeno de hepatitis D El antígeno del virus de la hepatitis D está encapsulado por el antígeno indicador de hepatitis B (HBsAg) y se libera después de ser lisado con un detergente (Tween20 o NP40). El principio inmunológico de unión específica antígeno-anticuerpo se aplica a la enzima sandwich de doble anticuerpo. Detección por ensayo inmunosorbente. 2, reactivos (1) Se usó el anticuerpo anti-HDV IgG purificado para el recubrimiento. (2) Anticuerpo HRP-anti-HDV. (3) Anticuerpo monoclonal anti-HBc con actividad neutralizante: título ELISA 1: 100, para dilución de HRP-anti-HD. (4) 10% Tween20. (5) Otros equipos y soluciones son los mismos que los anteriores. 3, el método de operación (1) La placa de poliestireno recubierta con IgG anti-HDV se diluyó con una solución de recubrimiento, y se colocaron 100 μl por pocillo a 37 ° C durante 1 ha 4 ° C durante la noche. (2) Después de lavar 3 veces, agregue 50 μl de suero y suero de control negativo (pocillos de suero de control negativo, suero de control positivo 2 pocillos) y Tween 2050 al 10% a cada pocillo, mezcle bien y deje reposar a temperatura ambiente durante la noche para lisar. El virus de la hepatitis B HBsAg encapsulado en la superficie libera el antígeno de la hepatitis D. (3) Después de lavar 3 veces, agregue 50 μl de anticuerpo HRP-anti-HDV a cada pocillo (10 unidades ELISA de anticuerpo monoclonal anti-HBc además de suero de ternera al 10%) y colóquelo a 45 ° C durante 1 h (o 37 ° C) 2h). (4) Después de lavar 3 veces, agregue 50 μl de solución de sustrato recién preparada a cada pocillo, y deje que la reacción se desarrolle en la oscuridad a temperatura ambiente durante 15 a 30 minutos, luego agregue 25 μl de 2 mol / L H 2 SO 4 por pocillo para terminar la reacción. No apto para la multitud. Aquellos que no tienen una indicación para el examen no deben hacer esta verificación. Reacciones adversas y riesgos En general no hay complicaciones y daños.
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