Vruchtwatercel chromatine onderzoek

Vruchtwaterpunctie kan het geslacht van de foetus bepalen en indirect de seksueel overdraagbare aandoeningen diagnosticeren, zoals aangeboren afwijkingen, aangeboren metabole defecten, chromosomale afwijkingen en seksueel overdraagbare aandoeningen, waardoor de geboorte van kinderen met dergelijke genetische ziekten wordt voorkomen. . Vruchtwaterpunctie wordt meestal uitgevoerd in het tweede trimester (16-21 weken zwangerschap). De urine moet vóór de operatie worden afgetapt, met beide handen op de heupen en draai de taille en buik voorzichtig. Gebruik dan ruglig, gebruik B-echografie om de positionering te detecteren, het punctiepunt te selecteren en de punctie onder strikte aseptische werkomstandigheden. Basis informatie Specialistencategorie: Maternaal onderzoek Controleer categorie: Genetisch onderzoek (DNA) Toepasselijk geslacht: of vrouwen nuchter zijn: vasten Analyse resultaten: Hieronder normaal: Normale waarde: geen Boven normaal: negatief: Normale waarde is negatief: X-chromatine:> 0,06 voor vrouwelijke foetus en 0,05 voor mannelijke foetus, positief: De waarschijnlijkheid van X-gebonden recessieve recessieve ziekte wordt bepaald op basis van de resultaten. Tips: Vruchtwaterpunctie wordt meestal uitgevoerd in het tweede trimester (16-21 weken zwangerschap). Normale waarde X-chromatine> 0,06 voor vrouwelijke foetussen, <0,05 voor mannelijke foetussen. Y-chromatine> 0,05 is een mannelijke foetus en <0,04 is een vrouwelijke foetus. Klinische betekenis Voor families met een familiegeschiedenis van X-gebonden recessieve erfelijke ziekten, is het ouderfenotype normaal. Als de moeder drager is van het ziekteverwekkende gen, is de waarschijnlijkheid van de zoon van het kind 50%; de dochter is fenotypisch normaal, wanneer de helft Kan een koerier zijn. Wanneer de vader een patiënt is, is de zoon helemaal normaal, en de dochter is alle dragers, zoals hemofilie A, hemofilie B, glucose-6-fosfaatdehydrogenase-deficiëntie, roodgroene blindheid, pseudohypertrofische spierdystrofie, Congenitale gamma-globulinedeficiëntie. Positieve resultaten kunnen ziekten zijn: kleurenblindheid, voorzorgsmaatregelen bij hemofilie Vruchtwaterpunctie wordt meestal uitgevoerd in het tweede trimester (16-21 weken zwangerschap). De urine moet vóór de operatie worden afgetapt, met beide handen op de heupen en draai de taille en buik voorzichtig. Gebruik dan ruglig, gebruik B-echografie om de positionering te detecteren, het punctiepunt te selecteren en de punctie onder strikte aseptische werkomstandigheden. In het algemeen wordt ongeveer 20 ml vruchtwater genomen en in een schone en gesteriliseerde centrifugebuis geplaatst voor onmiddellijke inspectie. Inspectie proces (1) Neem 15 tot 30 ml vruchtwater gedurende 16 tot 20 weken zwangerschap en centrifugeer gedurende 10 minuten bij 1000 r / ml. (2) Gooi de overtollige bovenstaande vloeistof weg, laat 1 ml vruchtwater en geprecipiteerde cellen en dispergeer voorzichtig in een celsuspensie. (3) Breng over in een vierkante kweekkolf van 25 ml, voeg 3 ml van een medium met een pH van 6,5 tot 6,8 (met penicilline 100 U / ml, streptomycine 100 g / ml) en 1 ml kalfsserum toe en incubeer in een incubator bij 37 ° C. (4) Een groot aantal fibroblastachtige of epithelioïde celkolonies werd waargenomen na 7-10 dagen kweken. Het verse medium kan nu worden vervangen. (5) Wanneer de celkolonies in stukken worden uitgebreid en er veel doorschijnende circulaire delende cellen zijn, kan colchicine worden toegevoegd om de uiteindelijke concentratie 0,1-0,3 g / ml te maken en vervolgens gedurende 5-6 uur in een incubator bij 37 ° C worden gekweekt. (De bovenstaande procedures worden allemaal uitgevoerd onder aseptische omstandigheden). Oogststandaarden: 1 met fibroblasten als hoofdtype, de groei van de cellen; 2 met 10x oculairs en 20x objectieve observatie, de groeiende celklonen bestrijken 1 of meer complete gezichtsvelden; 3 zie meer dan 10 doorschijnend Ronde cellen en meer dan 10 dubbele ronde helder delende cellen. (6) Als de cellen niet krachtig groeien, de groeicyclus niet uniform is of de cellen verouderen en de oogststandaard niet wordt bereikt, kan de subcultuur worden voortgezet in de originele fles. Methode: Onder steriele omstandigheden werd de kweekoplossing eerst gegoten en werden enkele druppels 2,5 g / L steriele trypsine-oplossing toegevoegd en het mengsel werd geschud en gegoten. Verder werden 5 tot 10 druppels trypsine toegevoegd en voorzichtig gedurende ongeveer 5 minuten bij 37 ° C geschud om de hechtende cellen eraf te laten vallen. 4 ml vers medium met kalfsserum werd toegevoegd en de cultuur liet men 4 tot 5 uur bij 37 ° C staan. Verander het kweekmedium voorzichtig en zet de kweek voort, het kan 3 tot 5 dagen na de passage worden geoogst. (7) Breng de kweekoplossing over in een gegradueerde centrifugebuis, voeg 1 ml ED-TA-trypsine-oplossing toe aan de kolf, plaats deze gedurende 5 minuten in een incubator bij 37 ° C en spoel vervolgens de hechtende cellen met een elleboogpipet (2,5 g / kan ook worden gebruikt) L digestie met trypsine-oplossing). De cellen losgemaakt van de fleswand werden in een centrifugebuis gegoten, gemengd met de oorspronkelijke kweekvloeistoffase, en de kweekkolf werd gewassen met een kleine hoeveelheid warme fysiologische zoutoplossing, en de gewassen cellen werden ook in de centrifugebuis gegoten en 10 min gecentrifugeerd met 1000 r / min. (8) Zuig het supernatant op, voeg 3 tot 5 ml 0,075 mol / L KCl hypotone oplossing toe die voorverwarmd is op 37 ° C en stel deze gedurende 10 tot 15 minuten in op 37 ° C. (9) Pre-fixatie, fixatie en voorbereiding zijn hetzelfde als de bereidingsmethode van chromosoommonsters van perifere bloedcellen. Niet geschikt voor het publiek 1. Er waren tekenen van abortus tijdens de zwangerschap. 2. Wanneer de lichaamstemperatuur 37,5 ° C overschrijdt. 3. Vroege peeling van de placenta, buikinfectie en etterig. Bijwerkingen en risico's (1) Maternaal letsel: punctie naald steek wond bloedvaten veroorzaakt door abdominale wand hematoom baarmoeder subserosaal hematoom. Af en toe komt vruchtwater in de bloedcirculatie van de moeder vanuit het gaatje en veroorzaakt vruchtwaterembolie. De blaas werd niet geleegd vóór de punctie en de blaas was gewond. (2) Letsel van de foetus, placenta en navelstreng: de priknaald kan de foetus beschadigen en kan bloedingen veroorzaken, en de placenta en de navelstreng kunnen ook bloeden of hematoom veroorzaken. Daarom moet de bron van bloedingen worden geïdentificeerd bij het nemen van hemorragisch vruchtwater. Als u vermoedt dat u van een foetus bent, moet u blijven luisteren naar het foetale hart. (3) Lekkage van vruchtwater: postoperatief vruchtwater lekt uit het gaatje, veroorzaakt te weinig vruchtwater, beïnvloedt de ontwikkeling van de foetus en veroorzaakt zelfs een miskraam of vroeggeboorte. (4) abortus of vroeggeboorte: de incidentie van abortus of voortijdige bevalling is 0,1% -0,2%, treedt vaak op binnen een week na de operatie, zelfs na de punctie leidt voortijdige breuk van membranen tot voortijdige bevalling. (5) intra-uteriene infectie: er kan maternale koorts zijn na een operatie. Intra-uteriene infectie kan een abnormale ontwikkeling van de foetus of zelfs de dood van de foetus veroorzaken. Daarom moet een vruchtwaterpunctie strikt aseptisch zijn.

Het materiaal op deze site is bedoeld voor algemeen informatief gebruik en is niet bedoeld als medisch advies, waarschijnlijke diagnose of aanbevolen behandelingen.