血清リポタンパク質および血清リポタンパク質電気泳動
リポタンパク質電気泳動は、主に高リポタンパク質血症の分類に使用されます。また、冠動脈性心疾患の血中脂質の状態を理解し、臨床診断と治療をより適切にガイドするのにも役立ちます。 基本情報 専門家分類:心血管検査分類:生化学検査 該当する性別:男性と女性が断食を適用するかどうか:断食 分析結果: 通常以下: 低リポタンパク血症などに見られます。 通常値: 非常に低密度のリポタンパク質:0.06-0.3g / L 低密度リポタンパク質:0-7g / L 高密度リポタンパク質(男性):0.41-0.63g / L 高密度Zheng..42-0.68g / L 通常以上: 原発性高脂血症などに見られます。 マイナス: ポジティブ: ヒント:検査前の食事は軽く、アルコールは禁止されています。 午前中に空腹を確認してください。 正常値 酢酸セルロース膜電気泳動 オオアザミ粒子0g / L(0mg / dl); 非常に低密度のリポタンパク質0.06〜0.3g / L(6〜30mg / dl); 低密度リポタンパク質<7g / L(<700mg / dl); 高密度リポタンパク質: 男性0.52±0.11g / L(43±18mg / dl); 女性0.55±0.13g / L(47±2mg / dl)。 臨床的意義 1、増加:原発性高脂血症で見られます。 2、下:低リポタンパク血症で見られます。 高い結果は病気かもしれません: 高脂血症、高リポタンパク血症II型、冠状動脈性心臓病の考慮事項 1.サンプル:新鮮な未凍結血清からリポタンパク質を分離できます。 フィブリノーゲンバンドが表示されるため、血漿はリポタンパク質電気泳動には適していません。 2.明確な分離成分を持つリポタンパク質プロファイルは、正確な解釈の前提条件です。 これらの条件が十分に満たされている場合、リポタンパク質電気泳動と参照方法(超遠心)は非常に一貫しています。 各コンポーネントの精度は異なり、変動係数によって推定されます。変動係数は通常5%未満です。 3.時折、アルファリポタンパク質が消えたり、狭いアルファリポタンパク質バンドが現れたりします。 これは、遊離脂肪酸が含まれているためです。 アルファリポタンパク質に蓄積すると、これらの粒子は同じ電荷を持ちます。 αゾーンの密度が高くなると、結果は高くなります。 沈殿技術と比較して、定量的リポタンパク質電気泳動は高価です。 検査プロセス 静脈採血直後、テスト操作: 1.緩衝液を電気泳動タンクに追加し、両側のタンクの緩衝液を調整して、それらが同じ平面になるようにします。 2.酢酸セルロースフィルムの準備:酢酸セルロースフィルム(2 cm×8 cm)を取り、粗い表面の1.5 cm(マイナス側の片側)に鉛筆で水平線を引き、点線のマークを作成します。 正と負の電極に番号を付けて表示した後、フィルムをバルビツール酸-バルビタールナトリウム緩衝液に浸し、十分に飽和させた後(通常20分)、きれいなろ紙を挟んで過剰な緩衝液を除去しました。 3.セルロースアセテートフィルムの毛を電気泳動タンクホルダーに取り付け、まっすぐにします。 マイクロピペットで3〜5μlの非溶血性血清をピペットし、水平線に沿って水平線に沿って追加します。サンプルは、電気泳動パターンのタンパク質バンドの変形を避けるために、フィルムの端から一定の距離を保ってください。明るい側を上に向けて、電気泳動タンクブラケットに平らに貼り付け、2層のろ紙または4層のガーゼでフィルムの両端をバッファーに接続し、しばらく待ちます。 4、電源を入れ、セルロースアセテートフィルムの正と負の電極に注意を払い、間違って接続しないでください。 電圧90〜150V、電流0.4〜0.6mA / cm(異なる電気泳動に必要な電圧、電流は異なる場合があり、柔軟でなければなりません)、夏の電源45分、冬の電源オン時間はわずかに長く、約60分、電気泳動ゾーンの拡張は約25 〜35mmは可能です。 5、染色:電源が完了したら、フィルムを取り外して、Lichunhong S色素溶液またはアミノブラック10B染色溶液に直接浸漬し、5〜10分間(アルブミンゾーンで)染色し、残りをすすぎ溶液で洗い流します。背景が無色になるまで染色します。 6、定量的: 1比色法:すすいだフィルムを吸い取り、染色されたタンパク質領域を対応するチューブに切り、アルブミンチューブに0.6ml / L水酸化ナトリウム6mlを加え(吸光度に2を掛けて計算)、残り各チューブに3 mlを加え、数回振って、37°Cの水槽に20分間入れて、色が浸出します。 アミノブラック10B染色各チューブの吸光度を分光光度計を使用して620 nmで読み取り、各チューブの内容物を計算しました(ブランクチューブの同時コントロール)。 Lichunhong Sが染色されると、浸出液は0.1 mol / L水酸化ナトリウムで処理され、その量は上記と同じでした。 10分後、アルブミンチューブに0.6mlの400ml / L酢酸を加え(吸光度に2を掛けます)、0.3mlを他のチューブに加えて水酸化ナトリウムの一部を中和し、色を濃くします。必要に応じて、遠心分離して上清を取ります。各チューブの吸光度を520 nmで分光光度計(同時ブランクコントロール)で読み取り、それぞれの内容を計算しました。 2濃度計のスキャン方法:A.きれいで傷のないガラススライド(泡を作らないでください)、スライドをしばらく立てて、余分な透明な液体を取り除き、90-100°Cの一定温度のオーブンに入れ、10-15分間焼いて、取り外して室温まで冷却します。この方法で透明なタンパク質領域は明確で、フィルムは平らで、直接スキャンして永久に保存できます(水素ナフタレンまたは流動パラフィンで透明です。すすいだフィルムは乾燥して透明である必要があり、透明フィルムは保管できません。長く、しわになりやすい)。 2スキャン定量化:透明フィルムは、スキャン分析のために全自動濃度計または他の濃度計暗箱に入れられます。 群衆に適していない 不適切な人:一般的に、適切でない人はいません。 副作用とリスク 1、局所皮下出血:採血後、特に出血傾向のある人は、血液凝固がないために皮下にじみ出たり、あざができたりしないように、十分な時間圧迫する必要があります。 2、感染:局所感染を引き起こさないように、静脈採血中の無菌操作への注意。
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