Télomérase
La télomérase est une transcriptase inverse spéciale composée d'ARN et de protéines impliquées dans la synthèse de télomères (une séquence et une structure nucléotidiques spécifiques) aux extrémités de l'ADN de cellules eucaryotes. La longueur des télomères des cellules somatiques normales est progressivement réduite à mesure que celle-ci se divise et l'activité de la télomérase est accrue. La longueur du télomère peut être maintenue sans raccourcissement, de sorte que les cellules puissent proliférer et devenir cancéreuses. Par conséquent, la détection de la télomérase et ses inhibiteurs peuvent être utilisés pour le diagnostic et le traitement de la tumeur. Informations de base Classification de spécialiste: Classification d'examen d'oncologie: examen immunitaire Sexe applicable: si les hommes et les femmes appliquent le jeûne: pas le jeûne Résultats d'analyse: En dessous de la normale: Valeur normale: Non Au-dessus de la normale: Négatif: Normalement négatif. Positif: Le cancer du poumon à petites cellules a augmenté l'activité de la télomérase au stade précoce, et le cancer du poumon non à petites cellules a plus de changements d'activité qu'au stade moyen. Conseils: Gardez un état d'esprit normal. Valeur normale Négatif. Signification clinique Il convient au diagnostic et au diagnostic différentiel de diverses maladies tumorales. Élévation: cancer du foie (93,88 OD / 30 μg de protéine), cancer du tissu environnant (24,09 OD / 30 μg de protéine). Le cancer du poumon à petites cellules a augmenté l'activité de la télomérase au stade précoce, et le cancer du poumon non à petites cellules a plus de changements d'activité qu'au stade moyen. Les maladies peuvent être des résultats positifs: précautions contre le cancer du pancréas et le cancer de la thyroïde 1. Faites attention à éviter la contamination en laboratoire et les faux positifs ou faux négatifs. 2. Faites attention à éliminer l'inhibiteur de la polymérase contenu dans l'échantillon de tissu afin de réduire les faux négatifs. 3. La technologie d'analyse par scintillation, la méthode ELISA et la méthode d'hybridation in situ sont plus fiables que la méthode TRAP. Processus d'inspection Immédiatement après la collecte des échantillons de sang, ils sont envoyés pour examen et immunoanalyse tumorale. Opération de détection: L'ADN génomique était de 0,1 µg, un tampon contenant 50 mmol / L de chlorure de potassium, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8,4), 1,5 mmol / L de chlorure de magnésium, 100 µg de gélatine, chaque amorce était de 0,25 µmol / L; dATP, dCTP, dGTP Le dTIP était de 200 µmol / L chacun, l'ADN polymérase de 2,5 U et le volume final de 100 µl. Ajoutez quelques gouttes de paraffine liquide pour éviter l’évaporation. Cycle de réaction: 1 dénaturation: 90 ° C pendant 30 à 60 s, température d’annelage de 2 amorces et matrice: 40 à 60 ° C 30 à 60 s, extension 3: 72 ° C à 1-2 min. Après des cycles répétés de 30 à 40 fois, la dernière extension de l’amorce à 7 ° 72 ° C a été interrompue pendant 7 minutes. Après élimination de la paraffine liquide, le produit est disponible pour analyse. Après électrophorèse sur gel d'agarose, il a été coloré au bromure d'éthidium et une bande fluorescente de longueur d'amplification attendue a été observée par irradiation avec une lampe UV. Le produit peut également être hybridé à un transfert de Southern ou à un transfert de tache avec une sonde oligonucléotidique radiomarquée ou non. Il est plus pratique d’utiliser l’instrument automatique de PCR Après avoir ajouté le réactif de réaction, la matrice ADN et la Taq-ADN polymérase dans l’éprouvette, il est mis dans la procédure ajustée, c’est-à-dire la température, le temps et l’extension de la température, du temps et du nombre de cycles correspondants. La réaction est effectuée dans un instrument automatique pour obtenir un produit d'amplification satisfaisant. Ne convient pas à la foule Ceux qui n'ont pas d'indication pour l'examen ne doivent pas être testés. Effets indésirables et risques 1. Infection: veillez à ce que l'opération de prélèvement sanguin soit aseptique, évitez la contamination de l'eau et des autres pièces sur le site de collecte de sang afin d'éviter une infection locale. 2, saignements: après que le sang ait reçu un temps de compression complet, en particulier une coagulopathie, une tendance au saignement, afin d’éviter un suintement sous-cutané local, des ecchymoses et un gonflement.
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