B-lymfocytytmarkörer

Humoral immunfunktionstestning är en typ av test där laboratoriet utvärderar individuell humoral immunfunktion. Detekteringen av humoral immunfunktion är baserad på de grundläggande processerna för humoral immunitet, inklusive B-lymfocytdetektion, Ig-detektion och detektion av antikroppsproduktionsfunktioner. Grundläggande information Specialistklassificering: klassificering av tillväxt och utvecklingskontroll: immunologisk undersökning Tillämpligt kön: om män och kvinnor tillämpar fasta: inte fasta Tips: Om provet inte kan observeras dagen kommer cellerna att hängas i den fluorescerande antikroppskonserveringslösningen, lagras vid 4 ° C och räknas nästa dag. Normalt värde Medelmåttet IgM var 11,2 ± 6,0%; medelgen IgG var 7,5 ± 3,3%. Klinisk betydelse Minskningen i antalet B-celler är relaterad till den humorala immunbristen, och ökningen i antalet B-celler är relaterad till den maligna spridningen av B-celler. försiktighetsåtgärder (1) Närvaron av agglomererat IgG i det fluorescerande antikroppsreagenset och det agglomererade IgG kan vara falsk-positivt bundet till Fc-receptorn på ytan av B-cellen. För att undvika agglomerering av IgG är det därför nödvändigt att uppmärksamma: 1 Fluorescerande antikroppar med ett alltför stort F / P-molförhållande kan inte användas, och vanligtvis är 1 till 3 föredragna. 2 Fluorescerande antikroppar som innehåller proteiner med låg koncentration är instabila vid låg temperatur och bör inte vara lägre än 2 mg / ml. 3 Fluorescerande antikroppar lagrade vid låg temperatur bör inte frysa upptinas upprepade gånger och centrifugeras under 30 minuter vid 150 000 r / min före användning för att ta bort aggregat. (2) När levande lymfocyter används för immunfluorescensfärgning tillsätts NaN3 till alla reagens (märkt antikropp, Hank-lösning, etc.) för att begränsa cellmembranets fluiditet. Annars kommer cap-liknande fluorescens och fagocytos att inträffa, och det faktiska antalet fluorescerande celler kommer att minska. (3) När färgad med en anti-IgG fluorescerande antikropp binder immunkomplexet antigen-antikropp (IgG) som finns i provet till Fc-receptorn på ytan av B-cellen och är fluorescerande positivt. Av detta skäl har det föreslagits att färgas med fluorescerande märkt anti-F (ab) 2-antikropp för att utesluta Fc-receptorer från att färgas. På senare år, på grund av tillkomsten av monoklonala antikroppar mot B-cellyttspecifika molekyler (CD19, CD20, etc.), har det tenderat att använda fluoresceinmärkta monoklonala antikroppar mot CD19 eller CD20 för att direkt reagera med perifera blodlymfocyter; De monoklonala antikropparna (primära antikroppar) av CD19 och CD20 reageras först med lymfocyter, kombineras sedan med fluorescein-märkt kanin eller get-anti-mus-IgG (andra antikropp), räknas med fluorescensmikroskopi eller flödescytometri för att räkna perifert blod. B-lymfocyter. Inspektionsprocess (1) Ta heparin-antikoagulant 2 ml, tillsätt en lika stor mängd Hank-vätska och blanda väl. Upprepa skiktet på den stratifierade lösningen, 2000r / min, centrifugera i 20 min. Lymfocytskiktet togs ut, Hank-lösningen tillsattes, tvättades 3 gånger, 1200 r / min, centrifugerades under 10 minuter, lymfocytkoncentrationen justerades till 1 x 107 / ml och 0,1 ml fördelades i två rör. (2) Tvätta lymfocyt-suspensionen ännu en gång med Hanks lösning, kast bort supernatanten och använd filterpapperet för att ta bort den återstående vätskan från rörets innervägg, och tillsätt 2 droppar kanin anti-human IgG och anti-human IgM fluorescerande antikropp (cirka 0,08 ml). Efter försiktigt skakning, placera 37 ° C inkubatorn i 30 minuter. (3) Ta ut från inkubatorn och tvätta två gånger med Hank-lösning, centrifugera vid 1000 r / min under 10 min, absorbera försiktigt all supernatanten, tillsätt en droppe 50 ml PBS-buffrat glycerin till botten av röret, blanda och ta 1 droppe för att tillsätta Täck täckglaset på objektglaset och observera under ett fluorescensmikroskop. Inte lämplig för publiken Det finns inga tabuer. Biverkningar och risker Inga komplikationer eller faror.

Materialet på denna webbplats är avsett att vara allmänt informativt bruk och är inte avsett att utgöra medicinsk rådgivning, sannolik diagnos eller rekommenderade behandlingar.