fibrinopeptídeo A

O Fibrinopepide-A (FPA) é uma clivagem da cadeia peptídica entre o espermatozóide-16 e a glicina-17 da cadeia α do fibrinogênio (A) sob a ação da trombina, e é composto de 1 a 16 aminoácidos. Peptídeo de fibrina A. É um indicador confiável da atividade de coagulação no corpo e a formação final de trombos em fibrina. Níveis aumentados de FPA no plasma refletem a ativação do sistema de coagulação e a geração de trombina. Portanto, encontra-se em estado de hipercoagulabilidade e doença trombótica, identificação de fibrinólise primária e secundária e monitoramento de indicadores durante a terapia anticoagulante. Informação básica Classificação de especialista: classificação de exame de crescimento e desenvolvimento: exame de sangue Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: jejum Dicas: A coleta de sangue não deve ser> 45s, e os primeiros 2ml devem ser descartados.A seringa deve ser silicida ou seringa de plástico. Valor normal 1,2 ± 0,8 μg / l Significado clínico Níveis aumentados de FPA no plasma refletem a ativação do sistema de coagulação e a geração de trombina. Portanto, encontra-se em estado de hipercoagulabilidade e doença trombótica, identificação de fibrinólise primária e secundária e monitoramento de indicadores durante a terapia anticoagulante. Resultados elevados podem ser doenças: coagulação intravascular disseminada em crianças, gravidez com doença trombótica, coagulação intravascular disseminada em idosos (1) A coleta de sangue deve ser suave e não deve ser> 45s, e os primeiros 2ml devem ser descartados.A seringa deve ser silicida ou seringa de plástico. (2) Imediatamente após a coleta de sangue, injetar no tubo de ensaio contendo anticoagulante e misturá-lo rapidamente em água gelada.Se ele precisa ser preservado, é mais adequado a -20 ° C após o tratamento de adsorção com bentonita. Processo de inspeção (1) Colheita de amostras de plasma: 4.5 ml de sangue venoso foram retirados suavemente com uma seringa de plástico (os primeiros 2 ml foram descartados), e um tubo de ensaio contendo 0.5 ml de anticoagulante (heparina sódica 500u e aprotinina 5000u) foi adicionado e imediatamente misturado. Centrifugue a 3000 r / min por 20 min, separe o plasma e leve o plasma superior para outro tubo para tratamento imediato ou armazenamento a -20 ° C. (2) Tratamento de adsorção de bentonite em amostras de plasma: o objetivo é remover completamente o fibrinogênio. Adicionou-se 40 mg de bentonite a um tubo de centruga de polipropileno de 45 mL, adicionou-se 0,5 mL de tamp de adsoro e misturou-se cuidadosamente a mistura, adicionou-se 1 mL de plasma, agitou-se e misturou-se num misturador de ciclone e agitou-se lentamente durante 10 min. Centrifugar a 5000r / min por 15min, aspirar o sobrenadante para outro tubo, e então tratá-lo uma vez com a bentonita como descrito acima. Em seguida, 1 ml do sobrenadante foi aspirado e adicionado a um tubo de ensaio contendo 50 μl de uma solução 20 g / LTween 20, e misturado. O espécime final foi diluído 20 vezes. (3) Revestimento de FPA: Dissolveu-se 1 µg / ml de FPA em tampão de revestimento, adicionou-se placa de reação de poliestireno, 200 µl / poço, tapou-se e durante a noite a 37 ° C. O buraco foi descartado no dia seguinte. A placa foi lavada 5 vezes com solução de lavagem, 3 min de cada vez, seca e poupada. (4) padrão FPA: 6 tipos de diferentes concentrações, tais como 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 ng / ml. 0,9 ml foram separadamente aspirados para uma série de pequenos tubos de ensaio, e 0,1 ml de concentração de trabalho de FPA anti-humana de coelho foi adicionado a cada tubo. As amostras de plasma a serem testadas pelo tratamento de adsorção de bentonite foram operadas como acima, e as concentrações de 1: 2, 1: 4 vezes foram como acima. Cada um dos tubos anteriores reagiu a 37 ° C durante 3 horas. (5) 200 μl de cada um dos tubos mencionados acima, após a pipetagem da incubação em cada poço do FPA revestido, e a placa foi incubada a 37 ° C por 2 h, lavada por 5 vezes e seca. (6) Cada po� foi adicionado com IgG de cabra anti-coelho HRP (dilu�o para a concentra�o de trabalho por dilui�o padr�) 200 l / po� e a placa foi incubada a 37 � durante 2 h, lavada durante 5 vezes e seca. (7) Adicione 200 μl da solução de substrato recém-preparada a cada poço, e reaja com precisão a 37 ° C por 3 min no escuro, e imediatamente adicione 3 mol / L de H 2 SO 450 μl a cada poço para terminar a reação. O valor A (492 nm) de cada poço foi determinado no marcador enzimático. Não é adequado para a multidão Hemofilia e coagulação intravascular difusa. Reações adversas e riscos Risco de infecção: se você usar uma agulha suja, pode estar em risco de infecção.

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