Antígeno da hepatite A
O antígeno da hepatite A é uma substância que sempre induz a produção de anticorpos contra hepatite A no organismo. Hepatitis Avirus (HAV) é uma partícula esférica icosaédrica estéreo-simétrica com um diâmetro de 27-32 nm, não tem envelope e o núcleo é um RNA de filamento positivo de filamento único (single-stranded). O HAV é um hepatovírus ou heparnavírus da família dos picornavírus. O HAV é transmitido principalmente pela via mão-a-boca, com um período de incubação de 15 a 50 dias, com uma média de 28 dias. O vírus está freqüentemente presente no sangue e nas fezes do paciente 5 a 6 dias antes que o ALT do soro do paciente aumente. Após 2 a 3 semanas de início, a infecciosidade do soro e das fezes desaparece gradualmente com a produção de anticorpos específicos no soro. O teste laboratorial do HAV permite a detecção do antígeno. Informação básica Classificação do especialista: Exame e classificação das doenças infecciosas: exame da função hepática Sexo aplicável: se homens e mulheres aplicam jejum: jejum Resultados da análise: Abaixo do normal: Valor normal: Não Acima do normal: Negativo: Normal Positivo: Positivo indica infecção aguda por hepatite A. Dicas: Antes do exame, a dieta é leve, e a proibição do álcool é verificada na manhã do dia para garantir uma boa noite de sono. Valor normal Negativo Significado clínico Resultados anormais: O HAVAg está presente nas fezes 10 a 20 dias após a infecção e é geralmente excretado das fezes 1 a 15 dias antes do início da doença, o que é difícil de capturar clinicamente. A taxa positiva foi de 42,9% em 1 semana e 18,3% em 1 a 2 semanas, e desapareceu após meio mês. Portanto, raramente é usado clinicamente. Se o HAVAg for positivo, indica que o paciente está infectado com hepatite A, que está no início da fase aguda. Pessoas que precisam ser testadas: Febre, náusea, vômito, disfunção de um fígado, fadiga. Resultados positivos podem ser doenças: precauções contra hepatite A Antes da inspeção: Não coma nada casualmente, especialmente com álcool e gorduras. Quando verificar: relaxar e descontrair. Inadequado para pessoas: aqueles que não têm uma indicação para o exame não devem fazer essa verificação. Processo de inspeção 1, o princípio da determinação do antígeno da hepatite A O método ELISA sanduíche, isto é, o revestimento anti-HAV, adicionando soro a ser testado, adicionando anti-HAV marcado com enzima, adicionando cor de substrato e medindo o valor de DO por um leitor de microplaca. Se uma membrana de nitrocelulose (NC) é usada em vez de uma placa de poliestireno, o método NG-EIA, a detecção do antígeno pode ser aumentada, e 1 ng da proteína HAV pode ser detectada, o que equivale a 1,5 × 104 partículas virais. 2, reagentes Kits comercializados estão disponíveis na China, contendo placas de reação revestidas com anti-μ cadeia (tiras), solução de aplicação de HAV, marcadores anti-HAV-HRP e anti-HAVIgM negativo, soro de controle positivo, diluição da amostra, solução de lavagem Reagentes como líquido e solução de parada. 3, o método de operação O teste deve ser realizado de acordo com as instruções do kit. Existem dois tipos gerais de kits. (1) Método de três etapas: Existem muitas etapas de operação nesse método, e a detecção é demorada e há uma tendência a ser gradualmente substituída pelo método de duas etapas. 1 Adicione a amostra diluída: Adicione 100 μl de amostra de diluição 1: 1000 ao poço da placa de reação revestida (tira), cada experimento tem um yin e um controle positivo, incube a 37 ° C por 2 he lave a placa 3 vezes. 2 Adicione HAV: Adicione 100 μl de HAV a cada poço, transfira para 4 ° C durante a noite a 37 ° C por 1 h e lave a placa 3 vezes. 3 Anti-HAV-HRP: Cada poço foi adicionado com anti-HAV-HRP 100 μl, incubado a 37 ° C por 3 he lavado 4 vezes. 4 Desenvolvimento da cor: 100 μl da solução de substrato foram adicionados a cada poço e incubados a 37 ° C por 15 min. 5 Pare a reação: 50 μl da solução de parada foram adicionados a cada poço. 6 resultados foram interpretados. Método visual: incolor ou ligeiramente amarelado negativo, cor laranja é positiva. Método colorimétrico: No leitor de microplacas, o ponto zero do branco do reagente é usado para medir o valor da densidade óptica de cada furo a 492 nm Quando o valor A / negativo do controle A é maior ou igual a 4, é positivo e menor que 4 é negativo. (2) Operação em duas etapas: de acordo com o método acima, adicione a amostra diluída à preservação e lavagem do calor e adicione 50 μl de HAV e 50 μl de anti-HAV-HRP a cada poço, misture e aqueça a 37 ° C por 1 h, lave a placa 4 vezes e desenvolva a mesma cor e leia o mesmo método. O resultado Não é adequado para a multidão Aqueles que não têm uma indicação para o exame não devem fazer essa verificação. Reações adversas e riscos 1, hemorragia subcutânea: devido ao tempo de prensagem inferior a 5 minutos ou a tecnologia de coleta de sangue não é suficiente, etc, pode causar hemorragia subcutânea. 2. Risco de infecção: se utilizar uma agulha suja, pode estar em risco de infecção.
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