fibrynopeptyd A

Fibrynopepid-A (FPA) jest cięciem łańcucha peptydowego między plemnikiem-16 a glicyną-17 łańcucha fibrynogenu α (A) pod wpływem trombiny i składa się z 1 do 16 aminokwasów. Peptyd fibrynowy A. Jest wiarygodnym wskaźnikiem aktywności krzepnięcia w organizmie i ostatecznego tworzenia zakrzepu w fibrynie. Zwiększone poziomy FPA w osoczu odzwierciedlają aktywację układu krzepnięcia i wytwarzanie trombiny. Dlatego znajduje się w stanie nadkrzepliwości i chorobie zakrzepowej, identyfikacji pierwotnej i wtórnej fibrynolizy oraz wskaźnikach monitorowania podczas leczenia przeciwzakrzepowego. Podstawowe informacje Klasyfikacja specjalistyczna: klasyfikacja badań wzrostu i rozwoju: badanie krwi Obowiązująca płeć: czy mężczyźni i kobiety stosują post: post Wskazówki: Pobranie krwi nie powinno przekraczać> 45 s, a pierwsze 2 ml należy wyrzucić. Strzykawka powinna być silikonowana lub plastikowa. Wartość normalna 1,2 ± 0,8 μg / l Znaczenie kliniczne Zwiększone poziomy FPA w osoczu odzwierciedlają aktywację układu krzepnięcia i wytwarzanie trombiny. Dlatego znajduje się w stanie nadkrzepliwości i chorobie zakrzepowej, identyfikacji pierwotnej i wtórnej fibrynolizy oraz wskaźnikach monitorowania podczas leczenia przeciwzakrzepowego. Wysokimi wynikami mogą być choroby: rozsiana koagulacja wewnątrznaczyniowa u dzieci, ciąża z chorobą zakrzepową, rozsiana koagulacja wewnątrznaczyniowa u osób starszych (1) Pobieranie krwi powinno przebiegać gładko i nie powinno przekraczać> 45 s, a pierwsze 2 ml należy wyrzucić. Strzykawka powinna być silikonowana lub plastikowa. (2) Natychmiast po pobraniu krwi wstrzyknąć do probówki zawierającej antykoagulant i szybko wymieszać w wodzie z lodem. Jeśli trzeba ją zakonserwować, bardziej nadaje się w temperaturze -20 ° C po obróbce adsorpcyjnej bentonitem. Proces kontroli (1) Pobieranie próbek osocza: 4,5 ml krwi żylnej płynnie pobrano za pomocą plastikowej strzykawki (pierwsze 2 ml odrzucono) i dodano probówkę zawierającą 0,5 ml antykoagulantu (heparyna sodowa 500u i aprotynina 5000u) i natychmiast zmieszano. Wirować przy 3000 r / min przez 20 min, oddzielić osocze i przeciągnąć górne osocze do innej probówki w celu natychmiastowego leczenia lub przechowywania w temperaturze -20 ° C. (2) Adsorpcja bentonitu w próbkach osocza: celem jest całkowite usunięcie fibrynogenu. 40 mg bentonitu dodano do 45 ml polipropylenowej probówki wirówkowej z tworzywa sztucznego, dodano 0,5 ml buforu adsorpcyjnego i mieszaninę dokładnie wymieszano, dodano 1 ml osocza, wytrząsano i mieszano w mieszalniku cyklonowym i wytrząsano powoli przez 10 minut. Wiruj z prędkością 5000r / min przez 15 minut, odessaj supernatant do innej probówki, a następnie potraktuj go bentonitem jak opisano powyżej. Następnie 1 ml supernatantu odessano i dodano do probówki zawierającej 50 μl roztworu 20 g / LTween 20 i zmieszano. Ostateczna próbka została rozcieńczona 20 razy. (3) Powłoka FPA: 1 μg / ml FPA rozpuszczono w buforze do powlekania, dodano polistyrenową płytkę reakcyjną, 200 μl / studzienkę, zamknięto i przez noc w 37 ° C. Dziurę odrzucono następnego dnia. Płytkę przemyto 5 razy roztworem do płukania, każdorazowo 3 minuty, wysuszono i oszczędzono. (4) Standard FPA: 6 rodzajów różnych stężeń, takich jak 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78 ng / ml. 0,9 ml oddzielnie odessano do serii małych probówek, a do każdej probówki dodano 0,1 ml roboczego stężenia króliczej antyludzkiej FPA. Próbki osocza badane metodą adsorpcji bentonitu działały jak wyżej, a stężenia 1: 2, 1: 4 razy były jak wyżej. Każdą z powyższych probówek poddawano reakcji w 37 ° C przez 3 godziny. (5) 200 μl każdej z wyżej wymienionych probówek po inkubacji przeniesiono pipetą do każdej studzienki powleczonego FPA, i płytkę inkubowano w 37 ° C przez 2 godziny, przemyto 5 razy i wysuszono. (6) Do każdej studzienki dodano HRP-kozią anty-króliczą IgG (rozcieńczoną do stężenia roboczego przez standardowe rozcieńczenie) 200 μl / studzienkę, i płytkę inkubowano w 37 ° C przez 2 godziny, przemyto 5 razy i wysuszono. (7) Dodaj 200 μl świeżo przygotowanego roztworu substratu do każdej studzienki i dokładnie reaguj w 37 ° C przez 3 min w ciemności, i natychmiast dodaj 3 mol / l H2SO450 μl do każdej studzienki, aby zakończyć reakcję. Wartość A (492 nm) dla każdego dołka określono na etykiecie enzymu. Nie nadaje się dla tłumu Hemofilia i rozproszona koagulacja wewnątrznaczyniowa. Działania niepożądane i ryzyko Ryzyko zakażenia: W przypadku użycia nieczystej igły może istnieć ryzyko zakażenia.

Materiały na tej stronie mają na celu ogólne wykorzystanie informacyjne i nie stanowią porady medycznej, prawdopodobnej diagnozy ani zalecanych metod leczenia.