PHA-lymfocyttransformatietest

De PHA-lymfocyttransformatie-test is een morfologische en biochemische verandering waarbij T-lymfocyten en mitogenen in vitro gelijktijdig worden gekweekt en sommige kleine lymfocyten worden omgezet in onrijpe moedercellen en worden onderworpen aan mitose. methode. Basis informatie Specialistenclassificatie: Oncologie-onderzoeksclassificatie: immuunonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: niet vasten Tips: Besteed aandacht aan een gezond dieet en behoud een goed humeur. Normale waarde Tellen van lymfocyten 200, identificeren van lymfoblasten (meer dan 2 tot 4 keer meer dan normale lymfocyten, helder nucleair membraan, losse nucleaire plaque, fijne kern, duidelijke nucleoli, overvloedige cytoplasma, basofiel), overgangs Lymfocyten (minder volumeverandering, alleen de bovengenoemde voor de hand liggende nucleaire veranderingen), kleine lymfocyten (iets groter dan rode bloedcellen, dichte nucleaire chromatine, geen nucleoli), de omzettingssnelheid werd geteld. Het normale dermatologische succespercentage is hoger dan 58%. Klinische betekenis De afname in PHA-lymfocytentransformatiesnelheid is een reactie op een afname van cellulaire immuunfunctie. Dit onderzoek, dermatologie wordt meestal gebruikt voor ziekteclassificatie (zoals lepra), ziektebeoordeling (zoals kwaadaardige huidtumoren), observatie van de werkzaamheid van geneesmiddelen en enkele onderzoeken naar immunodeficiëntie en allergische huidziekten. Abnormaal resultaat Verschillende symptomen veroorzaakt door verminderde immuunfunctie. De persoon die onderzoek nodig heeft, wordt ervan verdacht symptomen van melaatsheid of huidmaligniteit te hebben. voorzorgsmaatregelen 1. De samenstelling van het medium heeft een grote invloed op de omrekeningskoers, let op de effectieve periode. 2. Kalfserum moet vóór gebruik worden geïnactiveerd. 3. Zorg bij het kweken voor voldoende gas, in het algemeen mag de totale hoeveelheid vloeistof in de kweekfles van 10 ml niet groter zijn dan 2 ml. 4. Overmatige PHA-dosis is giftig voor cellen, te klein om lymfocytentransformatie te stimuleren De dosis PHA-omzettingsreactie moet vóór de test worden bepaald. 5. Strenge aseptische operaties moeten worden uitgevoerd in het experiment om vervuiling te voorkomen. Taboe vóór de test: let op een gezond voedingspatroon en behoud een goed humeur. Vereisten voor inspectie: actief samenwerken met de arts. Inspectie proces Operatie methode: 1. Neem aseptische heparine-anticoagulans 0.lml, voeg 1,8 ml celkweekmedium toe, voeg 1000g / m1 PHA0,1m1 toe, controlebuis zonder PHA, kweek de cellen bij 37 ° C, 5% CO2 voor 3d, schud 1 per dag tijden. 2. Aan het einde van de kweek werd het grootste deel van het supernatant weggegooid en 8,5 g / L NH4Cl 4 ml werd toegevoegd en gemengd en gedurende 10 minuten in een waterbad van 37 ° C geplaatst. Centrifugeer gedurende 10 minuten bij 3.2500 r / min, gooi de bovenstaande vloeistof weg, voeg 5 ml fixeermiddel toe aan de pellet en laat deze 5 minuten bij kamertemperatuur staan. Centrifugeer 10,2500 r / min gedurende 10 minuten, gooi de bovenstaande vloeistof weg, laat 0,2 ml pelletcellen achter voor tabletteren en blaas snel droog. 5. Giemsa-verfoplossing wordt 10-20 min gekleurd, gewassen met water en gedroogd. 6. Oil Mirror Telt het aantal cellen getransformeerd in 200 lymfocyten en berekent de omzettingssnelheid. Het resultaat wordt beoordeeld: 1. Morfologische criteria van lymfoblasten: de grootte van de kern, de verhouding van kern tot cytoplasma, de kleuring van het cytoplasma en de structuur van de kern en de aanwezigheid of afwezigheid van nucleoli. (1) Rijpe kleine lymfocyten: de grootte van de niet-gekweekte kleine lymfocyten is 6-8 m, de nucleaire kleuring is dicht, geen nucleoli, de verhouding van nucleair tot cytoplasma is groot en het cytoplasma is gekleurd tot mild basofiel. (2) Overgangslymfocyten: groter dan kleine lymfocyten, ongeveer 10 ~ 20m, nucleaire kleuring is dicht, maar nucleoli verschijnen, wat het belangrijkste punt is voor de identificatie van volwassen kleine lymfocyten. (3) lymfoblasten: het celvolume neemt toe, ongeveer 20 ~ 30m, de vorm is niet netjes, vaak klein uitsteeksel, nucleaire vergroting, losse nucleaire kleuring, er zijn 1 of 2 nucleoli, verwijding van het cytoplasma, vaak cytoplasma Lege zeepbel. (4) Andere cellen: bijvoorbeeld na 72 uur neutrofielkweek is het grootste deel van het verval of de dood fragmentatie. 2. Berekening van lymfocytentransformatiesnelheid De kop, het lichaam en de staart werden onderzocht in de bovenstaande classificatie en 200 lymfocyten werden geteld om het percentage te berekenen. Getransformeerde lymfocyten omvatten lymfoblasten en overgangslymfocyten, en niet-getransformeerde lymfocyten verwijzen naar volwassen kleine lymfocyten. Onder normale omstandigheden is de door PHA geïnduceerde lymfocyttransformatie snelheid 60 tot 80%, en als deze 50 tot 60% is, is deze laag en wanneer deze 50% of minder is, wordt deze verlaagd. Volgens de resultaten wordt het juiste oordeel verkregen. Niet geschikt voor het publiek Ongepaste menigte: tijdelijk onbekend. Bijwerkingen en risico's Er zijn geen gerelateerde complicaties en gevaren.

Het materiaal op deze site is bedoeld voor algemeen informatief gebruik en is niet bedoeld als medisch advies, waarschijnlijke diagnose of aanbevolen behandelingen.