Secretoire IgE in sputum

De site van SIgE is vergelijkbaar met die van SIgA en wordt ook geproduceerd door plasmacellen in de lamina propria van de luchtwegen.Het wordt verdeeld in slijmvliesweefsels en exocriene vloeistoffen.Deze sites zijn de site van invasie van allergenen en de site van allergische reacties. IgE is een monomeer, 8S, 19 × 104 ku en zijn zware keten is langer dan de -keten. Nog een functioneel gebied (CH4), dat kan binden aan cellen (zoals mestcellen, basofielen) en de afgifte van intracellulaire bioactieve stoffen onder bepaalde omstandigheden kan veroorzaken. Daarom is IgE het belangrijkste antilichaam dat type I allergie veroorzaakt. . Basis informatie Specialistenclassificatie: Classificatie van ademhalingsonderzoek: sputumonderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Herinnering: als de belangrijkste reagenscomponenten niet goed zijn voorbereid of onjuist zijn opgeslagen, worden ze gemakkelijk afgebroken en gedeactiveerd. Normale waarde 0,1 tot 9 mg / l. Klinische betekenis Toename: IgE is monomeer, 8S, 19 × 104ku en zijn zware keten is langer dan de y-keten. Nog een functioneel gebied (CH4), dat kan binden aan cellen (zoals mestcellen, basofielen) en de afgifte van intracellulaire bioactieve stoffen onder bepaalde omstandigheden kan veroorzaken. Daarom is IgE het belangrijkste antilichaam dat type I allergie veroorzaakt. . Bij patiënten met bronchiale astma en overgevoeligheidspneumonitis kan het SIgE-gehalte in het sputum worden verhoogd. Hoge resultaten kunnen ziekten zijn: bronchiale astma, allergische longontsteking De belangrijkste reagenscomponenten in de ELISA, zoals antigenen, antilichamen, enzymconjugaten, substraten, enz., Worden gemakkelijk afgebroken en geïnactiveerd als ze niet goed worden voorbereid of onjuist worden opgeslagen. Er zijn veel stappen in de ELISA en als de bewerking niet gestandaardiseerd is, is het moeilijk om nauwkeurige resultaten te verkrijgen. Daarom moet de kwaliteitscontrole voor elke test worden uitgevoerd om de effectiviteit van de test te waarborgen. De positieve en negatieve controles in de uitstekende kits kunnen in het algemeen worden gebruikt als kwaliteitscontrole van de test.Volgens de instructies kan de effectiviteit van de test worden beoordeeld aan de hand van de verkregen absorptiewaarden. Als voorbeeld neemt de meest gebruikte HBsAg-test in klinische tests de negatieve controle in de kit HBsAg-negatief humaan serum en de positieve controle moet het HBsAg-gehalte aangeven (bijvoorbeeld 9 ± 2 ng / ml). Drie negatieve controles en twee positieve controles moeten gelijktijdig worden uitgevoerd voor elke batch tests. De absorptiewaarde verkregen door de negatieve controle-assay moet kleiner zijn dan een bepaalde waarde (bijvoorbeeld 0,100), en de gemiddelde waarde van de positieve controle-absorptie minus de negatieve controle-absorptie moet groter zijn dan een bepaalde waarde (bijvoorbeeld 0,200). Deze waarden zijn specifieke experimentele waarden voor de kit onder de gespecificeerde testomstandigheden. Als de testresultaten aan de vereisten voldoen, geeft dit daarom zowel de effectiviteit van de gebruikte reagentia als de juistheid van de bewerking aan. Alleen in dit geval is de batchtest effectief. Sommige van de positieve en negatieve controles in de kit voldoen niet aan de vereisten voor kwaliteitscontrole, of de meetomstandigheden van het laboratorium zoals colorimeter, enz., En het verschil in de kitbeschrijving, de juiste kwaliteit moet worden gebruikt in overeenstemming met de werkelijke situatie. Controles en kwaliteitscontrolewaarden van het laboratorium afgeleid van het experiment. Het kwaliteitscontroleserum van de goederen is duur. Kwalitatieve bepaling van ELISA-kwaliteitscontroleproducten kan in het algemeen zelf worden opgesteld. De HBsAg-test wordt nog steeds als voorbeeld genomen. Negatieve controles kunnen worden afgenomen van bloeddonoren die HBsAg-negatief zijn met hoogwaardige reagentia. De positieve controle kan worden bereid door een geschikte hoeveelheid HBsAg-positief serum aan het negatieve controleserum toe te voegen en het gemengde serum te vergelijken met een referentiestandaard of een kwantitatieve controle om het HBsAg-gehalte te bepalen. Vervolgens wordt een geschikte verdunning uitgevoerd om het HBsAg-positieve serum met de gewenste concentratie te verkrijgen, en vervolgens wordt een geschikte hoeveelheid antibacteriële conserveermiddelen zoals gentamicine en salicylzuur toegevoegd en vervolgens bij lage temperatuur gecryoconserveerd. Inspectie proces ELISA is een testmethode met meerdere reacties, meerdere reagentia en meerdere stappen, die zorgvuldig en zorgvuldig moet worden uitgevoerd volgens de vereisten, anders worden geen nauwkeurige resultaten verkregen. De ELISA-procedures die worden gebruikt om verschillende items te detecteren, verschillen enigszins, maar omvatten stappen zoals laden, vasthouden, wassen en colorimetrie. De bedieningspunten van elke stap worden hieronder beschreven. 1. Bereiding van reagentia: Verdun of bereid de voor de test vereiste reagentia volgens de instructies in de set. Gedistilleerd of gedeïoniseerd water dat in ELISA wordt gebruikt, ook voor het wassen, moet vers en van hoge kwaliteit zijn. De onafhankelijke buffer moet worden gemeten met een pH-meter. De temperatuur van het testreagens uit de koelkast moet worden gebruikt nadat de kamertemperatuur is bereikt. In tests met HRP als marker zijn containers die met metaal zijn verontreinigd niet beschikbaar. 2. Laden: Maak indien nodig een goede ELISA-plaat. Serummonsters (onthuidingsvloeistof) moeten vers worden verzameld of op de juiste manier in de koelkast worden bewaard. Er mogen geen sterk gehemolyseerde of troebele monsters worden gebruikt. Specimens die natriumazide als conserveermiddel bevatten, zijn niet beschikbaar voor eenstaps ELISA voor HRP-labeling. Wanneer u het monster toevoegt, voegt u het monster aan de onderkant van het gat toe, vermijd het om het bovenste deel van de gatwand toe te voegen en pas op dat u het niet spettert, er verschijnen geen luchtbellen. De nauwkeurigheid van de hoeveelheid toegevoegd monster bij de kwantitatieve bepaling moet voldoen aan de kwantitatieve vereisten. In de kwalitatieve meting wordt de nauwkeurigheid van de hoeveelheid monster soms niet benadrukt, het wordt bijvoorbeeld voorgeschreven als een druppel. Op dit punt moet u dezelfde druppelaar gebruiken en de juiste laadpositie handhaven, zodat het volume van elke druppel in principe hetzelfde is. De werking en vereisten voor de toevoeging van het enzymconjugaat en de toevoeging van het substraat zijn dezelfde als voor de toevoeging van het monster. 3. Isolatie: Er zijn in het algemeen twee antigeen-antilichaamreacties in de ELISA, dat wil zeggen na de toevoeging van het monster en na de toevoeging van de combinatie. Op dit moment moeten de temperatuur en reactietijd zo nauwkeurig zijn als vereist. De geïsoleerde container is bij voorkeur een waterbad en de bodem van de ELISA-plaat moet in het water worden geplaatst om de temperatuur snel in evenwicht te brengen. Elke ELISA-plaat mag niet op elkaar worden gestapeld. Om verdamping te voorkomen, moet het bord worden afgedekt. De plaat kan ook plat in een natte doos met nat gaas op de bodem worden geplaatst. De natte doos moet worden voorverwarmd tot de opgegeven temperatuur, bijvoorbeeld de isolatie van de broedmachine is belangrijker. 4, wassen: wassen in het ELISA-proces is geen reactiestap, maar besloot de sleutel tot succes te sluiten. Het doel van wassen is het wegwassen van de stoffen in de reactieoplossing die gebonden zijn aan het vaste fase antigeen of antilichaam en de interfererende stoffen die tijdens de reactie niet-specifiek geadsorbeerd zijn aan de vaste-fase drager. De adsorptie van eiwitten door kunststoffen zoals polystyreen is universeel, dus niet-specifieke adsorptie moet zoveel mogelijk worden vermeden tijdens de ELISA-test en deze niet-specifiek geadsorbeerde interfererende stof moet tijdens het wassen worden weggewassen. De toevoeging van Tween aan de wasvloeistof kan het waseffect verbeteren. Als het wassen niet grondig is, vooral de laatste keer, als er niet-specifieke adsorptie van het enzymconjugaat is, zal de blanco waarde worden verhoogd. Bovendien zal in de indirecte methode, als het niet-specifieke IgG in het monster wordt geadsorbeerd op de vaste fase zonder te worden gewassen, dit ook interfereren met het met enzym gemerkte antilichaam. De ELISA-plaat wordt over het algemeen gewassen met de volgende methoden: 1 absorberen van de reactieoplossing; 2 vullen van de plaat met de wasoplossing; 3, plaatsen gedurende 2 minuten, licht schudden; 4 absorberen of gieten van de vloeistof in het gat en kloppen op het absorberende papier. Het aantal wasbeurten is over het algemeen 3 tot 4 keer, en soms zelfs 5 tot 6 keer. Een automatische plaatwasser ELISA kan ook worden gebruikt, maar het daadwerkelijke gebruik van het instrument moet eerst worden gecontroleerd. Elke pipet van de wasmachine moet ook dicht bij de bodem van het overeenkomstige gat worden geplaatst. Om hetzelfde waseffect van elk gaatje te garanderen. 5. Kleurontwikkeling en colorimetrisch: de temperatuur en tijd van de reactie na toevoeging van het substraat in de kwantitatieve bepaling moeten nog steeds nauwkeurig zijn volgens de voorschriften. De reactie kan echter in het algemeen worden uitgevoerd bij kamertemperatuur in een kwalitatieve test. Als het substraat OPD is, moet het uit de buurt van licht worden geplaatst. De reactietijd hoeft niet strikt te worden geregeld en soms kan de stopoplossing op tijd worden toegevoegd volgens de kleuring van de positieve controle en de negatieve controle. Om dezelfde reactietijd voor elk putje te waarborgen, moeten de procedure en snelheid van het toevoegen van de stopoplossing hetzelfde zijn als bij het toevoegen van het substraat. Kwalitatieve bepaling, zoals een negatieve reactie, is licht en soms kunnen de resultaten visueel worden beoordeeld. Plaat ELISA gebruikt in het algemeen een enzymlabellezer om absorptie bij een gespecificeerde golflengte te lezen. De automatische labellezer moet worden getest op compatibiliteit met de putjes van de gebruikte ELISA-plaat en de herhaalbaarheid van de resultaten vóór gebruik. Controleer bij colorimetrie eerst het nulpunt met gedestilleerd water, lees de substraatporiën (de poriën zonder enige reactie en voeg alleen het substraat toe) en de lege putten (de poriën gemeten door de zoutoplossing of PBS in plaats van het monster voor het hele proces) om deze tijd vast te leggen. De reagensstatus van de test. Daarna kan het lege gat worden gebruikt om het nulpunt te kalibreren en kan de absorptie van het monstergat, het standaardgat en het controlegat worden afgelezen. Als het nulpunt nog steeds wordt gecorrigeerd door gedestilleerd water, moet de absorptie van de bovengenoemde gaten worden afgetrokken van de absorptie van de lege gaten in de berekening. Niet geschikt voor het publiek Ongepaste mensen: over het algemeen zijn er geen mensen die niet geschikt zijn. Bijwerkingen en risico's Geen bijwerkingen

Het materiaal op deze site is bedoeld voor algemeen informatief gebruik en is niet bedoeld als medisch advies, waarschijnlijke diagnose of aanbevolen behandelingen.