Serumproteïne-elektroforese (SPE)

Biomoleculen zoals eiwitten dragen een negatieve of positieve lading in een buffer en bewegen naar een anode of een kathode in een elektrisch veld, dat elektroforese wordt genoemd. Vanwege hun verschillende iso-elektrische punten, verschillende moleculaire grootte, vorm en lading-tot-massa verhouding, hebben verschillende eiwitmoleculen verschillende elektroforetische mobiliteit en kunnen verschillende eiwitten worden gescheiden in een bepaald ondersteunend medium. Veelgebruikte elektroforese technieken omvatten celluloseacetaatmembraanelektroforese, agarosegelelektroforese, polyacrylamidegelelektroforese en immuno-elektroforese. Bovendien heeft multipel myeloom vaak M-globuline-banden tussen het bèta-globuline-gebied en het gamma-globuline-gebied; dubbele albuminemie vertoont een dubbele albumine-band. Basis informatie Specialistenclassificatie: classificatie voor groei en ontwikkeling controleren: biochemisch onderzoek Toepasselijk geslacht: of mannen en vrouwen nuchter zijn: vasten Inclusief items: serum 2 microglobuline (2-MG), serum 2-macroglobuline, serum 1-microglobuline Tips: 12 uur vasten, veneuze bloedtest, monsters moeten vers bloed zijn. Voorafgaand aan de test moet u de arts informeren over de geneesmiddelen die u recentelijk hebt ingenomen en de recente fysiologische veranderingen. Normale waarde Celluloseacetaatmembraan elektroforese albumine 0,61 ~ 0,71 (61% ~ 71%), 1 globuline 0,03 ~ 0,04 (3% ~ 4%), 2 globuline 0,06 ~ 0,10 (6% ~ 10%), beta-globuline 0,07 tot 0,11 (7% tot 11%) en gamma-globuline 0,09 tot 0,18 (9% tot 18%). Klinische betekenis 1, albumine reductie wordt gevonden bij chronische hepatitis, cirrose, leverkanker en ga zo maar door. 2, 1 globuline (glycoproteïne) verhoogd bij primaire leverkanker. Het is verminderd bij ernstige hepatitis, cirrose en coma in de lever en is positief gecorreleerd met albumine. De bepaling van 1-globuline bij leverziekte heeft referentiewaarde voor het beoordelen van de ernst en de prognose van hepatitis. Over het algemeen geeft de toename van 1-globuline aan dat de aandoening mild is en geeft de afname van 1-globuline aan dat de aandoening zwaarder is. Bij ernstig leverfalen kan het serumgehalte aanzienlijk worden verlaagd. 3. Er was geen significante verandering in de beginfase van 2 globuline virale hepatitis en nam geleidelijk toe na een week Subacute hepatitis en acute hepatische necrose en gedecompenseerde cirrose waren verminderd. 4, beta-globuline verhoogd in leververvetting, hyperlipidemie, nefrotisch syndroom, diabetes met hypercholesterolemie, obstructieve geelzucht, kwaadaardige tumoren. Bij cholestasis leverziekte is het gehalte verhoogd, parallel aan de opkomst van 2-globuline. Verminderd in acute en chronische hepatitis, cirrose, vooral gedecompenseerde cirrose en necrotische cirrose, daalde het meest significant. 5, gamma-globuline verhoogd bij chronische hepatitis, cirrose, lever- en galblaasaandoeningen. Typische cirrose kan worden gezien in de fusie van - en -banden om een --brug te vormen. Veranderingen in gamma-globuline bij patiënten met leverziekte kunnen de ernst van de aandoening weerspiegelen. Naarmate de toestand verbetert, kan de inhoud geleidelijk terugvallen naar normaal. Als het op een hoog niveau blijft dalen, geeft dit aan dat de toestand ernstig is, de prognose slecht is en er een neiging is om chronische hepatitis en cirrose te ontwikkelen. Bovendien kunnen infecties, schistosomiasis, multipel myeloom, bindweefselaandoeningen, enz. Worden verhoogd. Verminder de incidentie van gamma-globulinedeficiëntie, patiënten met gedeeltelijke chemotherapie. Bovendien heeft multipel myeloom vaak M-globuline-banden tussen het bèta-globuline-gebied en het gamma-globuline-gebied; dubbele albuminemie vertoont een dubbele albumine-band. Lage resultaten kunnen ziekten zijn: hoge resultaten van cholestatische geelzucht kunnen ziekten zijn: levercirrose, primaire leverkanker, multipel myeloom bij ouderen 1, 12 uur nuchter, veneuze bloedtest, monsters moeten vers bloed zijn. 2. Voorafgaand aan de test dient u de arts te informeren over de geneesmiddelen die u recentelijk heeft ingenomen en de recente fysiologische veranderingen. 3. Fysiologische hoogte kan optreden in de volgende gevallen: (1) De toename van 1-globuline kan worden waargenomen na 6 maanden zwangerschap. (2) De toename van 2-globuline kan worden waargenomen bij zuigelingen die 1 tot 6 maanden worden geboren, met een matige toename in 4 tot 6 maanden zwangerschap en een significante toename in 7 tot 9 maanden. (3) -globulineverhoging wordt waargenomen bij de baby na de geboorte, 4 tot 6 maanden zwangerschap. (4) De toename van -globuline wordt waargenomen na het vaccinatie-immunisatievaccin. Inspectie proces 1. Voeg de buffer toe aan de elektroforesetank en stel de buffer in de tanks aan beide kanten in om ze in hetzelfde vlak te maken. 2. Bereiding van celluloseacetaatfilm: Neem een celluloseacetaatfilm (2 cm x 8 cm) en teken een horizontale lijn met een potlood op 1,5 cm (één zijde van de negatieve zijde) van het ruwe oppervlak om een stippellijn te maken. Na nummering en aanduiding van de positieve en negatieve elektroden werd de film ondergedompeld in de barbituraat-barbital natriumbufferoplossing, en na voldoende verzadigd te zijn (gewoonlijk 20 min), werd de overtollige buffer verwijderd door het schone filterpapier te sandwichen. 3. Het celluloseacetaatfilmhaar wordt bevestigd aan de elektroforesetankhouder en rechtgetrokken. Pipetteer 3 ~ 5l niet-hemolytisch serum met een micropipet en voeg het toe langs de horizontale lijn op de horizontale lijn. Het monster moet op een bepaalde afstand van de rand van de film worden bewaard om vervorming van de eiwitband in het elektroforese-patroon te voorkomen. Nadat het serum in de film doordringt, wordt de film omgekeerd. Met de lichte kant naar boven, plak deze plat op de beugel van de elektroforesetank en verbind de twee uiteinden van de film met de buffer met dubbellaags filterpapier of vier lagen gaas en wacht even. 4, zet de stroom aan, let op de positieve en negatieve elektroden op de celluloseacetaatfilm, sluit niet verkeerd aan. Spanning 90 ~ 150 v, stroom 0,4 ~ 0,6 mA / cm (verschillende elektroforese vereiste spanning, stroom kan anders zijn, moet flexibel zijn), zomervermogen 45min, winterstroomtijd is iets langer, ongeveer 60min, uitbreiding van elektroforesezone ongeveer 25 ~ 35mm kan zijn. 5, verven: Nadat de stroom is voltooid, verwijder de film en dompel deze direct onder in de Lichunhong S-kleurstofoplossing of de aminozwarte 10B-kleuroplossing, kleur gedurende 5 tot 10 minuten (door de albuminezone) en spoel vervolgens de resterende spoelvloeistof. Kleur tot de achtergrond kleurloos is. 6, kwantitatief: 1 colorimetrische methode: dep de gespoelde film, snijd het geverfde eiwitgebied in de overeenkomstige buis, voeg 0,6 ml / l natriumhydroxide 6 ml in de albuminebuis toe (bereken de absorptie vermenigvuldigd met 2), de rest Voeg 3 ml toe aan elke buis, schud deze enkele keren en plaats deze 20 minuten in een watertank van 37 ° C om de kleur uit te lekken. Amino Black 10B kleuring De absorptie van elke buis werd afgelezen bij 620 nm met behulp van een spectrofotometer, en vervolgens werd de inhoud van elke buis berekend (gelijktijdige blanco buiscontrole). Toen de Lichunhong S werd geverfd, werd het percolaat behandeld met 0,1 mol / L natriumhydroxide en de hoeveelheid was dezelfde als hierboven. Voeg na 10 minuten 0,6 ml 400 ml / l azijnzuur toe aan de albuminebuis (vermenigvuldig de absorptie met 2) en voeg 0,3 ml toe aan de andere buizen om wat natriumhydroxide te neutraliseren om de kleur dieper te maken. Centrifugeer en neem de bovenstaande vloeistof indien nodig. De absorptie van elke buis werd afgelezen bij 520 nm door een spectrofotometer (gelijktijdige blanco controle) en vervolgens werd de respectieve inhoud berekend. 2 Densitometer-scanmethode: A. Transparant: zuig de spoelvloeistof op de film op (om te voorkomen dat de transparante vloeistof wordt verdund om het transparante resultaat te beïnvloeden), dompel de film gedurende 2 tot 3 minuten in de transparante vloeistof, verwijder hem en rol hem plat af op een rollende manier. Reinig het krasvrije stuk glas (maak geen bubbels), stel de schuif een tijdje in, verwijder de overtollige transparante vloeistof, plaats deze in een oven op een constante temperatuur van 90 ° C tot 100 ° C, bak gedurende 10 tot 15 minuten, verwijder en koel af tot Bij kamertemperatuur zijn de eiwitgebieden transparant volgens deze methode, de film is vlak en kan direct worden gescand en permanent geconserveerd (transparant met waterstofnaftaleen of vloeibare paraffine. De gespoelde film moet worden gedroogd en transparant, en de transparante film kan niet transparant zijn) Het duurt lang en is gevoelig voor rimpels). B. Scanning Kwantificering: de transparante film wordt in een volautomatische densitometer of andere donkere densitometer geplaatst voor scananalyse. Niet geschikt voor het publiek Geen. Bijwerkingen en risico's Geen.

Het materiaal op deze site is bedoeld voor algemeen informatief gebruik en is niet bedoeld als medisch advies, waarschijnlijke diagnose of aanbevolen behandelingen.