쥐 적혈구 화환 형성 분석
B 림프구는 항체 합성에 관여하며 체액 성 면역 반응의 효과기 세포이다. B 세포의 표면은 막 표면 면역 글로불린 (SmIg), Fc 수용체 및 보체 수용체를 보유한다. 항원-항체 복합체의 Fc 부분에 강하게 결합한다. 닭 또는 양의 적혈구가 선택되어 해당 항-적혈구 항체와 함께 EA 복합체로 민감화됩니다 .B 세포의 Fc 수용체는 EA 화환이라고 불리는 EA와 함께 화환을 형성 할 수 있습니다. EA 복합체가 B 세포의 보체 수용체를 보충하고 보완하기 위해 첨가되는 경우, EAC 로제트가 형성된다. B 세포의 표면에는 뮤린 RBC 수용체가 있으며, 이는 마우스 RBC에 결합하여 마우스 적혈구 장미 (M-RFC)를 형성 할 수 있으며, 주로 IgM 수용체와 B 세포에 결합하며, M-RFC는 대부분 순진한 B 세포이다. 이 검사는 주로 B 림프구 수를 감지하고 체액 면역 수준을 결정하는 데 사용됩니다. 기본 정보 전문가 분류 : 검사 분류 : 혈액 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 분석 결과 : 정상 이하 : 그러나, ME 로제트의 백분율은 감마 글로불린 혈증 및 심각한 복합 면역 결핍없이 감소되거나 부재 하였다. 정상 값 : 여성 말초 혈액에서 ME의 백분율 : 5 % -10 % 정상 이상 : 만성 림프 구성 백혈병 환자의 말초 혈액에서 ME 화환의 백분율은 60 % 내지 80 %로 높다. 부정적 : 긍정적 : 팁 : 확인할 때 휴식을 취하십시오. 정상 값 결과 200 개의 림프구를 현미경으로 계수하고, 3 개 이상의 마우스 적혈구를 흡착 한 림프구는 B 림프구이며, 마우스 세포 화환 (ME 화환)의 백분율을 계산했다. 정상적인 인간 말초 혈액에서 ME 로제트의 백분율은 5 % 내지 10 %이다. 임상 적 의의 만성 림프 구성 백혈병 환자의 말초 혈액에서 ME 화환의 백분율은 60 %에서 80 %까지 높지만 감마 글로불린 혈증, 심각한 복합 면역 결핍 등은 없으며 ME 화환의 백분율은 감소하거나 부재합니다. 소아에서 X- 연결된 비 감마 글로불린 혈증 , 소아에서 이차 면역 결핍의 높은 발생률은 질병 일 수 있음 : 만성 림프 구성 백혈병에 대한 예방 조치 (1) 인큐베이션 시간 : 인큐베이션 시간에 따라 ME의 비율이 점차 증가하였고 1 시간 동안 인큐베이션 한 후 ME 비율은 7.4 ± 3.1 %, 18 시간 후에 인큐베이션을 18.3 ± 3.8 %로 증가 시켰으며, 72 시간 인큐베이션 후 화환의 수를 증가시켰다. 점차 3.4 ± 7.1 %로 떨어졌다. (2) 배양액 : Tc199 배양액을 사용하는 것이 가장 적합하고 결과 및 반복성이 양호하다. Hepes-buffered RPMl1640 배지로 림프구 및 적혈구를 세척하고 재현 탁 시키면 세포가 응집하여 대형 세포를 형성하는 경향이있어 결과를 신뢰할 수 없게되었습니다. (3) 적혈구 대 림프구의 최적 비율이 약 35 : 1, 비율이> 60 : 1 또는 비율이 <25 : 1 인 경우, ME 화환의 수를 감소시킬 수있다. (4) MRBC 배양액 보존 : Alsever 용액에서 1 주일 동안 4 ° C에 저장된 MRBC는 여전히 안정적인 수의 화환을 생산하는 반면, MRBC는 PBS, 식염수 또는 Tc199 배양액에 저장되며, 저장 시간이 연장되고 화환 수가 증가합니다 점차 72 시간의 저장 후에는 작거나 화환 형성 세포 만 볼 수 있습니다. 검사 과정 (1) 1ml의 상기 마우스 적혈구 현탁액을 취하고, 3ml의 생리 식염수를 첨가하고, 잘 혼합하고, 1500r / min, 10 분 동안 원심 분리하고, 총 3 회 세척하고, 마지막으로 생리 식염수 (약 1.4x108)로 1 % 마우스 적혈구 현탁액을 제조한다. 세포 / ml). (2) 항 응고를 위해 1.5ml의 헤파린을 취하고, 림프구 층화에 의해 림프구를 분리하고, 세포 농도를 20 % 송아지 혈청 행크 용액으로 2 × 10 7 / ml로 조정 하였다. (3) 0.1ml의 림프구 현탁액을 취하고, 같은 양의 1 % 마우스 적혈구 현탁액을 첨가하고, 혼합하고 37 ° C 수조에서 10 분 동안, 500r / 분, 10 분 동안 원심 분리하고, 4 ° C 냉장고를 2 ~ 3 시간 동안 두십시오. (4) 상등액 0.05ml 피펫, 2g / L 청색 용액 1 방울을 첨가하고, 부드럽게 회전하여 혼합하고, 슬라이드 상에 혼합물 1 방울을 취하고, 커버 슬립을 덮고, 세포가 침몰 된 후, 고출력 현미경으로 확인하십시오. 군중에게 적합하지 않음 부적절한 군중이 없습니다. 부작용 및 위험 안전한 점검이며 신체에 무해합니다.
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