림프구 독성 시험

특이 적 이펙터 T 림프구가 시험 관내에서 표적 세포와 접촉 될 때, 이들은 세포 독성이라 불리는 표적 세포를 파괴하고 용해시키는 특성을 나타낼 수있다. 표적 세포는 종양 세포 또는 다른 조직 세포 일 수있다. 림프구가 표적 세포를 죽이는 방법은 직접적으로 죽이거나 림 포카 인을 생산함으로써 표적 세포를 파괴 할 수 있습니다. 이 시험 방법에는 형태 학적 시험과 동위 원소 방출의 두 가지 방법이 있습니다. 전자는 특별한 장비를 필요로하지 않으며, 현미경을 사용하여 표적 세포의 생존 수를 계산하는 것이 편리하다. 후자는 125I- 데 옥시 우리 딘 또는 51Cr을 사용하여 표적 세포를 표지하고, 방사성 동위 원소의 방출은 표적 세포에 대한 손상의 지표로서 사용된다. 이 방법에는 액체 섬광 계와 같은 특수 장비가 필요하지만 자동 측정이 가능하고 결과를 재현 할 수 있습니다. 기본 정보 전문가 분류 : 종양학 검사 분류 : 혈액 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 분석 결과 : 정상 이하 : 정상 값 : 아니요 정상 이상 : 부정적 : 정상입니다. 긍정적 : 현재 관련 데이터가 없습니다. 팁 : 정상적인 상태를 유지하십시오. 정상 값 형태 학적 시험 방법을 시험 군과 대조군 사이에 비교 하였다 (P <0.05). 125I 또는 ​​51Cr 방법 P> 0.05. 임상 적 의의 이 시험은 시험관 내에서 종양 환자의 세포 면역을 측정하기위한 지표로서 사용될 수 있으며, 또한 종양 세포를 사멸시키는 면역 세포의 능력을 측정함으로써 종양 환자의 예후를 결정할 수 있고, 림프구의 기능적 소집단을 확인할 수있다. 긍정적 인 결과는 질병 일 수 있습니다 : 신장 이식, 약물 피부염 고려 사항 (1) 종양 세포를 공격하는 대상 림프구의 능력을 측정함에있어서, 대상의 종양 세포 및 림프구를 실험군에 첨가하고, 종양 표적 세포 및 배양 배지를 대조군에 첨가 하였다. 종양 항원이나 면역원, 치료제 등의 다른 시료가 세포 면역에 관여하는 경우, 세 번째 그룹을 추가해야하며,이 테스트 그룹에서 먼저 림프구를 검사 할 샘플과 반응시킨 후 세척 한 후 관찰합니다. 감 작화 된 림프구의 종양 표적 세포에 대한 세포 독성 효과. 현재 처음 두 그룹이 제어 그룹이되었습니다. (2) 표적 세포 및 림프구의 생존율은 최적 상태, 일반적으로> 90 %이어야한다. (3) 배양액에 첨가 된 송아지 혈청은 먼저 독성 테스트를 받아야합니다. (4) 접종 된 표적 세포 및 림프구의 수는 정확해야한다. (5) 실험 그룹과 제어 그룹은 오류를 줄이기 위해 동일한 보드에 배치해야합니다. (6) 배양액의 pH는 6.8 내지 7.2 인 것이 가장 바람직하다. 검사 과정 (1) 표적 세포의 접종 : 점착성으로 성장할 수있는 종양 세포를 선택하고, 행크 용액으로 세척하고, 2 내지 3 분 동안 2.5 g / L 트립신으로 소화시키고, 트립신 용액 (세포가 여전히 병벽에 부착되어 있음)을 붓고 행크를 사용한다. 세포를 가볍게 3 회 세척하고 행크 용액을 부었다. 접착 성 세포를 10 % 내지 20 % 송아지 혈청을 함유하는 RPMI1640 용액으로 세척하고, 세포 펠릿을 100- 메쉬 필터를 통한 여과에 의해 제거하여 1x10 6 / ml의 단일 종양 세포 현탁액을 제조하고, 세포 현탁액을 점 적기로 피펫 팅 하였다. 40- 웰 배양 플레이트, 웰당 1 방울 (약 100-150 세포)에 떨어 뜨리고, 플레이트를 5 시간 CO2 인큐베이터에 37 ℃에서 20 시간 동안 두었다. 배양 플레이트를 꺼내어 배양액을 제거하고, 라이트 염색 후 10 개의 웰당 평균 부착 성 종양 세포 수를 세었다. 두 그룹의 차이가 1/3 이상이면 오차가 너무 커서 사용하기에 오차가 크지 않았다. 배양 플레이트를 공식적으로 테스트 할 수 있습니다. (2) 림프구 분리 : 대상체의 헤파린 항응고제 3ml를 취해 수 크로스-디아제팜 침출액으로 림프구를 분리 한 다음 행크 용액으로 3 번 씻은 다음 RPMI1640 용액 (2 ~ 3)과 혼합합니다. ) × 105 / ml 세포 현탁액. (3) 세포 독성 시험 : 림프구와 표적 세포를 200 : 1의 비율로 혼합하고, (2 ~ 3) x 104 림프구 (0.1 ml 부피)를 각 웰에 첨가하고, 웰당 약 20 % 송아지 혈청을 첨가한다. 0.1 ml의 RPMI 1640 용액을 37 ℃ 5 % CO 2 인큐베이터에 40 시간 동안 두었다. 배양 플레이트를 꺼내어 배양액을 제거하고, 라이트 염색 후, 플레이트 바닥에 잔존하는 표적 세포의 수를 현미경으로 세었다. 군중에게 적합하지 않음 특별한 금기는 없습니다. 부작용 및 위험 없어요

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