텔로머라제 활성
텔로미어는 진핵 생물의 염색체 끝의 특수 구조이며 구아닌과 관련 단백질이 풍부한 반복 DNA 서열로 구성됩니다. 텔로미어는 염색체 말단의 안정성에 필수적입니다. 텔로미어 길이를 유지하려면 텔로 머라 제 활성이 필요합니다. 내인성 사이토 카인은 불멸화 된 세포 및 종양 세포의 장기 생존에 중요한 역할을한다. 텔로 머라 제는 RNA와 단백질의 복합체로 특정 RNA 의존성 역전사 효소로 염색체 끝에서 텔 로머 DNA를 합성하여 세포 분열 과정에서 텔로미어를 보충 할 수 있습니다. DNA의 상실, 텔로미어의 길이 유지, 염색체의 동적 균형 유지 및 세포 불멸화. 텔로 머라 제를 검출하기위한 고감도 PCR- 기반 방법의 확립 이후, 텔로 머라 제는 광범위한 관심을 끌었다. 텔로 머라 제는 세포 증식, 분화 및 불멸과 밀접한 관계가 있으며, 종양 및 노화에 대한 기본 연구의 핫스팟 중 하나가 된 것으로 밝혀졌다. 기본 정보 전문가 분류 : 종양학 검사 분류 : 면역 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 분석 결과 : 정상 이하 : 정상 값 : 아니요 정상 이상 : 부정적 : 정상 값은 음수입니다. 긍정적 : (1) 간암 환자는 텔로 머라 제 양성 비율이 더 높습니다 (85 %). (2) 텔로 머라 제는 신경 아세포종 (94 %), 유방암 (93 %), 결장 직장암 (93 %), 위암 (85 %), 전립선 암과 같은 대부분의 악성 종양 조직에서 높게 발현됩니다. (84 %), 폐암 (80 %) 등 텔로 머라 제 활성은 종양의 임상 단계 및 예후와 밀접한 관련이 있습니다. (3) 몇몇 양성 병변 (간염, 간경변, 양성 뇌막 종 등)에서 약한 텔로 머라 제 활성이있을 수 있습니다. 팁 : 몇 가지 양성 병변 (간염, 간경변, 양성 수막종 등)에서 텔로 머라 제 활동이 약할 수 있습니다. 정상 값 부정적. 임상 적 의의 1, 간암 환자는 높은 텔로 머라 제 양성 비율 (85 %)을 가지며, 텔로 머라 제 활성 양성 AFP 수준은 텔로 머라 제 활성 음성보다 현저히 높다. 텔로 머라 제 활성은 종양 크기, 조직 학적 등급 및 종양 전이와 유의하게 관련되지 않았다. 텔로 머라 제는 간암 진단을위한 종양 마커 일 수 있습니다. 2. 텔로 머라 제는 신경 아세포종 (94 %), 유방암 (93 %), 결장 직장암 (93 %), 위암 (85 %) 및 전립선 암 (예 : 전립선 암)과 같은 대부분의 악성 종양 조직에서 고도로 발현됩니다. 84 %), 폐암 (80 %) 등 텔로 머라 제 활성은 종양의 임상 단계 및 예후와 밀접한 관련이 있습니다. 따라서, 텔로 머라 제는 현재 가장 구체적이고 보편적 인 종양 마커이다. 3. 몇 가지 양성 병변 (간염, 간경변, 양성 뇌막 종 등)에서 텔로 머라 제 활동이 약할 수 있습니다. 긍정적 인 결과는 질병 일 수 있습니다 : 신경 모세포종, 결장 직장암, 유방암, 위암, 간암, 전립선 암, 결장암, 신장 세포 암종, 갑상선 암 최근에, "텔로미어, 텔로 머라 제 가설"은 텔로 머라 제 활성 수준을 바이오 마커 및 종양 진단에 대한 예후 지표로서 사용하여 점점 더 많은 연구에 의해 확인되었다. 1. 실험실 오염 및 오 탐지 또는 오음을 방지하기 위해주의하십시오. 2. 허위 음성을 줄이기 위해 조직 표본에 포함 된 중합 효소 억제제를 제거하도록주의하십시오. 3. 섬광 분석 기술, ELISA 방법, 현장 하이브리드 방법은 TRAP 방법보다 더 신뢰할 수 있습니다. 검사 과정 작동 확인 : 게놈 DNA는 0.1 μg; 50 mmol / L 염화칼륨, 10 mmol / LTris-HCl (pH 8.4), 1.5 mmol / L 염화 마그네슘, 100 μg 젤라틴 함유 버퍼; 각 프라이머는 0.25 μmol / L; dATP, dCTP, dGTP dTIP는 각각 200 μmol / L이고; DNA 폴리머 라제는 2.5 U이고, 최종 부피는 100 μl였다. 증발을 방지하기 위해 액체 파라핀 몇 방울을 넣으십시오. 반응주기 : 1 변성 : 90 ° C 30 ~ 60 초; 2 프라이머 및 주형 어닐링 온도 : 40 ~ 60 ° C 30 ~ 60 초; 3 연장 : 72 ° C 1-2 분. 30 내지 40 배의 반복 된 사이클 후, 마지막 7 ° 72 ° C 프라이머 연장은 7 분 동안 종료되었다. 액체 파라핀을 제거한 후, 생성물을 분석 할 수있다. 아가 로스 겔에서 전기 영동 한 후, 에티 디움 브로마이드로 염색하고, UV 램프로 조사하여 예상 증폭 길이의 형광 스트립을 관찰 하였다. 생성물은 또한 방사성 표지 된 또는 비 방사성 표지 된 올리고 뉴클레오티드 프로브를 사용하여 서던 블롯 또는 스폿 블롯에 혼성화 될 수있다. PCR 자동 기기를 사용하는 것이 더 편리합니다. 반응 시약, DNA 주형 및 Taq-DNA 중합 효소를 테스트 튜브에 추가 한 후 조정 된 절차, 즉 필요한 온도, 시간 및 각 온도 및 시간의 연장 및 사이클 수에 투입됩니다. 반응은 자동 기기에서 수행되어 만족스러운 증폭 생성물을 얻는다. 군중에게 적합하지 않음 적절한 시험을받지 않은 사람은 시험하지 않아야합니다. 부작용 및 위험 1. 감염 : 혈액을 수집 할 때 무균 작동에주의를 기울이고 혈액 수집 현장에서 물 및 기타 부품의 오염을 피하여 국소 감염을 피하십시오. 2, 출혈 : 혈액에 전체 압축 시간, 특히 응고 병증, 출혈 경향이 주어지면 국소 피하 약탈, 타박상 및 부기를 피할 수 있습니다.
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