가래의 분비 IgE
SIgE 부위는 SIgA 부위와 유사하며 호흡기의 층내 혈장 세포에서 생성되며 점막 조직과 외 분비액에 분포하며 알레르기 항원의 침입 부위와 알레르기 반응 부위입니다. IgE는 단량체, 8S, 19x104ku이고, 그의 중쇄는 γ 사슬보다 길다. 특정 조건에서 세포 (비만 세포, 호염기구 등)에 결합하여 세포 내 생물 활성 물질의 방출을 유발할 수있는 기능성 영역 (CH4)이 하나 더 있으므로 IgE는 제 1 형 알레르기를 일으키는 주요 항체입니다. . 기본 정보 전문가 분류 : 호흡기 검사 분류 : 가래 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 주의 : 주 시약 성분을 잘못 준비하거나 잘못 보관하면 쉽게 분해되고 비활성화됩니다. 정상 값 0.1 내지 9mg / L. 임상 적 의의 증가 : IgE는 단량체, 8S, 19x104ku이며 중쇄는 γ 사슬보다 길다. 특정 조건에서 세포 (비만 세포, 호염기구 등)에 결합하여 세포 내 생물 활성 물질의 방출을 유발할 수있는 기능성 영역 (CH4)이 하나 더 있으므로 IgE는 제 1 형 알레르기를 일으키는 주요 항체입니다. . 기관지 천식 및 과민성 폐렴 환자의 경우 가래의 SIgE 함량이 증가 할 수 있습니다. 높은 결과는 질병 일 수 있습니다 : 기관지 천식, 알레르기 성 폐렴 항원, 항체, 효소 접합체, 기질 등과 같은 ELISA의 주요 시약 성분은 적절하게 준비되거나 잘못 보관되지 않으면 쉽게 분해 및 비활성화됩니다. ELISA에는 많은 단계가 있으며, 작업이 표준화되지 않으면 정확한 결과를 얻기가 어렵습니다. 따라서 시험의 효과를 보장하기 위해 각 시험에 대해 품질 관리를 수행해야합니다. 우수한 키트에 제공된 양성 및 음성 대조군은 일반적으로 시험의 품질 관리로 사용될 수있다. 지시에 따르면, 시험의 효과는 얻어진 흡광도 값으로부터 판단 될 수있다. 임상 시험에서 가장 일반적으로 사용되는 HBsAg 검사를 예로 들어, 키트의 음성 대조군은 HBsAg 음성 인간 혈청이어야하며 양성 대조군은 HBsAg 함량 (예 : 9 ± 2 ng / ml)을 나타내야합니다. 각 시험 배치마다 3 개의 음성 대조군과 2 개의 양성 대조군을 동시에 만들어야합니다. 음성 대조군 검정에 의해 수득 된 흡광도 값은 특정 값 (예를 들어, 0.100)보다 작아야하고, 양성 대조군 흡광도에서 음성 대조군 흡광도를 뺀 평균값은 특정 값 (예를 들어, 0.200)보다 커야한다. 이 값은 지정된 분석 조건에서 키트의 특정 실험 값입니다. 따라서 시험 결과가 요구 사항을 충족하면 사용 된 시약의 효과와 작업의 정확성을 모두 나타내며,이 경우에만 배치 시험이 효과적입니다. 키트에 포함 된 포지티브 및 네거티브 컨트롤 중 일부는 품질 관리 요구 사항이나 색도계 등과 같은 실험실의 측정 조건을 충족하지 않으며 키트 설명의 차이에 따라 실제 상황에 따라 적절한 품질을 사용해야합니다. 실험에서 얻은 실험실의 제어 및 품질 관리 값. 상품의 품질 관리 혈청은 비싸다. ELISA 품질 관리 제품의 정 성적 결정은 일반적으로 자체적으로 준비 될 수 있습니다. HBsAg 테스트는 여전히 예로 사용됩니다. 고품질 시약으로 HBsAg 음성 인 헌혈자로부터 음성 대조군을 취할 수 있습니다. 양성 대조군은 적절한 양의 HBsAg- 양성 혈청을 음성 대조군 혈청에 첨가하고, 혼합 된 혈청을 참조 표준 또는 정량적 대조군과 비교하여 HBsAg 함량을 결정함으로써 제조 될 수있다. 이어서, 원하는 농도의 HBsAg- 양성 혈청을 얻기 위해 적절한 희석을 수행 한 다음, 젠타 마이신 및 살리실산과 같은 적절한 양의 항균 보존제를 첨가 한 다음 저온에서 동결 보존한다. 검사 과정 ELISA는 다중 반응, 다중 시약, 다중 단계 테스트 방법으로 요구 사항에 따라 신중하고 신중하게 작동해야합니다. 그렇지 않으면 정확한 결과를 얻을 수 없습니다. 다른 항목을 감지하는 데 사용되는 ELISA 절차는 약간 다르지만 로딩, 유지, 세척 및 비색계와 같은 단계가 포함됩니다. 각 단계의 작동 지점은 아래에 설명되어 있습니다. 1. 시약 준비 : 키트의 지침에 따라 테스트에 필요한 시약을 희석하거나 준비하십시오. 세척을 포함하여 ELISA에 사용 된 증류수 또는 탈 이온수는 신선하고 고품질이어야합니다. 자체 포함 버퍼는 pH 측정기로 측정해야합니다. 냉장고에서 꺼낸 시험 시약의 온도는 실온에 도달 한 후에 사용해야합니다. HRP를 마커로 사용하는 테스트에서는 금속으로 오염 된 용기를 사용할 수 없습니다. 2. 적재 : 필요에 따라 좋은 ELISA 플레이트를 준비하십시오. 혈청 (피부 용액) 시편은 냉장고에 새로 수집하거나 적절히 보관해야하며, 용혈되거나 탁한 시편은 사용하지 않아야합니다. 방부제로 아 지드 화 나트륨을 포함하는 표본은 HRP 표지를위한 1 단계 ELISA에 사용할 수 없습니다. 시료를 추가 할 때 시편을 구멍의 바닥에 추가하고 구멍 벽의 상단에 추가하지 말고 튀지 않도록주의하십시오. 기포가 나타나지 않아야합니다. 정량적 결정에 추가 된 샘플 양의 정확도는 정량적 요구 사항을 충족해야합니다. 정 성적 측정에서, 샘플의 양의 정확성은 때때로 강조되지 않으며, 예를 들어 드롭로 규정됩니다. 이 시점에서 동일한 직경의 드로퍼를 사용하고 각 드랍의 부피가 기본적으로 동일하도록 올바른 적재 위치를 유지해야합니다. 효소 접합체의 첨가 및 기질의 첨가에 대한 작동 및 요건은 샘플의 첨가와 동일하다. 3. 단열 : ELISA에는 일반적으로 두 가지 항원-항체 반응이 있습니다. 즉, 시료를 첨가 한 후와 배합물을 첨가 한 후입니다. 이때, 반응 온도 및 시간은 필요한만큼 정확해야한다. 절연 용기는 바람직하게는 수조이고, 온도를 빠르게 균형을 맞추기 위해 ELISA 플레이트의 바닥을 물에 놓아야한다. 각 ELISA 플레이트를 함께 쌓아서는 안됩니다. 증발을 피하려면 보드를 덮어야합니다. 플레이트는 바닥에 젖은 거즈가있는 젖은 상자에 평평하게 놓을 수도 있습니다. 젖은 상자는 지정된 온도로 예열해야합니다 (예 : 인큐베이터의 절연이 더 중요합니다). 4, 세척 : ELISA 공정에서의 세척은 반응 단계가 아니지만 성공의 열쇠를 닫기로 결정했습니다. 세척의 목적은 반응 동안 고상 항원 또는 항체에 결합 된 반응 용액의 물질 및 고상 담체에 비특이적으로 흡착되는 간섭 물질을 세척하는 것이다. 폴리스티렌과 같은 플라스틱에 의한 단백질의 흡착은 보편적이므로 ELISA 분석 중에 비특이적 흡착을 최대한 피해야하며,이 비특이적 흡착 간섭 물질은 세척 중에 씻어 내야합니다. 세척액에 트윈을 첨가하면 세척 효과를 향상시킬 수 있습니다. 특히 마지막에 세척이 철저하지 않은 경우, 효소 접합체의 비특이적 흡착이 있으면, 블랭크 값이 상승 될 것이다. 또한, 간접 방법에서, 표본의 비특이적 IgG가 세척되지 않고 고체상에 흡착되면, 효소 표지 항체를 방해 할 수도 있습니다. ELISA 플레이트는 일반적으로 다음 방법에 의해 세척된다 : 1 반응 용액을 흡수; 2 플레이트를 세척 용액으로 채우고; 3, 2 분 동안 플레이트를 놓고 약간 흔들림; 4 액체를 구멍에 흡수 또는 쏟아 붓고이를 흡수지 상에 두 드린다. 세척 횟수는 일반적으로 3 내지 4 배, 때로는 5 내지 6 배이다. 플레이트 ELISA 자동 와셔도 사용할 수 있지만 기기의 실제 사용을 먼저 확인해야합니다. 와셔의 각 피펫도 해당 구멍의 바닥에 가깝게 배치해야합니다. 각 구멍의 동일한 세척 효과를 보장하기 위해. 5. 발색 및 비색 : 정량 측정에서 기질을 추가 한 후 반응 온도 및 시간은 규정에 따라 여전히 정확해야합니다. 그러나, 반응은 일반적으로 정성 분석에서 실온에서 수행 될 수있다. 인쇄물이 OPD 인 경우 빛과 떨어진 곳에 배치해야합니다. 반응 시간을 엄격하게 제어 할 필요는없고, 양성 대조군 및 음성 대조군의 착색에 따라 정지 용액을 적시에 첨가 할 수있다. 각 웰에 대해 동일한 반응 시간을 보장하기 위해, 정지 용액을 첨가하는 절차 및 속도는 기판을 첨가 할 때와 동일해야한다. 부정적인 반응과 같은 질적 결정은 가벼우 며 때로는 결과를 시각적으로 판단 할 수 있습니다. 플레이트 ELISA는 일반적으로 효소 라벨 판독기를 사용하여 지정된 파장에서 흡광도를 읽습니다. 자동 라벨 판독기는 사용 된 ELISA 플레이트의 웰과의 호환성 및 사용 전 결과의 반복성을 테스트해야합니다. 비색 측정시 먼저 증류수로 영점을 확인하고 기질 기공 (반응이없는 기공과 기질 만 추가)과 빈 웰 (전체 공정에 대해 표본 대신 식염수 또는 PBS로 측정 한 기공)을 읽습니다. 테스트의 시약 상태. 그 후, 블랭크 홀을 사용하여 영점을 교정하고 샘플 홀, 표준 홀 및 제어 홀의 흡광도를 읽을 수 있습니다. 증류수로 영점을 여전히 수정 한 경우 계산시 빈 구멍의 흡광도에서 위 구멍의 흡광도를 빼야합니다. 군중에게 적합하지 않음 부적절한 사람들 : 일반적으로 적합하지 않은 사람들은 없습니다. 부작용 및 위험 부작용이 없습니다.
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