킬로미크론

킬로 미크론은 인간 혈장에서 가장 큰 지단백질 입자이며 CM은 소장 흡수 부위에서 전신 순환계로 전달되는식이 TG의 대부분입니다. CM 청소 속도는 빠르고 반감기는 10 분이며, 보통 사람은 단식 후 12 시간 후에는이를 감지 할 수 없습니다. 혈청 지질 단백질 전기 영동 동안 시료는 신선해야하며 냉동 보관해서는 안된다는 점에 유의해야합니다. 기본 정보 전문가 분류 : 소화 검사 분류 : 혈액 검사 해당 성별 : 남성과 여성의 금식 적용 여부 : 금식 분석 결과 : 정상 이하 : 정상 값 : 아니요 정상 이상 : 부정적 : 정상입니다. 긍정적 : 고지 단백 혈증 타입 I, 고지 단백질 혈증 타입 V. 팁 : 검사 전에식이 요법이 가볍고 알코올 섭취가 금지되어 있습니다. 정상 값 부정적. 임상 적 의의 양성 고지 단백 혈증 타입 I, 고지 단백질 혈증 타입 V. 긍정적 인 결과는 질병 일 수 있습니다 : 고지 단백 혈증 I 형, 고지 단백질 혈증 V 형 예방책 1. Immunoturbidimetric 탁도 방법 : (1) 항혈청과 관련하여 : 탁도 측정법은 다른 방법보다 항혈청에 대한 요구 사항이 더 높습니다. 탁도 법은 바람직하게는 다 클론 항체이다. 항혈청은 항혈청이 없어야합니다. 일반 실험실에서는 불가능한 면역 순도, 크로마토 그래피 순도 및 전기 영동 순도를 달성하기 위해 인간 혈청에서 추출한 apoA-1에 세심한주의를 기울여야합니다. 항혈청 역가 (역가)는 16 이상이어야합니다. 현재 일부 가정용 상업용 시약에서 apoA-I 항혈청은 역가가 매우 낮으므로 키트를 구입할 때주의를 기울여야합니다. 구매하기 전에 안티 세라 품질을 확인한 경험이 없으면 적격 한 기기에 식별하도록 요청해야합니다. (2) 상위 방법 (혈청)의 표본은 수동 조작 (샘플 100 μl)을 위해 200 배 희석되며, 정밀 샘플러라면 20 배 (10 μl 사용) 희석 될 수 있습니다. 다른 실험실 (예 : 다른 유형의 자동화 기기)의 조건에 적응하기 위해서는 적절한 변형을 수행 할 때 항원 항체의 비율에주의를 기울여야하며, 반응 시스템에 항원 과잉이 없어야하고 선형 상한이 2.5g / L보다 낮아서는 안됩니다. 다시 말해, 항혈청의 양이 충분해야하며, 그렇지 않으면 시편에서 apoA-I가 높을 때 결과가 낮습니다. 현재, 일부 가정용 약물 키트는 항혈청 역가가 낮을뿐만 아니라 수술 중 표본의 용량이 너무 커서 (예 : 3 ~ 5μl), 항체가 불충분하며, 측정 결과가 부정확합니다. (3) 정확한 측정을 위해서는 apoA-I 및 B turbidimetric 측정 (종료점 방법)에서 교정 곡선 계산 결과를 작성해야합니다. 특정 범위 (낮은 샘플 용량) 농도 (X)는 기본적으로 탁도 (Y)와 선형이며, 선형 회귀는 Y 축에서 특정 절편을 계산하므로 (A 값 <0.1) 계산 결과의 편차는 단일 포인트 교정으로 계산됩니다. 더 크게 측정 된 결과는 높음 (높음 낮음, 낮음 높음) 수준을 정확하게 반영 할 수 없습니다. 단일 포인트 방법의 단순성 때문에 측정 정확도를 무시하지 마십시오. 자동 계측기의 유형에 관계없이 먼저 교정 곡선을 시도해야합니다. 기기 조건과 특정 조건에서 테스트를 반복하면 회귀선의 절편이 명확하지 않은 경우 단일 포인트 교정 방법을 사용할 수 있습니다. 시료량이 3 ~ 5μl 인 경우, 항혈청 량을 늘려도 농도와 탁도는 선형이 아니며 곡선을 선형으로 변환 한 후에 만 ​​계산할 수 있습니다. (4) 주요 간섭 요인은 혈청 자체의 탁도 (고지방 혈청 등)이며 초 원심 분리 또는 리파제 가수 분해와 같은 전처리 방법은 실용적이지 않습니다. 계면 활성제에 의한 탁도의 영향도 제한되므로, 분석에서 블랭크 튜브를 만들어야한다. 자동 분석에 사용되는 2 점 방법 외에도 시편 블랭크를 빼지 않고 단일 시약을 수동으로 사용하는 것은 실수입니다. 탁도 반응에 대한 매트릭스 효과의 영향을 줄이려면 고정 값 혈청을 교정기로 사용해야합니다. 또한 먼지 입자 및 탁한 접시 긁힘과 같은 간섭을 배제해야합니다. (5) 일부 상용 키트 (일부 수입 제품 포함)에는 부정확 한 교정 혈청 값이 있으며 이는 중요한 오류의 원인입니다. 2. 로켓 전기 영동 : (1) 항원 희석 인자의 선택 및 항혈청의 양이 명확해야하고 교정 곡선의 기울기가 적당하며 정렬 곡선이 적절해야합니다. 이 방법은 동시에 apoA-I 및 apoB를 측정하고, 두 안티 세라의 양은 둘의 피크 높이가 다르고 apoB 피크 높이가 1cm 이상이되도록 조정되어야한다. (2) 동등한 가격으로 테스트 한 다른 유형의 출처 (토끼 및 양)의 Antisera는 결과가 다릅니다. apoA-1 분석은 바람직하게는 토끼 항혈청이다. 토끼 혈청을 사용하면 피크 모양이 날카 로워지고 양 혈청에서 생성되는 피크가 두껍고 피크 팁이 둥글고 무딘 경우가 있으며 때로는 유령 이미지가 피크 앞에 나타납니다. 캘리브레이션 혈청에 대한 캘리브레이션 곡선의 기울기도 다릅니다. 그러나 어떤 항혈청을 사용하더라도 정량적 결과는 크게 다르지 않습니다. (3) 특정 조건에서 전기 영동, 다른 희석의 교정 혈청의 피크 높이는 크게 변하지 않으며 교정 곡선의 기울기는 기본적으로 동일합니다. 시편의 피크 높이가 교정 곡선 범위를 초과하면 시편 희석 계수를 조정하고 다시 테스트해야합니다. 보드 간 CV는 일반적으로 5 % 미만입니다. (4) 로켓 전기 영동 결과는 로켓 피크의 염색 또는 직접 육안 관찰로 볼 수 있습니다. 전자는 시편을 적게 사용하고 항혈청을 절약하지만 시편과 항혈청이 적절히 증가하면 얼룩이 생기지 않는 것이 더 편리합니다. 사용되는 아가 로스는 표준 전기 삼투압 또는 저압이어야합니다. 젤에 적절한 양의 덱스 트란 또는 폴리에틸렌 글리콜을 첨가하면 로켓 피크가 더 선명 해집니다. (5) 로켓 피크의 측정은 면적 또는 피크 높이를 계산할 수 있으며, 면적은 피크 높이에 피크 폭 (피크의 절반 높이 폭)을 곱한 값입니다. 측정 정확도는 바람직하게는 최대 0.1 mm이다. 기계 또는 전자 증폭 장비를 사용해야합니다. 표준 곡선의 범위에서의 피크 높이는 바람직하게는 1 내지 4 cm이다. (6)이 법은 적은 수의 표본 분석에 적용됩니다. apoAII, CI, CII, CIII, D, E 및 Lp (a) 측정에도 적합합니다. 검사 과정 1. Immunoturbidimetric 탁도 방법 : (1) 시편은 시간에 따라 분리 할 수있는 빠른 분리 혈청이어야하며, 1 주일 이내에 2-6 ° C의 냉장고에 보관하고 반년 동안 -20 ° C에 보관할 수 있습니다. (2) 전자동 분석기를 사용할 때, 항원 대 항체의 비율과 반응 시간은 기기 설계 변수에 따라 합리적으로 선택해야합니다. 또한 Beckman 탁도계 ICS 또는 Proteinarray 시스템과 같은 속도 산포 조도 측정 CM으로도 사용할 수 있습니다. (3) 수동 방법에 사용되는 기기 : 340nm 필터 (또는 스플리터)가 장착 된 정밀 광도계, 시료량은 0.5ml (항혈청 절약), 바람직하게는 플로우 컵 사용시 시료 희석이 가장 좋습니다. 샘플러가 수정되었습니다. (4) 시편 처리 : 혈청 샘플 및 품질 관리 혈청을 샘플 희석제로 1 : 200 희석 한 다음, 먼저 1:20 (5.0 μl 혈청 + 95 μl 희석제)으로 희석 한 다음 1:10으로 희석합니다 ( apoB의 측정을위한 과량의 1:20 혈청). 혼합 후 25 ~ 37 ° C에서 30 분간 방치하고 340nm의 파장에서 탁해졌으며, 결과는 U-UB의 A 값에 따라 표준 곡선으로 읽었다. 이 방법의 CV는 <5 %입니다. (5) 교정 곡선 : 수동 및 반자동 작업의 각 배치에 대해 교정 곡선이 필요하며 교정 혈청은 표본과 동일한 1 : 100, 1 : 200, 1 : 300 및 1 : 400의 4 가지 농도로 희석 될 수 있습니다. 작동, 고정 값에 따라 각 표준 튜브의 CM 농도를 계산하고, 기본적으로 직선이지만 Y 축에 특정 절편이있는 해당 A 값 (Y) (선형 회귀로 계산)으로 농도 (X)를 플로팅합니다. 따라서 단일 포인트 표준을 사용할 수 없습니다. 작업이 정확하면 농도와 A 값 사이의 상관 계수는 0.985보다 커야합니다. 고농도, 중농도 및 저농도에서 3 개의 보정 혈청이있는 경우 시료와 동일한 방식으로 작동 할 수 있으며 3 포인트 보정에 사용할 수 있으며 5 포인트 보정에도 사용할 수 있습니다 (즉, 중간 농도의 혈청 평등 혼합, 중간 농도 및 낮은 농도) 혈청의 농도를 동일한 양으로 혼합하여 다른 2 개의 보정 혈청이되었다). 이 방법의 선형 범위 : 0.4 ~ 2.5g / L. 2. 로켓 전기 영동 : (1) 붓는 접시 : 접시 당 10g / L 아가 로스 10ml, 끓는 물 목욕에서 녹이고, 잘 섞고, 50 ~ 55 ° C로 차가울 때 50μl의 CM antiserum과 apoB antiserum 8μl를 첨가하십시오 (양은 antiserum titer에 따라 다름) ), 물 플랫폼의 유리판 사전 설정을 신속하게 혼합하고 부어 식힌 다음 4 ° C에 놓고 20 분 후 구멍을 뚫고 구멍을 판의 음극 끝에 놓고 구멍 직경은 3mm이며 구멍 간격은 5mm 이상이며 구멍 용량은 5 μl입니다. 전기 영동 탱크에 플레이트를 놓고 필터 페이퍼로 브리지하십시오. (2) 항원의 희석 : 캘리브레이션 혈청을 0.15 mol / L NaCl 용액으로 1 : 100, 1 : 150, 1 : 200, 1 : 300, 및 1 : 400 (캘리브레이션 곡선 용)으로 희석하였고, 혈청 샘플은 1 : 200으로 희석하여 냉장고를 4 ° C에서 3 일 이상 보관하십시오. (3) 로딩 : 5 μl (정확한)의 희석 된 혈청 및 시편을 저 전류 상태 (10 mA / 플레이트)에서 취하여 아가 로스 겔 샘플 웰에 첨가 하였다. 각 보드는 일련의 표준을 수행해야합니다. (4) 파워 온 : 아가 로스를 15 ° C로 유지하기 위해 흐르는 물로 냉각하면서 일정한 흐름 24 mA / 플레이트, 단자 전압 6 ~ 8V / cm, 전기 영동 3 ~ 4h. (5) 탈 단백질 화 및 건조 필름 : 전기 영동 후의 아가 로스 플레이트를 0.15mol / L NaCl에 30 분 동안 침지시키고, 필름을 폴리 에스테르 필름 상에 놓고, 다층 여과지 하에서 가벼운 압력으로 건조시켰다. 접착제의 수분은 여과지, 필름 및 폴리 에스테르 필름으로 자연 건조되거나 열풍 송풍기로 건조됩니다. 건조 후 필름은 여과지 및 폴리 에스테르 필름에서 자연적으로 분리됩니다. (6) 염색 : 아가 로스 필름을 염색 용액에 20 내지 30 분 동안 침지시켰다. (7) 탈색 : 로켓 피크가 깨끗하고 배경이 기본적으로 무색이 될 때까지 염색 된 필름을 탈색 용액으로 담그십시오. 그것은 물에 두 조각의 셀로판에 고정 될 수 있으며 건조 후 오랫동안 보관할 수 있습니다. 흐르는 물에 담가 배경을 제거 할 수도 있습니다. 참고 : 1 항원의 희석 비와 항혈청 량은 로켓 피크가 깨끗하고 교정 곡선의 기울기가 적당하며 선이 적합하도록 선택해야합니다. 이 방법은 동시에 apoA-I 및 apoB를 측정하고, 두 안티 세라의 양은 둘의 피크 높이가 다르고 apoB 피크 높이가 1cm 이상이되도록 조정되어야한다. 2 다른 종류의 항혈청 (예 : 토끼 및 양)은 동등한 가격으로 테스트되며 결과는 다릅니다. apoA-1 분석은 바람직하게는 토끼 항혈청이다. 토끼 혈청을 사용하면 피크 모양이 날카 로워지고 양 혈청에서 생성되는 피크가 두껍고 피크 팁이 둥글고 무딘 경우가 있으며 때로는 유령 이미지가 피크 앞에 나타납니다. 캘리브레이션 혈청에 대한 캘리브레이션 곡선의 기울기도 다릅니다. 그러나 어떤 항혈청을 사용하더라도 정량적 결과는 크게 다르지 않습니다. 3 특정 조건에서 전기 영동, 다른 희석의 보정 혈청의 피크 높이는 크게 변하지 않으며 보정 곡선의 기울기는 기본적으로 동일합니다. 시편의 피크 높이가 교정 곡선 범위를 초과하면 시편 희석 계수를 조정하고 다시 테스트해야합니다. 보드 간 CV는 일반적으로 5 % 미만입니다. 4 로켓 전기 영동 결과는 로켓 피크를 염색하거나 직접 육안으로 관찰 할 수 있습니다. 전자는 시편을 적게 사용하고 항혈청을 절약하지만 시편과 항혈청이 적절히 증가하면 얼룩이 생기지 않는 것이 더 편리합니다. 사용 된 아가 로스는 표준 전기 삼투압 또는 저압이어야합니다. 5 로켓 피크의 측정은 면적 또는 피크 높이를 계산할 수 있으며, 면적은 피크 높이에 피크 너비 (피크의 절반 높이 너비)를 곱한 값입니다. 측정 정확도는 바람직하게는 최대 0.1 mm이다. 기계 또는 전자 증폭 장비를 사용해야합니다. 표준 곡선의 범위에서의 피크 높이는 바람직하게는 1 내지 4 cm이다. 6이 방법은 소량의 시편 분석에 적용 할 수 있습니다. apoAII, CI, CII, CIII, D, E 및 Lp (a) 측정에도 적합합니다. 군중에게 적합하지 않음 아니 부작용 및 위험 아니

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