Bリンパ球表面マーカー

体液性免疫機能検査は、検査室が個々の体液性免疫機能を評価する検査の一種です。 体液性免疫機能の検出は、Bリンパ球検出、Ig検出、抗体産生機能の検出など、体液性免疫の基本プロセスに基づいています。 基本情報 専門家分類：成長および発達チェック分類：免疫学的検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食をしない ヒント：その日に標本が観察できない場合、細胞は蛍光抗体保存液に懸濁され、4℃で保存され、翌日カウントされます。 正常値 平均IgMは11.2±6.0％、平均IgGは7.5±3.3％でした。 臨床的意義 B細胞の数の減少は体液性免疫不全に関連しており、B細胞の数の増加はB細胞の悪性増殖に関連しています。 注意事項 （1）蛍光抗体試薬中に凝集したIgGが存在し、凝集したIgGがB細胞表面のFc受容体に偽陽性で結合する可能性があるため、IgGの凝集を避けるために、次のことに注意する必要があります。 1過剰なF / Pモル比の蛍光抗体は使用できません。一般に1〜3が好ましいです。 2低濃度のタンパク質を含む蛍光抗体は、低温では不安定であり、2 mg / mlより低くするべきではありません。 3低温で保存された蛍光抗体は凍結融解を繰り返してはならず、凝集体を除去するために使用前に150,000 r / minで30分間遠心分離してください。 （2）生きたリンパ球を免疫蛍光染色に使用する場合、NaN3をすべての試薬（標識抗体、ハンク溶液など）に加えて、細胞膜の流動性を制限します。 そうしないと、キャップのような蛍光と貪食が発生し、実際の蛍光細胞の数が減少します。 （3）抗IgG蛍光抗体で染色すると、サンプルに含まれる抗原抗体（IgG型）免疫複合体は、B細胞表面のFc受容体に結合し、蛍光陽性です。 このため、蛍光標識された抗F（ab）2抗体で染色して、Fc受容体が染色されないようにすることが提案されています。 近年、B細胞表面特異的分子（CD19、CD20など）に対するモノクローナル抗体の出現により、CD19またはCD20に対するフルオレセイン標識モノクローナル抗体を使用して末梢血リンパ球と直接反応する傾向がありました。 CD19およびCD20のモノクローナル抗体（一次抗体）は、まずリンパ球と反応し、次に蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーでカウントされて末梢血をカウントするフルオレセイン標識ウサギまたはヤギ抗マウスIgG（二次抗体）と結合されます。 Bリンパ球。 検査プロセス （1）ヘパリン抗凝固剤2mlを取り、同量のハンク液を加えてよく混ぜ、層状化した溶液上で層を2000r / min繰り返し、20分間遠心します。 リンパ球層を取り出し、ハンク溶液を加え、3回洗浄し、1200 r / min、10分間遠心分離し、リンパ球濃度を1×107 / mlに調整し、0.1 mlを2本のチューブに分注した。 （2）リンパ球懸濁液をハンクス液でもう一度洗浄し、上清を捨て、フィルター紙を使用してチューブの内壁から残っている液体を取り除き、ウサギ抗ヒトIgGおよび抗ヒトIgM蛍光抗体（約0.08 ml）を2滴加えます。静かに振とうした後、37℃のインキュベーターを30分間置きます。 （3）インキュベーターから取り出し、ハンク溶液で2回洗浄し、1000r / minで10分間遠心分離し、すべての上清を慎重に吸収し、チューブの底に50 mlのPBS緩衝グリセリンを1滴加え、混合し、1滴加えて加えるスライド上で、カバースリップを覆い、蛍光顕微鏡で観察します。 群衆に適していない タブーはありません。 副作用とリスク 合併症や危険はありません。

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