リンパ球毒性試験

特定のエフェクターTリンパ球をin vitroで標的細胞と接触させると、リンパ球毒性と呼ばれる標的細胞を破壊および溶解する性質を示すことがあります。 標的細胞は、腫瘍細胞または他の組織細胞であり得る。 リンパ球が標的細胞を殺す方法は、リンホカインの直接的な殺傷または産生によって標的細胞を破壊することができます。 これはリンパ球毒性試験です。 CTL、NK、LAKなどの一部のリンパ球は、標的細胞に直接殺傷効果があり、検出するエフェクター細胞の性質に応じて、腫瘍細胞、移植ドナー細胞などの対応する標的細胞を選択できます。 この実験は、腫瘍免疫、移植拒絶、ウイルス感染などの研究に使用できます。 方法には、クロム放出法、乳酸脱水素酵素放出法、アポトーシス細胞アッセイが含まれます。 基本情報 専門家分類：腫瘍学検査分類：免疫検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 分析結果： 通常以下： 通常値： いや 通常以上： マイナス： 普通。 ポジティブ： 現在、関連データはありません。 ヒント：通常の考え方を維持します。 正常値 形態学的検査方法は、試験群と対照群の間で比較された、P <0.05。 125Iまたは51CrメソッドP> 0.05。 臨床的意義 異常な結果：この検査は、in vitroで腫瘍患者の細胞性免疫を測定するための指標として使用できます。また、免疫細胞が腫瘍細胞を殺す能力を測定することにより、腫瘍患者の予後を決定できます;また、リンパ球の機能的亜集団を特定することもできます。 検査対象の集団：リンパ球毒性交差試験は補体依存性細胞毒性試験（CDC）とも呼ばれます。 臓器移植レシピエントにドナーがいるかどうか、またはレシピエントに対するドナーのHLA抗体があるかどうかを確認し、臓器移植の前にCDCテストを実行する必要があります。 注意事項 （1）被験者のリンパ球が腫瘍細胞を攻撃する能力を測定する際に、被験者の腫瘍細胞とリンパ球を実験群に加え、腫瘍標的細胞と培地を対照群に加えた。 腫瘍抗原や免疫原、治療薬などの他のサンプルが細胞性免疫に関与している場合、3つ目のグループを追加する必要があります。このテストグループでは、まずリンパ球をテストするサンプルと反応させ、洗浄してから観察します。腫瘍標的細胞に対する感作リンパ球の細胞毒性効果。 この時点で、最初の2つのグループがコントロールグループになりました。 （2）標的細胞とリンパ球の生存率は、一般的に90％を超える最適な状態にある必要があります。 （3）培養液に添加された子牛血清は、最初に毒性をテストする必要があります。 （4）接種した標的細胞とリンパ球の数は正確でなければなりません。 （5）実験グループと対照グループは、エラーを減らすために同じボードに配置する必要があります。 （6）培養液のpHは6.8〜7.2が最も好ましい。 検査プロセス （1）標的細胞の接種：付着して成長できる腫瘍細胞を選択し、ハンク溶液で洗浄し、2.5 g / Lトリプシンで2〜3分間消化し、トリプシン溶液を注ぎ（細胞はまだボトルの壁に付着している）、ハンクを使用します。細胞を軽く3回洗浄し、ハンク溶液を注いだ。 付着細胞を、10％から20％の子牛血清を含むRPMI1640溶液で洗浄し、細胞ペレットを100メッシュフィルターで濾過して除去し、1×10 6 / mlの単一腫瘍細胞懸濁液を調製し、細胞懸濁液をスポイトでピペットで採取した。 40ウェル培養プレートにドロップし、ウェルあたり1ドロップ（約100〜150細胞）、プレートを5％CO2インキュベーターに37°Cで20時間配置します。 培養プレートを取り出し、培養液を除去しました。ライト染色後、10ウェルあたりの付着腫瘍細胞の平均数をカウントしました.2つのグループの差が1/3を超える場合、誤差は大きすぎて使用できず、誤差は大きくありませんでした。培養プレートは正式にテストできます。 （2）リンパ球の分離：ヘパリン抗凝固薬3 mlを被験者に採取し、リンパ球をスクロース-ジアゼパム浸出液で分離し、ハンク溶液で3回洗浄し、RPMI1640溶液（2〜3）と混合します）×105 / ml細胞懸濁液。 （3）細胞毒性試験：リンパ球と標的細胞を200：1の比率で混合し、（2〜3）×104リンパ球（0.1 ml容量）を各ウェルに加え、約20％の子牛血清をウェルごとに加えます。 0.1 mlのRPMI 1640溶液を37°C 5％CO 2インキュベーターに40時間入れました。 培養プレートを取り出し、培養液を除去し、ライト染色後、プレートの底に残っている標的細胞の数を顕微鏡で数えた。 群衆に適していない タブーはありません。 副作用とリスク 関連する合併症や危険性はありません。

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