喀痰中の分泌型IgE

SIgEの部位は、SIgAの部位に類似しており、気道の固有層の形質細胞によっても産生されます。粘膜組織および外分泌液に分布しています。これらの部位は、アレルゲンの侵入部位およびアレルギー反応の部位です。 IgEは単量体、8S、19×104 kuであり、その重鎖はγ鎖よりも長い。 細胞（マスト細胞、好塩基球など）に結合し、特定の条件下で細胞内​​生理活性物質の放出をトリガーできるもう1つの機能領域（CH4）したがって、IgEはI型アレルギーを引き起こす主要な抗体です。 。 基本情報 専門家分類：呼吸器検査分類：examination検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 注意：主要な試薬成分が不適切に準備されているか、不適切に保管されている場合、それらは簡単に劣化して不活性化されます。 正常値 0.1から9 mg / L。 臨床的意義 増加：IgEは単量体、8S、19×104kuであり、その重鎖はγ鎖よりも長い。 細胞（マスト細胞、好塩基球など）に結合し、特定の条件下で細胞内​​生理活性物質の放出をトリガーできるもう1つの機能領域（CH4）したがって、IgEはI型アレルギーを引き起こす主要な抗体です。 。 気管支喘息および過敏性肺炎の患者では、putのSIgE含有量が増加する可能性があります。 高い結果は病気かもしれません： 気管支喘息、アレルギー性肺炎 抗原、抗体、酵素結合体、基質などのELISAの主要な試薬成分は、適切に準備されていない場合や不適切に保管されている場合、容易に分解および不活性化されます。 ELISAには多くのステップがあり、操作が標準化されていない場合、正確な結果を得るのは困難です。 したがって、テストの有効性を確保するには、各テストで品質管理を実行する必要があります。 優れたキットに含まれる陽性および陰性コントロールは、一般的に試験の品質管理として使用でき、指示に従って、得られた吸光度値から試験の有効性を判断できます。 臨床試験で最も一般的に使用されるHBsAgテストを例にとると、キットの陰性対照はHBsAg陰性ヒト血清であり、陽性対照はHBsAg含有量を示す必要があります（例：9±2 ng / ml）。 テストのバッチごとに、3つのネガティブコントロールと2つのポジティブコントロールを同時に作成する必要があります。 ネガティブコントロールアッセイによって得られる吸光度値は特定の値（たとえば、0.100）未満である必要があり、ポジティブコントロールの吸光度からネガティブコントロールの吸光度を引いた平均値は、特定の値（たとえば、0.200）より大きい必要があります。 これらの値は、指定されたアッセイ条件下でのキットの特定の実験値です。 したがって、テスト結果が要件を満たしている場合は、使用する試薬の有効性と操作の正確さの両方を示しており、この場合にのみバッチテストが有効です。 キットに含まれるポジティブコントロールとネガティブコントロールの一部は、品質管理の要件、または比色計などの実験室の測定条件、およびキットの説明の違いを満たしていないため、実際の状況に応じて適切な品質を使用する必要があります。実験から得られた実験室の管理と品質管理値。 商品の品質管理血清は高価です。 一般に、ELISA品質管理製品の定性的測定は自分で準備できます。 HBsAgテストはまだ例として取り上げられています。 ネガティブコントロールは、高品質の試薬でHBsAgネガティブな献血者から採取できます。 陽性対照は、適切な量のHBsAg陽性血清を陰性対照血清に添加し、混合血清を参照標準または定量対照と比較してHBsAg含有量を決定することにより調製できます。 次に、適切な希釈を行って、目的の濃度のHBsAg陽性血清を取得し、ゲンタマイシンやサリチル酸などの抗菌防腐剤を適量加えて、低温で保存します。 検査プロセス ELISAは、多反応、多試薬、多段階の試験方法であり、要件に応じて慎重かつ慎重に操作する必要があります。そうしないと、正確な結果が得られません。 異なる項目を検出するために使用されるELISA手順はわずかに異なりますが、ロード、保持、洗浄、および比色などのステップが含まれます。 1.試薬の準備：キットの指示に従って、テストに必要な試薬を希釈または準備します。 洗浄を含む、ELISAで使用される蒸留水または脱イオン水は、新鮮で高品質でなければなりません。 内蔵バッファーはpHメーターで測定する必要があります。 冷蔵庫から取り出した試験試薬の温度は、室温に達してから使用する必要があります。 HRPをマーカーとして使用したテストでは、金属で汚染された容器は使用できません。 2.ローディング：必要に応じて、適切なELISAプレートを準備します。 血清（皮張り液）検体は、新鮮な状態で収集するか、冷蔵庫に適切に保管する必要があります。 保存剤としてアジ化ナトリウムを含む検体は、HRP標識のワンステップELISAには使用できません。 サンプルを追加するときは、穴の底に試験片を追加し、穴の壁の上部に追加しないでください。また、飛散しないように注意してください。気泡が発生しないようにしてください。 定量測定で追加されるサンプル量の精度は、定量要件を満たす必要があります。 定性測定では、サンプルの量の精度が強調されない場合があります。たとえば、滴として規定されています。 この時点で、同じ直径のスポイトを使用し、各ドロップの体積が基本的に同じになるように正しいローディング位置を維持する必要があります。 酵素コンジュゲートの追加と基質の追加の操作と要件は、サンプルの追加と同じです。 3.絶縁：一般に、ELISAには2つの抗原抗体反応があります。つまり、サンプルの添加後と組み合わせの添加後です。 このとき、反応の温度と時間は必要に応じて正確でなければなりません。 断熱容器は水浴であることが好ましく、ELISAプレートの底部を水に入れて温度のバランスをすばやくとる必要があります。 各ELISAプレートを積み重ねないでください。 蒸発を防ぐため、ボードを覆う必要があります。 プレートは、底面に湿ったガーゼが付いた湿った箱に平らに置くこともできます。 湿った箱は、指定された温度にあらかじめ温めておく必要があります（たとえば、インキュベーターの断熱がより重要です）。 4、洗浄：ELISAプロセスでの洗浄は反応ステップではありませんが、成功への鍵を閉じることにしました。 洗浄の目的は、固相抗原または抗体に結合した反応溶液中の物質、および反応中に固相担体に非特異的に吸着される干渉物質を洗い流すことです。 ポリスチレンなどのプラスチックによるタンパク質の吸着は普遍的であるため、ELISAアッセイでは非特異的吸着をできるだけ避ける必要があり、この非特異的吸着干渉物質は洗浄中に洗い流す必要があります。 Tweenを洗浄液に加えると、洗浄効果が向上します。 特に最後に洗浄が徹底的でない場合、酵素コンジュゲートの非特異的吸着がある場合、ブランク値が高くなります。 また、間接法では、検体中の非特異的IgGが洗浄されずに固相に吸着されると、酵素標識抗体にも干渉します。 ELISAプレートは、一般的に次の方法で洗浄されます：1反応溶液を吸収します; 2洗浄溶液でプレートを満たします; 3 2分間置き、少し振とうします; 4穴に液体を吸収または注ぎ、吸収紙に軽くたたきます。 洗浄の回数は、一般に3〜4回、時には5〜6回です。 プレートELISA自動洗浄機も使用できますが、最初に機器の実際の使用を確認する必要があります。 ワッシャーの各ピペットも、対応する穴の底近くに配置する必要があります。 各穴の同じ洗浄効果を確保するため。 5.発色と比色分析：定量測定で基質を添加した後の反応の温度と時間は、規則に従って正確である必要があります。 ただし、反応は一般に定性アッセイで室温で実行できます。 素材がOPDの場合、光から離して配置する必要があります。 反応時間を厳密に制御する必要はなく、ポジティブコントロールとネガティブコントロールの着色に応じて停止溶液を適時に追加することもできます。 各ウェルで同じ反応時間を確保するために、停止液を加える手順と速度は、基質を加えるときと同じでなければなりません。 否定的な反応などの定性的判断は軽く、結果は視覚的に判断できる場合もあります。 プレートELISAは一般に、酵素ラベルリーダーを使用して、指定された波長の吸光度を読み取ります。 自動ラベルリーダーは、使用するELISAプレートのウェルとの適合性と、使用前の結果の再現性についてテストする必要があります。 比色分析の場合、最初に蒸留水でゼロ点を確認し、基質の細孔（反応のない細孔と基質のみを追加）とブランクウェル（試料全体ではなく生理食塩水またはPBSで測定された細孔）を読み取って、この時間を記録します。テストの試薬ステータス。 その後、空の穴を使用してゼロ点を較正し、サンプル穴、標準穴、およびコントロール穴の吸光度を読み取ることができます。 ゼロ点がまだ蒸留水で補正されている場合、上記の穴の吸光度を計算の空白の穴の吸光度から差し引く必要があります。 群衆に適していない 不適切な人：一般的に、適切でない人はいません。 副作用とリスク 副作用なし。

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