アポリポプロテインAⅡ

アポリポタンパク質は、さまざまなリポタンパク質といくつかの異なる特定のアポリポタンパク質を含む血漿リポタンパク質画分です。 これまでに発見された20種類以上のアポリポタンパク質があります。 それらのうち、主にaPOA1、AII、B-100、B48、CI、CII、CIII、D、Eなどがある。 基本情報 専門家分類：心血管検査分類：生化学検査 該当する性別：男性と女性が断食を適用するかどうか：断食 ヒント：採血前の最後の食事では、高脂肪の食べ物や飲酒を避け、12時間絶食させ、前腕の静脈血を抽出します。 正常値 250〜520mg / L 臨床的意義 冠状動脈性心臓病、糖尿病、ネフローゼ症候群、遺伝性ApoA-I欠乏症（タンジール病）、家族性低アルファリポタンパク血症、魚眼病、重度の栄養失調、活動性肝炎、肝機能の低下。 低い結果は病気かもしれません： 冠状動脈性心臓病、糖尿病の考察 （1）免疫比濁法： 1抗血清について：比濁法は、他の方法よりも抗血清の要件が高い。 比濁法は、好ましくはポリクローナル抗体である。 抗血清には抗血清が含まれていてはなりません。 一般的な研究室では不可能な免疫純度、クロマトグラフィー純度、電気泳動純度を達成するために、ヒト血清から抽出されたapoA-IIに大きな注意を払う必要があります。 抗血清力価（力価）は16以上でなければなりません。 現在、国内の市販試薬の中には、apoA-II抗血清の力価が非常に低いため、キットを購入する際に注意を払う必要があります。 購入前に抗血清の品質を識別した経験がない場合は、資格のあるユニットに識別を依頼してください。 2上部標準試料（血清）は、手動操作のために200倍に希釈され（サンプル100μl）、精密サンプラーがある場合は20倍に希釈できます（10μlを使用）。 異なる検査室（異なるタイプの自動化機器など）の条件に適応するために、適切な修飾を行う際に抗原抗体の割合に注意を払う必要があります。反応系に過剰な抗原があってはならず、直線の上限は2.5g / Lを下回らないように注意する必要があります。 言い換えれば、抗血清の量は十分でなければならず、そうでなければ、検体中のapoA-Iが高い場合、結果は低い。 現在、一部の家庭用医薬品キットは抗血清力価が低いだけでなく、手術中の検体の投与量が大きすぎ（3〜5μlなど）、抗体が明らかに不十分であり、測定結果が不可避的に不正確です。 3正確な測定を行うには、検量線の計算結果をapoA-IIおよびB濁度測定（エンドポイント法）で作成する必要があります。 特定の範囲（低サンプル投与量）濃度（X）は基本的に濁度（Y）に対して線形であり、線形回帰はY軸上の特定の切片（A値<0.1）を計算するため、計算結果の偏差はシングルポイントキャリブレーションによって計算されます。大きくすると、測定結果は高レベル（高低、低高）を正確に反映できません。 シングルポイント法は単純であるため、測定の精度を無視しないでください。 自動機器の種類に関係なく、最初に検量線を試す必要があります。 機器の条件と特定の条件でテストが繰り返される場合、回帰直線の切片は明らかではないため、単一点のキャリブレーション方法を使用できます。 サンプルの量が3〜5μlの場合、抗血清の量を増やしても、濃度と濁度は線形ではなく、曲線が線形に変換された後にのみ計算できます。 4主な干渉因子は血清自体の濁度（高脂肪血清など）であり、超遠心分離やリパーゼ加水分解などの前処理方法は実用的ではありません。 界面活性剤による濁度の影響も制限されるため、アッセイではブランクチューブを作成する必要があります。 自動分析で使用される2点法に加えて、検体ブランクを差し引くことなく単一の試薬を手動で使用するのは間違いです。 濁度応答に対するマトリックス効果の影響を減らすために、固定値の血清をキャリブレーターとして使用する必要があります。 さらに、ほこりの粒子や濁った皿の傷などの干渉を排除する必要があります。 5不正確なキャリブレーション血清値を持ついくつかの市販キット（一部の輸入製品を含む）は、エラーの重要な原因です。 （2）ロケット電気泳動法： 1抗原の希釈率と抗血清の量は、ロケットのピークがはっきりし、検量線の勾配が中程度で、線が適切になるように選択する必要があります。 この方法では、apoA-IIとapoBを同時に測定し、2つの抗血清の量を調整して、2つのピークの高さが異なり、apoBのピークの高さが1 cm以上になるようにします。 2異なる種類の抗血清（ウサギや羊など）は同等の価格でテストされ、結果は異なります。 アポＡ−Ｉアッセイは、好ましくはウサギ抗血清である。 ウサギの血清を使用すると、ピークの形状がシャープになり、ヒツジの血清によって生成されるピークが厚くなり、ピークの先端が丸く鈍くなり、ピークの前にゴースト画像が現れることがあります。 較正血清の較正曲線の傾きも異なります。 ただし、どのような抗血清を使用しても、定量的な結果に大きな違いはありません。 3特定の条件下での電気泳動では、さまざまな希釈のキャリブレーション血清のピーク高さは大幅に変化せず、キャリブレーション曲線の勾配は基本的に同じです。 試料のピーク高さが検量線範囲を超える場合、試料希釈係数を調整して再テストする必要があります。 ボード間CVは通常5％未満です。 4ロケット電気泳動の結果は、染色またはロケットピークの直接的な目視観察によって観察できます。 前者は使用する検体が少なく、抗血清を節約しますが、検体と抗血清を適切に増やした場合、染色しない方が便利です。 使用するアガロースは、標準的な電気浸透圧または低張である必要があり、適切な量のデキストランまたはポリエチレングリコールをゲルに加えると、ロケットのピークがより明確になります。 5ロケットピークの測定では、面積またはピークの高さを計算できます。面積は、ピークの高さをピークの幅（ピークの半分の高さでの幅）で乗算したものです。 測定精度は0.1mmまでが望ましい。 機械的または電子的な増幅装置を使用する必要があります。 標準曲線の範囲内のピーク高さは、好ましくは1〜4cmである。 6この方法は、少量の検体の分析に適用できます。 apoAII、CI、CII、CIII、D、E、およびLp（a）の測定にも適しています。 検査プロセス ロケット電気泳動： 1枚の注ぐプレート：10g / Lアガロース10ml /プレート、沸騰水浴で溶かし、よく混ぜ、50〜55°Cに冷えたら50μlのapoA-II抗血清と50μlのapoB抗血清を加える（量は抗血清力価に依存する） ）、水プラットフォームに事前に設定されたガラスプレートにすばやく混ぜて注ぎ、冷却してから4°Cに置き、20分後にパンチ穴を開けます。穴はプレートのカソード端にあり、穴の直径は3 mm、穴の間隔は少なくとも5 mm、穴の容量は5μlです。 プレートを電気泳動タンクに入れ、ろ紙でブリッジします。 2希釈抗原：キャリブレーション血清を0.15mol / L NaCl溶液で1：100、1：150、1：200、1：300、1：400（検量線用）に希釈し、血清サンプルを1：200に希釈しました。冷蔵庫を4°Cで3日間以内に置きます。 3ローディング：低電流状態（10 mA /プレート）で、固定血清と検体を希釈して5μl（正確）を吸収させ、アガロースゲルサンプルに添加します。 各ボードは一連の標準を実行する必要があります。 4電源：定常流24mA /ボード、端子電圧6〜8V / cm、アガロース15°Cを維持するために流水で冷却、電気泳動3〜4時間。 5除タンパクタンパク質と乾燥フィルム：電気泳動後のアガロースプレートを0.15mol / L NaClに30分間浸漬し、フィルムをポリエステルフィルム上に置き、接着剤を穏やかな圧力で多層フィルター紙に吸収させました。湿らせてから、ろ紙、フィルム、ポリエステルフィルムを一緒に乾燥させるか、熱風機で乾燥させますが、乾燥後、ろ紙とポリエステルフィルムから自然に分離します。 ６染色：アガロースフィルムを染色溶液に20〜30分間浸した。 7脱色：ロケットのピークが透明になり、背景が基本的に無色になるまで、脱色溶液で染めたフィルムを浸します。 水中の2つのセロファンで固定でき、乾燥後も長期間保存できます。 また、流水に浸して背景を除去することもできます。 群衆に適していない 一般的に人混みはありません。 副作用とリスク 1.感染：血液サンプルを採取するときは無菌操作に注意し、局所感染を避けるために水と液体の汚染を避けるために、採血後に出血を止めます。 2、出血：血液が完全な圧縮時間、特に凝固障害、出血傾向を与えられた後、局所的な皮下へのにじみ、あざ、腫れを避けます。

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