ベータラクタマーゼ
β-ラクタマーゼとは、生体分子のβ-ラクタム環のアミド結合の加水分解を触媒することができる不活性化酵素を指す。 β-ラクタマーゼの細菌産生は、β-ラクタム抗生物質に対する細菌耐性の主なメカニズムです。 ペニシリン、セファロスポリン、非定型β-ラクタムなどを含むβ-ラクタマーゼ抗生物質は、最も広く使用され、最も広く研究され、最も広く使用されている薬物です。 基本情報 専門家分類:感染症検査と分類:生化学検査 該当する性別:男性と女性が断食を適用するかどうか:断食をしない ヒント:全身の栄養状態に応じて、食事には牛乳、卵、果物、豆乳などが与えられます。 正常値 体内の植物相の種類と割合は正常であり、人体は動的なバランスにあります。 臨床的意義 細菌耐性のメカニズム: 1.不活性化酵素-主にベータラクタマーゼ(200種類以上)。抗生物質を無効にします。 2、ターゲットの変更-抗生物質のターゲットが変更されるため、抗生物質の役割が減少します。 3、細菌膜の透過性の変化-抗生物質は、ターゲットに到達するために細菌を入力することはできません。 院内菌株(腸内細菌科、黄色ブドウ球菌など)から院外菌株(肺炎連鎖球菌、化膿連鎖球菌、Ne菌など)への細菌耐性の発生、単一薬剤に対する耐性この薬剤は、黄色ブドウ球菌のペニシリン耐性など、多剤耐性に発展します; ESBL株は、一般的に使用されるさまざまな抗生物質に耐性があります。 異常な結果腸内細菌科、黄色ブドウ球菌、肺炎連鎖球菌、化膿連鎖球菌、Ne菌などの感染症ですが、抗生物質の使用は効果的ではないか、効果が明らかではなく、細菌は薬剤耐性を生じます。 検査を必要とする人々には、上記の状態の患者がいます。 注意事項 不適切な群衆:いいえ。 検査前の禁止:通常の食習慣に注意を払い、個人衛生に注意を払ってください。 検査の要件:医師と積極的に協力してください。 検査プロセス β-ラクタマーゼの検出 臨床検体では、黄色ブドウ球菌、インフルエンザ菌、go菌、腸球菌のいくつかの株がペニシリンとアンピシリンに耐性があることが最近発見されました。 上記の株はβ-ラクタマーゼを産生するため、前述の抗生物質は加水分解されます。 酵素の検出には、次の方法が使用されます。 1.微生物活動の消失方法 この方法は、ペニシリンに非常に敏感な枯草菌の指標株です。試験する株がβ-ラクタマーゼを産生し、ペニシリンを破壊する場合、線の両側に枯草菌の成長があり、そうでなければ指標はまだ非常に大きいです。抗菌リング。 2、澱粉-ヨウ素の測定 ベータラクタマーゼはベータラクタムリングを破壊し、ヨウ素は開いたベータラクタムリングと結合して、青色の澱粉-ヨウ素複合体を無色に変換します。 方法:ペニシリン6000μg/ mlの懸濁液をpH 6.0のリン酸緩衝液で調製しました.0.1 mlの溶液を微量希釈プレートのウェルに入れました。試験株のいくつかのコロニーを選択して懸濁し、30分間振盪し、室温で1時間放置しました。澱粉溶液2滴、ヨウ素溶液1滴を加え、混ぜてすぐに色の変化を観察します陽性者がヨウ素溶液を加えると、10分以内に青色が消えるなど、すぐに青色になります。アミダーゼ。 3.酸の測定 ペニシリンはβ-エンドーゼによりペニシリン酸に加水分解され、pH値は6.8未満に低下し、フェノールレッドインジケータにより、赤色(紫色)色から(原液:クエン酸緩衝液pH 8.5)→黄色(pH 6.8以下)。 4、セファロスポリンチオフェン発色反応 ニトロセフィンのβ-ラクタム環はβ-ラクタマーゼによって開かれ、マトリックスは黄色から赤色に変化します。 液体法:10 mgのセファニトロチオフェンを1 mlのジメチルスルホキシドに溶解した後、0.1 mol / L PBS(pH 7.0)で1:20に希釈し、最終的に濃度は500μg/ m1で、溶液は黄色または淡いオレンジ色でした。数週間4〜10°Cで保管します。 マイクロ希釈プレートのウェルまたは小さな試験管に0.05mlの溶液を入れて、試験のコロニーを選び、濃い懸濁液を作り、凹穴のマトリックス液と混合し、セファロスポリンニトロチオフェンを黄色から室温で室温で10〜30分間変更します。赤は正で、色がはっきりしない場合は、観察を6時間延長できます。 Haemophilus influenzaeおよびNeisseria gonorrhoeaeによるβ-ラクタマーゼの検出に関する紙法の結果は正確であると報告されていますが、一部の株では、少量のβ-ラクタマーゼが菌細胞などの細菌細胞にしっかりと結合しています液体法によるブドウ球菌など。 品質管理は、上記の検出方法のいずれかに適用されます。 群衆に適していない 通常、タブーはありません。 副作用とリスク 通常、合併症や害はありません。
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