Metodo perossidasi di rafano-anti-rafano

Le caratteristiche del complesso PAP sono correlate al metodo di preparazione del reagente. La terapia ormonale sostitutiva viene inizialmente utilizzata per immunizzare gli animali per produrre anticorpi anti-HRP ad alto titolo e altamente specifici, quindi la HRP viene utilizzata per legarli, poiché il complesso anti-HRP HRP preparato in vitro è diverso dalle altre reazioni antigene-anticorpo . Quando l'antigene è leggermente in eccesso, tutti gli anticorpi anti-HRP partecipano alla formazione di complessi PAP solubili, lasciando solo un po 'di HRP libero. Tuttavia, la maggior parte delle reazioni antigene-anticorpo richiede un eccesso assoluto di antigene per formare un complesso solubile. La forma del complesso PAP è abbastanza stabile e non è influenzata dalla quantità di antigene: indipendentemente dall'aggiunta iniziale di antigeni e anticorpi, il rapporto HRP / anti-HRP del risultante complesso PAP è per lo più 3; 2. Viene applicata la sedimentazione centrifuga. I metodi di diffusione della fase liquida e l'osservazione al microscopio elettronico hanno mostrato che il complesso PAP ha una struttura ad anello pentagonale, tre angoli sono HRP e gli altri due angoli sono anticorpi anti-HRP con una massa molecolare di 400-430 kDa e questa struttura è molto stabile.

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