peptide intestinale vasoattivo del liquido cerebrospinale

Il VIP in CSF è generalmente considerato derivato dal sistema nervoso centrale, un neuropeptide costituito da 28 aminoacidi, che ha un duplice ruolo di ormoni e neurotrasmettitori. Il livello di CSF può riflettere l'attività dei neuroni VIP nel sistema nervoso centrale. CSF 2 ml è stato posto in un tubo di plastica pre-raffreddato e l'aprotinina (1000 KIU / ml) è stata aggiunta e conservata a bassa temperatura di -40 ° C. Informazioni di base Classificazione specialistica: classificazione dell'esame: esame del liquido cerebrospinale Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Trovato in malattia cerebrovascolare ischemica acuta, infarto cerebrale. Valore normale: CSF-VIP: 54,9-60.5pg / ml Sopra normale: Nessuna informazione pertinente. negativo: positivo: Suggerimenti: raccogliere CSF 2 ml in un tubo di plastica pre-raffreddato, aggiungere aprotinina (1000 KiI / ml) e conservare a -40 ° C. Valore normale 57,7 ± 2,8 pg / ml. Significato clinico Il livello acuto di malattia cerebrovascolare ischemica, infarto cerebrale e altri CSF è diminuito nei livelli di VIP. I risultati bassi possono essere malattie: precauzioni per la cardiomiopatia ischemica negli anziani CSF 2 ml è stato posto in un tubo di plastica pre-raffreddato e l'aprotinina (1000 KIU / ml) è stata aggiunta e conservata a bassa temperatura di -40 ° C. Processo di ispezione Il metodo è diviso in tre fasi, ovvero reazione antigene-anticorpo, separazione B e F e determinazione della radioattività. (1) Reazione dell'antigene con l'anticorpo: il campione (antigene non marcato), l'antigene marcato e l'antisiero vengono dosati sequenzialmente in una piccola provetta e lasciati riposare a temperatura ambiente (15-30 ° C) per 24 ore per competere completamente per il legame. (2) Separazione di B e F: esistono varie tecniche di separazione e il metodo di precipitazione è comunemente usato. 1 secondo metodo di precipitazione dell'anticorpo: noto anche come metodo diabody, dopo che l'antigene del test reagisce in modo specifico con il primo anticorpo, viene aggiunto il secondo anticorpo corrispondente, in modo che il complesso di anticorpo formato antigene-primo anticorpo-secondo sia co-precipitato. L'antigene marcato B viene separato dall'antigene libero F mediante centrifugazione. Questo metodo prevede una precipitazione specifica, una separazione completa, un basso legame non specifico. Tuttavia, la quantità del secondo anticorpo è grande e il costo è elevato. Inoltre, la concentrazione sierica e la presenza o l'assenza di anticoagulanti possono influenzare i risultati in una certa misura. 2 Metodo di precipitazione con glicole polietilenico (PEG): la proteina si trova in uno stato punto isoelettrico e lo strato di idratazione viene distrutto per causare la precipitazione delle proteine. Il vantaggio di questo metodo è che il PEG è conveniente da preparare, economico e rapido da separare.Lo svantaggio è che ci sono molti precipitati non specifici e la separazione è incompleta. 3 Secondo metodo di precipitazione anticorpo-polietilenglicole: questo metodo non solo ha il vantaggio di una precipitazione rapida del metodo PEG, ma mantiene anche l'effetto della precipitazione specifica del secondo anticorpo, riduce la quantità del secondo anticorpo e riduce la concentrazione di PEG, in modo che la precipitazione non specifica Materiale ridotto. 4 Metodo di adsorbimento del carbone attivo: la parte libera di piccole molecole viene assorbita dall'attività superficiale del carbone attivo. Ad esempio, uno strato di destrano è rivestito sulla superficie del carbone attivo per formare una maglia avente un certo diametro dei pori sulla superficie, permettendo così a piccole molecole di antigene o aptene liberi di sfuggire e di essere adsorbite, mentre il complesso macromolecolare è escluso. Dopo che l'antigene e l'anticorpo sono stati fatti reagire, il carbone attivato con destrano viene aggiunto e lasciato riposare per 5-10 minuti, in modo che l'antigene libero venga adsorbito sulle particelle di carbone attivo e le particelle vengano fatte precipitare mediante centrifugazione e il surnatante contenga l'antigene marcato. (3) Determinazione della radioattività: dopo la separazione di B e F, è possibile misurare la radioattività. Esistono due tipi di strumenti di misurazione: un contatore a scintillazione liquida (misurazione dei raggi beta) e un contatore a scintillazione cristallina (misurazione dei raggi gamma). L'unità di conteggio è il numero di impulsi elettrici emessi dal rivelatore in unità di cpm (numero di impulsi / min). È richiesta una curva standard per ciascuna misurazione e le diverse concentrazioni dell'antigene standard vengono tracciate sull'ascissa e la radioattività corrispondente misurata viene tracciata sull'ordinata. La radioattività può essere facoltativamente B o F e possono anche essere usati i valori calcolati B / B + F, B / F o B / B0. I campioni devono essere determinati in doppio, il valore medio viene preso e la corrispondente concentrazione di antigene viene rilevata sulla curva standard. Non adatto alla folla 1. In caso di papilledema evidente o paralisi cerebrale, le controindicazioni sono controindicate. 2. I pazienti che sono in stato di shock, esaurimento o stato di estinzione e infiammazione cutanea locale e lesioni nella fossa cranica posteriore sono controindicati. Reazioni e rischi avversi Se il paziente presenta sintomi come respirazione, polso o colore anomalo durante la puntura, interrompere immediatamente l'operazione e gestirla di conseguenza.

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