reazione a catena della polimerasi
La reazione a catena della polimerasi è un metodo per amplificare rapidamente uno specifico gene o sequenza di DNA in vitro, ed è anche indicato come metodo di amplificazione in vitro di un gene. La tecnologia PCR è simile al naturale processo di replicazione del DNA e la sua specificità dipende dai primer oligonucleotidici complementari ad entrambe le estremità della sequenza bersaglio. Informazioni di base Categoria di specialisti: Ispezione delle malattie infettive Categoria: Test genetici (DNA) Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Valore normale: no Sopra normale: negativo: Normale: il tipo e la proporzione della flora nel corpo sono normali e il corpo umano si trova in uno stato di equilibrio dinamico e salute. positivo: Un'indicazione positiva è la presenza di alcune infezioni virali. Suggerimenti: prestare attenzione alle normali abitudini alimentari prima del controllo, prestare attenzione all'igiene personale. Valore normale Il tipo e la proporzione della flora nel corpo sono normali e il corpo umano è in uno stato di equilibrio dinamico e salute. Significato clinico La PCR può amplificare rapidamente e in modo specifico qualsiasi gene noto o frammento di DNA di interesse e può facilmente amplificare il gene bersaglio nella miscela di DNA iniziale a livello di picogramma (pg) a un frammento di DNA specifico di nanogramma, microgrammo e milligrammo. Pertanto, la tecnologia PCR è stata rapidamente e ampiamente utilizzata in vari campi della biologia molecolare. Risultati anomali anomalie causate da varie malattie, come la sifilide: sifilide in 1 fase. Cioè, caso difficile, con un periodo di incubazione da 2 a 4 settimane, una massa dura rosso scuro, un'ulcera superficiale, una durezza simile alla cartilagine e un linfonodo periferico gonfio. Sifilide di seconda fase. Dopo 1 o 2 mesi di sifilide primaria, si verificano eruzioni cutanee simpatiche, eruzioni cutanee, brufoli, eruzioni pustolose, ecc. Nella pelle e nelle mucose di tutto il corpo. Placche mucose, catarro umido piatto possono verificarsi nella mucosa e l'infezione è forte. 3 sifilide di terza fase. Si è verificata da 2 a 3 anni o anche 10 anni dopo l'infezione, la pelle è un gonfiore simile alla gomma e può anche interessare ossa, articolazioni, cuore, vasi sanguigni, manifestare infiammazione aortica, insufficienza aortica e aneurisma aortico, ecc., Invadendo il nervo Paralisi del midollo spinale, paralisi generale (demenza paralitica) e così via. Persone che devono essere esaminate: i pazienti sospettati di una particolare malattia sono sottoposti a test di specificità molecolare. I risultati positivi possono essere malattie: sifilide, sifilide primaria, precauzioni di sifilide secondaria Folla inappropriata: no Vietato prima dell'esame: presta attenzione alle normali abitudini alimentari e presta attenzione all'igiene personale. Requisiti per l'ispezione: collaborare attivamente con il medico. Processo di ispezione La PCR consiste in tre fasi di reazione di base: denaturazione-ricottura-estensione: 1 Denaturazione del DNA modello: Dopo che il DNA modello è stato riscaldato a circa 93 ° C per un certo periodo di tempo, il DNA a doppio filamento del DNA modello a doppio filamento o amplificato dalla PCR viene dissociato per renderlo un singolo filamento in modo che si leghi al primer. Viene preparata la reazione rotonda. 2 ricottura del DNA del modello e del primer (ripiegatura): dopo che il DNA del modello è denaturato in un singolo filamento mediante riscaldamento, la temperatura viene abbassata a circa 55 ° C e il primer viene accoppiato con la sequenza complementare del singolo filamento del DNA modello. 3 estensione del primer: modello di DNA - coniugato di primer sotto l'azione della Taq DNA polimerasi, dNTP come materiale di reazione, sequenza target come modello, secondo il principio di associazione di base e replicazione semi-riservata, sintetizza un nuovo complementare al filamento di DNA modello La catena di replica semi-riservata ripete il processo ciclico di denaturazione-ricottura-estensione per ottenere più "catene di replica semi-riservate", e questa nuova catena può essere usata come modello per il ciclo successivo. Sono necessari da 2 a 4 minuti per completare ciascun ciclo e l'amplificazione del gene da amplificare può essere amplificata diversi milioni di volte in 2-3 ore. Il numero di cicli richiesti per raggiungere l'altopiano (Plateau) dipende dalla copia del modello nel campione. La tecnologia PCR ha alta sensibilità, specificità, funzionamento semplice e rapido e ha un importante valore applicativo in molti aspetti come la ricerca nelle scienze della vita, l'igiene alimentare, le cure mediche, la scienza forense e il monitoraggio ambientale. Non adatto alla folla Popolazione tabù: non ci sono tabù speciali. Reazioni e rischi avversi Questo test generalmente non causa complicazioni e pericoli speciali.
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