lattato deidrogenasi lacrimale

LDH (EC 1.1.1.27) e MDH (EC 1.1.1.37) nelle lacrime derivano principalmente dall'epitelio corneale dell'occhio. La loro concentrazione nelle lacrime è circa 20 volte quella dell'enzima nel siero. Lo strappo LDH contiene principalmente la subunità M, con il più alto contenuto di LDH5 e LDH4. L'isoenzima MDH delle lacrime può essere separato da MDH e MDHm mediante elettroforesi della membrana di aceto, mentre le lacrime delle persone sane sono principalmente MDH. Informazioni di base Categoria di specialisti: Classificazione oftalmologica: esame biochimico Genere applicabile: se uomini e donne applicano il digiuno: non il digiuno Risultati dell'analisi: Al di sotto del normale: Ulcera corneale batterica e danno chimico cheratocongiuntivale. Valore normale: Lacrime lattato deidrogenasi: 1,29-9,02U / L Sopra normale: Danno epiteliale congiuntivale corneale. negativo: positivo: Suggerimenti: strofinare gli occhi con le mani, questo causerà infezioni agli occhi, aggravando la condizione e influenzando i risultati dell'ispezione. Valore normale LDH1.29 ~ 9.02U / L; Isoenzima LDH LDH 10,66 ± 0,51%; L'attività di MDH è 0,25 ~ 2,2 U / L; Isoenzima MDH MDH 80% ~ 98,1%; MDHm> 20% è anormale; LDH / MDH <69 anni ha 3,96 ± 0,7; > 70 anni 4,55 ± 0,51. Significato clinico Risultati anomali Nell'ulcera batterica batterica e nel danno chimico cheratocongiuntivale, l'attività lacrimale di LDH e MDH è diminuita. Il rapporto H / M dell'isoenzima LDH e MDHm sono stati aumentati in diversi gradi, ma MDHm potrebbe riflettere il danno corneale e il grado di lesione. Ad esempio, nelle ulcere corneali e nella sospetta cheratocongiuntivite secca (KCS), la MDHm è aumentata e il rapporto H / M del LDH lacrimale non è cambiato in modo significativo. La determinazione del rapporto tra isoenzima LDH e LDH / MDH nelle lacrime contribuisce alla diagnosi differenziale di trachoma e congiuntivite cronica. Il rapporto H / M di LDH in entrambe le lacrime è diminuito in modo significativo, ma nel trachoma, il rapporto di lacrime LDH / MDH non è cambiato e la subunità M di LDH è aumentata in modo più significativo. È necessario verificare la diagnosi di malattia corneale nella popolazione. Bassi risultati possono essere malattie: precauzioni batteriche per l'ulcera corneale Persone inadatte: generalmente nessuna popolazione speciale. Tabù prima dell'esame: strofinarsi gli occhi con le mani, questo causerà infezioni agli occhi, aggravando la condizione e influenzando l'effetto di ispezione. Requisiti per l'ispezione: verificare con le istruzioni del medico. Processo di ispezione 1, metodo colorimetrico: (1) Il lattato di potassio e il lattato di sodio possono anche essere usati come substrati LDH, ma poiché sono soluzioni acquose, il contenuto non è abbastanza accurato e una conservazione impropria può causare chetoacidi per inibire le reazioni enzimatiche. Il lattato di litio è solido, stabile e facile da pesare. (2) Oltre al tampone dietanolamina, è possibile utilizzare anche il tampone Tris o pirofosfato per evitare l'inibizione dell'LDH da parte del tampone glicina nel metodo Jinshi originale e il tasso di rilevamento positivo è migliorato. (3) Il colorimetrico dovrebbe essere completato entro 5-15 minuti, altrimenti l'assorbanza diminuirà. (4) Quando il risultato è> 500 U, il campione può essere diluito con soluzione fisiologica e quindi misurato, e il risultato viene moltiplicato per il fattore di diluizione. 2. Metodo di monitoraggio continuo: (1) Il campione non deve essere emolizzato: quando l'emolisi raggiunge Hb0,8 g / L, l'attività di LDH può essere aumentata del 58%. (2) I campioni sono stati conservati a temperatura ambiente (25 ° C), l'attività enzimatica era stabile entro 2 giorni, l'attività enzimatica in frigorifero era ridotta e LDH3 e LDH4 sono stati tutti inattivati ​​a -20 ° C durante la notte. (3) Risultati soddisfacenti con siero o plasma anticoagulato con eparina, l'ossalato può inibire l'attività dell'LDH. (4) Dopo la ricostituzione, la soluzione diventa torbida o l'assorbanza iniziale> 0,5 deve essere eliminata. (5) L'attività del lattato deidrogenasi può essere misurata mediante reazione bidirezionale positiva e negativa, ma l'intervallo di riferimento varia a seconda della temperatura di reazione, del substrato e della concentrazione del tampone. Usando acido lattico e NAD come substrati, il tasso di aumento dell'assorbanza è stato monitorato a 340 nm come reazione positiva, espressa come LD-L; piruvato e NADH sono stati usati come substrati e il tasso di riduzione dell'assorbanza a 340 nm è stato monitorato come reazione inversa, espressa come LD-P. Rispetto ai due metodi di reazione positiva e negativa, i principali vantaggi del metodo LD-L sono: A. La stabilità del liquido del substrato di reazione positiva è maggiore della stabilità della reazione inversa: il primo frigorifero può essere conservato per più di 6 mesi, mentre il secondo è solo per pochi giorni; L'intervallo lineare di risposta in frequenza (assorbanza tracciata rispetto al tempo di monitoraggio t) è più ampio; la ripetibilità C. è migliore di LD-P. Poiché la velocità di reazione inversa è più veloce della velocità di reazione diretta, il suo valore di riferimento è circa il doppio di quello di LD-L. Non adatto alla folla Nessuno. Reazioni e rischi avversi Nessuno.

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