Aminoácidos del líquido cefalorraquídeo
Hay una gran cantidad de aminoácidos libres en el sistema nervioso. Además de participar en el proceso metabólico general del sistema nervioso y mantener el equilibrio de agua y electrolitos intracelulares y externos, estas sustancias también actúan como sustancias de transferencia química involucradas en la excitación e inhibición nerviosa, y se excitan a las células nerviosas. Los aminoácidos como el ácido glutámico, el ácido aspártico y similares tienen una acción inhibitoria como el ácido gamma aminobutírico (GABA) y la glicina. Información básica Clasificación del especialista: clasificación del examen neurológico: examen del líquido cefalorraquídeo Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican el ayuno: ayuno Consejos: después de la punción lumbar CSF, agregue 2 ml de sulfosaliciluro de sodio 5 mg / ml para sacudir la proteína precipitada, colóquela inmediatamente en el rizador y colóquela en el refrigerador a -20 ° C dentro de las 10 horas o colóquela en -40 ° C ~ -70 ° C lo antes posible. . No más de 2 meses. Se debe evitar la contaminación de la sangre (ya que el contenido de Asp en los glóbulos rojos es 200 veces mayor que el plasma). Se requiere suspender el muestreo después de una semana de tomar el medicamento. Valor normal Método de HPLC Ácido aspártico (ácido aspártico, Asp) 1.6 ± 1.7 μmol / L; Ácido glutámico (Glu) 4.6 ± 1.2 μmol / L; Serina (Serina, Ser) 33.9 ± 4.9 μmol / L; Histidina (Hisidina, His) 10.0 ± 2.7 μmol / L; Glicina (Gly) 8.6 ± 2.1 μmol / L; Treomina (Thr) 32.4 ± 12.6 μmol / L; Arginina (Arginina, Arg) 35.5 ± 6.1 μmol / L; Alanina (Alaine, Ala) 47,2 ± 9,1 μmol / L; Tirosina (Tyr), 10.7 ± 2.0 μmol / L; Cistina (Cistina, Cys) 1.0 ± 1.1 μmol / L; Metionina (Met) 0.3 ± 0.5 μmol / L; Prolina (Vatine, Val) 18.7 ± 4.1 μmol / L; Fenilalanina (Phe) 12.0 ± 2.3 μmol / L; Isoleucina (Ileeucina, Ile) 6.5 ± 1.7 μmol / L; Leucina (Leu) 9.3 ± 2.7 μmol / L; Lisina (Lys), 22.2 ± 4.3 μmol / L. Importancia clínica En circunstancias normales, la cantidad total de aminoácidos en el LCR es aproximadamente del 10% al 30% del contenido plasmático. Cuando el color amarillento de varios niveles de obstrucción de la médula espinal y la meningitis es de color amarillo, la cantidad total de aminoácidos en el LCR aumenta significativamente; la neurosífilis en etapa tardía se eleva ligeramente; la esclerosis múltiple y la psicosis senil disminuyen. Se pueden separar más de 20 tipos de aminoácidos en el LCR por cromatografía. La importancia clínica de los aminoácidos es la siguiente. Meningitis bacteriana, radiculitis meníngea, meningitis por cáncer, Garin-Bujadox-Bannnarth, etc. CSF glutamato, glicina, isoleucina, leucina, cistina, fenilalanina, prolina Alto. La glicina y la leucina están elevadas en las meninges asépticas LCR. Meningitis tuberculosa, encefalitis japonesa, poliomielitis, aumento de triptófano en LCR. Absceso cerebral, infección sistémica, esquizofrenia, glicina, glutamato, prolina, aspartato aumentado, la esquizofrenia también mostró un aumento de alanina. Coma hepático, hemorragia cerebral, epilepsia, narcolepsia severa, glutamina elevada y disminución de la concentración de ácido gamma-aminobutírico en LCR en pacientes con epilepsia. Muchas enfermedades degenerativas neurológicas como la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de la neurona motora, la degeneración cerebelosa espinal, el aspartato elevado en el LCR y la disminución del glutamato. La concentración de lisina y fenilalanina en el cáncer, el glioblastoma CSF se incrementa. Los aminoácidos en el LCR de varios pacientes urinarios de aminoácidos pueden cambiar en consecuencia, por ejemplo, el contenido de aminoácidos de cadena ramificada como guanidina, leucina e isoleucina en el LCR del jarabe de arce a menudo aumenta, y el contenido de arginina en la arginina aumenta. Aumento, lisineuria CSF aumentó lisina. Los resultados bajos pueden ser enfermedades: los resultados de esclerosis alta pueden ser enfermedades altas: convulsiones y síndrome de epilepsia, síndrome de epilepsia sintomática, meningitis, precauciones de neurosífilis Después de la punción lumbar del LCR, agregue 2 ml de sulfosalicilato de sodio 5 mg / ml para agitar la proteína precipitada, colóquela inmediatamente en la olla rizadora y luego póngala en el refrigerador a -20 ° C dentro de las 10 horas o colóquela en -40 ° C ~ -70 ° C lo antes posible. No más de 2 meses. Se debe evitar la contaminación de la sangre (ya que el contenido de Asp en los glóbulos rojos es 200 veces mayor que el plasma). Se requiere suspender el muestreo después de una semana de tomar el medicamento. Se pueden separar y determinar más de 20 tipos de aminoácidos mediante cromatografía líquida de alto rendimiento y analizador de aminoácidos. Algunas diferencias normales informadas en el contenido normal pueden ser causadas por el uso de instrumentos, métodos y condiciones de procesamiento y almacenamiento de muestras, y existen contradicciones en los cambios de concentración de aminoácidos en el LCR de ciertas enfermedades, por lo que la determinación de aminoácidos en el LCR Se necesita más investigación para la importancia clínica. El contenido de aminoácidos en el LCR aumentó con la edad, incluyendo ácido glutámico, serina, histidina, treonina, arginina y cistina, pero no hubo diferencias de género. Proceso de inspección (1) Desalación: se tomaron 10 ml del líquido cefalorraquídeo filtrado en una columna de cromatografía que contenía 5 ml de resina de intercambio iónico Dowex-50 × 8, y la columna se enjuagó con 100 ml de agua destilada, y el efluente se desechó. El aminoácido se eluyó con 30 ml de amoniaco acuoso 2 mol / l. El eluato se evaporó al vacío a 40ºC y el residuo se disolvió en 1 ml de agua destilada. Primero se desproteinizó 1 ml de líquido cefalorraquídeo con 40 mg de ácido sulfosalicílico.Después de la centrifugación, se añadieron 0,5 ml del sobrenadante a una columna de cromatografía que contenía 1 ml de Dowex 50 × 8, y la columna se enjuagó con 40 ml de agua destilada, y el efluente se desechó. El aminoácido se eluyó con 15 ml de amoniaco acuoso 2 mol / l. El eluato se evaporó al vacío a 40ºC y el residuo se disolvió en 0,05 ml de agua destilada. (2) Manchado: se agregaron 4 μl del concentrado desmineralizado de líquido cefalorraquídeo a 1,5 cm del lado izquierdo de la placa de cromatografía de capa delgada; la cantidad de la muestra fue de 2 μg de nitrógeno amino, y cuanto menor sea el diámetro, mejor. (3) Oxidación de aminoácido que contiene azufre: se añadieron 0,5 μl de H2O2 que contiene molibdato de amonio a la mancha y se dejó reposar a temperatura ambiente durante 30 minutos. (4) Capa de separación: en primer lugar, la placa de cromatografía de capa delgada se coloca en un cilindro de cromatografía que contiene el primer disolvente, y la capa se estira durante aproximadamente 60 minutos, es decir, cuando el disolvente se eleva a 9,5 cm, se retira y luego se sopla en un flujo de aire a 40 ° C durante 30 minutos. . La placa de cromatografía de capa delgada se hizo girar a 90 ° C y se colocó en un cilindro de cromatografía que contenía un segundo disolvente durante aproximadamente 100 minutos, es decir, cuando el disolvente se elevó a 9,5 cm, se sacó y se colocó a 40 ° C durante la noche. (5) El reactivo de ninhidrina se roció sobre la placa de cromatografía de capa delgada, y luego se colocó en un horno a 100 ° C durante 30 minutos para observar las manchas de color púrpura-azul del aminoácido, y las manchas de prolina eran amarillas. No apto para la multitud. 1. Si hay papiledema evidente o parálisis cerebral, las contraindicaciones están contraindicadas. 2. Los pacientes que están en estado de shock, agotamiento o en peligro de extinción, inflamación local de la piel y lesiones en la fosa craneal posterior están contraindicados. Reacciones adversas y riesgos Si el paciente tiene síntomas como respiración, pulso o color anormal durante la punción, detenga la operación de inmediato y trátela en consecuencia.
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