Determinación de la concentración de proteínas

La determinación de la concentración de proteínas es la determinación de la concentración de proteínas por métodos químicos o físicos y es un método importante que se usa a menudo para calcular la tasa de recuperación de los métodos de purificación. El método biuret es el primer método para determinar la concentración de proteínas por colorimetría.El azufre amonio no interfiere con el desarrollo del color, los enlaces Cu2 + y péptidos de proteínas, y el complejo de residuos de tirosina para formar azul púrpura El compuesto tiene una absorción máxima a una longitud de onda de 540 nm. El método de biuret se usa comúnmente para la determinación de soluciones de proteínas en el rango de 0.5 g / L a 10 g / L. Información básica Clasificación del especialista: clasificación del examen cardiovascular: examen de sangre Género aplicable: si los hombres y las mujeres aplican el ayuno: ayuno Resultados de análisis: Debajo de lo normal: Común en enfermedades como la desnutrición. Valor normal: Valor normal: 60-80 g / l Por encima de lo normal: Común en enfermedades como la obesidad. Negativo: Positivo: Consejos: No coma alimentos grasosos y ricos en proteínas el día anterior, y evite beber en exceso. Valor normal El valor normal del cuerpo humano es generalmente 60-80 g / L. Importancia clínica Resultado anormal 1. Método de biuret: El método de biuret es el primer método para determinar la concentración de proteínas por colorimetría. El azufre amonio no interfiere con el desarrollo del color, los enlaces de Cu2 + y péptidos de proteínas, y el complejo de residuos de tirosina, formando púrpura Complejo azul, que tiene una absorción máxima a una longitud de onda de 540 nm. El método de biuret se usa comúnmente para la determinación de soluciones de proteínas en el rango de 0.5 g / L a 10 g / L. 2. Método de Lowry: Cu + forma un complejo con proteínas en una solución alcalina, y luego el complejo reduce el reactivo de fósforo, molibdeno, fósforo y ácido fosfórico (reactivo de folin-fenol), y el resultado es un color azul oscuro. Este método es mucho más sensible que el método de biuret y es adecuado para la determinación de soluciones de proteínas en el rango de 20 mg / L a 400 mg / L. 3. Método de absorción ultravioleta: la mayoría de las proteínas tienen la absorción máxima característica a una longitud de onda de 280 nm. Esto se debe a la presencia de tirosina, triptófano y fenilalanina en la proteína, que puede usarse para determinar el contenido de 0.1-0.5mg / ml. Solución proteica. Personas que necesitan ser revisadas Hay personas que son débiles y débiles, con sueño, piel, mucosas e inatención. Los resultados bajos pueden ser enfermedades: desnutrición, los resultados de distrofia muscular pueden ser enfermedades altas: obesidad, precauciones simples para la obesidad Tabú antes de la prueba: No coma alimentos muy grasosos y ricos en proteínas el día anterior a la prueba, para evitar beber en exceso. El contenido de alcohol en la sangre afecta directamente los resultados de la prueba. Después de las 8 pm del día anterior al examen médico, debe ayunar. Requisitos para el examen: al tomar sangre, debe relajar la mente para evitar la contracción de los vasos sanguíneos causada por el miedo y aumentar la dificultad de la extracción de sangre. En la medición, una pequeña cantidad del complejo proteína-colorante se adsorbe en la pared de la cubeta, y la cantidad de adsorción del complejo es insignificante. Después de la medición, la cubeta azul se puede lavar con etanol. Proceso de inspección Los sujetos se recogieron por vía venosa y se analizaron a tiempo para la separación del suero. Dibuje una curva estándar: tome una placa de microtitulación de 96 pocillos y agregue reactivos. Después de agregar el reactivo, absorba con precisión 20 μl de la solución de muestra en el pocillo estándar de la enzima, agregue 200 μl de reactivo BCA, agite suavemente, incube a 37 ° C durante 30-60 min, enfríe a temperatura ambiente, use un blanco como control y compare a 590 nm en el lector de microplacas. El color, con el contenido de albúmina de suero bovino como la abscisa y la absorbancia como la ordenada, dibuja una curva estándar. Usando la curva estándar en blanco como control, el contenido de proteína de la muestra se encontró a partir de la curva estándar basada en la absorbancia de la muestra. No apto para la multitud. Personas con una tendencia significativa a sangrar. Reacciones adversas y riesgos 1, hemorragia subcutánea: debido al tiempo de prensado de menos de 5 minutos o la tecnología de extracción de sangre no es suficiente, etc. puede causar sangrado subcutáneo. 2, molestias: el sitio de punción puede aparecer dolor, hinchazón, sensibilidad, equimosis subcutánea visible a simple vista. 3, mareos o desmayos: en la extracción de sangre, debido al estrés emocional, el miedo, el reflejo causado por la excitación del nervio vago, la presión arterial disminuida, etc. causada por un suministro insuficiente de sangre al cerebro causado por desmayos o mareos. 4. Riesgo de infección: si usa una aguja sucia, puede estar en riesgo de infección.

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