Vyšetření chromatinu buněk plodové vody

Amniocentéza může určit pohlaví plodu a nepřímo diagnostikovat pohlavně přenosná onemocnění, jako jsou vrozené malformace, vrozené metabolické defekty, chromozomální abnormality a pohlavně přenosná onemocnění, a tím zabránit narození dětí s takovými genetickými chorobami. . Amniocentéza se obvykle provádí ve druhém trimestru (16–21 týdnů těhotenství). Moč by měla být před chirurgickým zákrokem vypuštěna oběma rukama na bocích a jemně otáčet kolem pasu a břicha. Poté na zádech použijte B-ultrazvuk k detekci polohy, vyberte bod vpichu a vpich za přísných aseptických podmínek. Základní informace Kategorie specialisty: Kontrola matek Kategorie: genetické testování (DNA) Použitelné pohlaví: zda ženy půst: půst Výsledky analýzy: Pod normální: Normální hodnota: Ne Nad normální: Negativní: Normální hodnota je záporná: X chromatin:> 0,06 pro plod plodu a 0,05 pro plod plodu, Pozitivní: Pravděpodobnost recesivní recesivní choroby spojené s X je stanovena na základě výsledků. Tipy: Amniocentéza se obvykle provádí ve druhém trimestru (16–21 týdnů těhotenství). Normální hodnota X chromatin> 0,06 u ženských plodů, <0,05 u mužských plodů. Y chromatin> 0,05 je samec plodu a <0,04 je samice plodu. Klinický význam U rodin s rodinnou anamnézou recesivních dědičných chorob spojených s X je rodičovský fenotyp normální. Pokud je matka nositelem genu způsobujícího onemocnění, je pravděpodobnost syna dítěte 50%, dcera je fenotypově normální, pokud je polovina Může být dopravcem. Když je otec pacient, je syn normální a dcera je nositeli, jako je hemofilie A, hemofilie B, deficit glukózy-6-fosfátdehydrogenázy, červeno-zelená slepota, pseudohypertrofická svalová dystrofie, Vrozený nedostatek gama globulinu. Pozitivními výsledky mohou být onemocnění: barevná slepota, preventivní opatření pro hemofilii Amniocentéza se obvykle provádí ve druhém trimestru (16–21 týdnů těhotenství). Moč by měla být před chirurgickým zákrokem vypuštěna oběma rukama na bocích a jemně otáčet kolem pasu a břicha. Poté na zádech použijte B-ultrazvuk k detekci polohy, vyberte bod vpichu a vpich za přísných aseptických podmínek. Obecně se odebere asi 20 ml plodové vody a umístí se do čisté a sterilizované centrifugační zkumavky pro okamžitou kontrolu. Proces inspekce (1) Vezměte 15 až 30 ml plodové vody po dobu 16 až 20 týdnů těhotenství a odstřeďte při 1000 r / ml po dobu 10 minut. (2) Přebytečný supernatant zlikvidujte, nechte 1 ml plodové vody a vysrážených buněk a jemně se rozptýlí do buněčné suspenze. (3) Přeneste do baňky o objemu 25 ml čtvercové kultury, přidejte 3 ml média o pH 6,5 až 6,8 (obsahujícího penicilin 100 U / ml, streptomycin 100 μg / ml) a 1 ml telecího séra a inkubujte v inkubátoru při 37 ° C. (4) Po 7 až 10 dnech kultivace bylo pozorováno velké množství kolonií podobných fibroblastům nebo epiteloidním buňkám. V tomto okamžiku lze čerstvé médium vyměnit. (5) Když jsou buněčné kolonie expandovány na kousky a existuje mnoho průsvitných buněk s kruhovým dělením, lze přidat kolchicin tak, aby výsledná koncentrace byla 0,1 až 0,3 μg / ml, a poté kultivovány v inkubátoru při 37 ° C po dobu 5 až 6 hodin. (Výše uvedené postupy jsou prováděny za aseptických podmínek). Standardy sklizně: 1 s fibroblasty jako hlavním typem, růst buněk, 2 s 10x okulárky a 20x objektivní pozorování, rostoucí buněčné klony pokrývají 1 nebo více úplných zorných polí, 3 viz více než 10 průsvitných Kulaté buňky a více než 10 dvojitých kulatých jasných dělicích buněk. (6) Pokud buňky nerostou energicky, růstový cyklus není jednotný nebo buňky stárnou a není dosaženo standardu sklizně, subkultura může pokračovat v původní lahvi. Metoda: Za sterilních podmínek byl nejprve kultivační roztok nalit a bylo přidáno několik kapek 2,5 g / l sterilního roztoku trypsinu a směs byla protřepána a nalita. Dále bylo přidáno 5 až 10 kapek trypsinu a jemně třepáno při 37 ° C po dobu asi 5 minut, aby adherované buňky vypadly. Přidaly se 4 ml čerstvého média obsahujícího telecí sérum a kultura se nechala stát při 37 ° C po dobu 4 až 5 hodin. Pečlivě vyměňte kultivační médium a pokračujte v kultivaci, může být sklizeno 3 až 5 dní po průchodu. (7) Přeneste kultivační roztok do odměrné centrifugační zkumavky, přidejte do baňky 1 ml roztoku ED-TA-trypsinu, umístěte jej do inkubátoru při 37 ° C po dobu 5 minut a poté opláchněte adherentní buňky loketní pipetou (lze použít také 2,5 g /). L trávení trypsinového roztoku). Buňky oddělené od stěny láhve byly nality do centrifugační zkumavky, smíchány s původní kultivační kapalnou fází a kultivační baňka byla promyta malým množstvím teplého fyziologického roztoku a promyté buňky byly také nality do centrifugační zkumavky a centrifugovány při 1000 r / min po dobu 10 minut. (8) Supernatant se odsaje, přidá se 3 až 5 ml 0,075 mol / l KCl hypotonického roztoku předem zahřátého na 37 ° C a nastaví se na 37 ° C po dobu 10 až 15 minut. (9) Předběžná fixace, fixace a příprava jsou stejné jako metoda přípravy vzorků chromozomů z periferní krve. Nevhodné pro dav 1. Během těhotenství se objevily známky potratu. 2. Když tělesná teplota překročí 37,5 ° C. 3. Včasná exfoliace placenty, břišní infekce a hnisavé. Nežádoucí účinky a rizika (1) Poranění matky: vpíchněte jehlu bodnoucí krevní cévy způsobené hematomem břišní stěny, suberosálním hematomem dělohy. Amniotická tekutina občas vstupuje do mateřského krevního oběhu z propíchnuté díry a způsobuje embolii amniotické tekutiny. Před propíchnutím nebyl močový měchýř vyprázdněn a močový měchýř byl zraněn. (2) Poranění plodu, placenty a pupeční šňůry: vpichovací jehla může poškodit plod a může způsobit krvácení a placenta a pupeční šňůra může také způsobit krvácení nebo hematom. Při krvácení do plodové vody by proto měl být identifikován zdroj krvácení. Pokud máte podezření, že jste z plodu, měli byste i nadále poslouchat fetální srdce. (3) Únik plodové vody: pooperační plodová voda uniká z dírky, způsobuje příliš málo plodové vody, ovlivňuje vývoj plodu a dokonce způsobuje potrat nebo předčasný porod. (4) potrat nebo předčasný porod: incidence potratu nebo předčasného porodu je 0,1% - 0,2%, často se vyskytuje během jednoho týdne po chirurgickém zákroku, dokonce i po propíchnutí vede k předčasnému prasknutí membrán k předčasnému porodu. (5) nitroděložní infekce: po operaci může být mateřská horečka. Intrauterinní infekce může způsobit abnormální vývoj plodu nebo dokonce smrt plodu. Amniocentéza by proto měla být přísně aseptická.

Materiál na této stránce je určen pro obecné informační účely a není určen k tomu, aby představoval lékařskou radu, pravděpodobnou diagnózu nebo doporučenou léčbu.